PITESTI - ROMANIA

PLAN SECTORIAL– ADER 2020 Contractor:

INSTITUTUL DE CERCETARE DEZVOLTARE PENTRU POMICULTURĂ PITEŞTI-MĂRĂCINENI

Obiectivul general: 2 STCPM

Numărul /codul proiectului 31/ADER 2.2.7.

Contract: 227/27. 10. 2011

Anul începerii: 01.11. 2011 Anul finalizării: 10.12. 2014 Durata: 37,5 luni

Denumirea proiectului:ADER 2.2.7- Tehnici de producere şi menţinere a materialului săditor

pomicol din categoriile biologice candidat, prebază şi bază

Persoana de contact:Dr. ing. ISAC VALENTINA

Date contact:Tel: 0040-248-278066; Fax: 0040-248-278477; v_isac2002@yahoo.com

31/ADER 2.2.7. Obiectivul general 2 STCPM:Perfecţionarea sistemelor şi tehnologiilor de cultura aplantelor în vederea asigurării sustenabilităţii fermelorcomerciale în contextul creşterii performanţelor demediu

Obiectivul specific 2.2 ADERVerigi tehnologice/ tehnologii inovative de cultură aplantelor care să asigure garantarea veniturilor fermelorcomerciale în condiţiile respectării criteriilor de mediu şieco - condiţionalitate

31/ADER 2.2.7.Obiectivele Proiectului1. Elaborare model experimental

2. Crearea condiţiilor impuse de reglementările în vigoare pentru menţinereaplantelor candidat (spaţii insect proof). Experimentarea şi introducereatehnicilor moderne privind diagnosticarea şi testarea virală

3. Evaluarea şi implementarea metodelor rapide (ELISA, PCR) pentrudeterminarea stării de sănătate virală a regeneranţilor după terapie.

4. Dezvoltarea procedeelor de termo- şi chimioterapie, cultură de meristemepentru eliminarea virusurilor la speciile pomicole şi menţinerea materialuluibiologic candidat.

5. Managementul producerii materialului săditor pomicol conform schemelor decertificare din legislaţia actuală prin folosirea unor elemente biotehnologice înînmulţirea plantelor sănătoase.

6. Realizarea unor verigi tehnologice privind obţinerea materialului biologic dincategorii biologice superioare

31/ADER 2.2.7.Rezultatele scontate a se obţine Metode noi, rapide, fiabile, economice şi cu o mare putere discriminatorie în

detectarea şi identificarea patogenilor virali. Tehnologii/verigi tehnologice eficiente privind testarea virală, eliberarea de

virusuri şi menţinerea materialului biologic pomicol necesar producerii unorplante care să îndeplinească toate standardele impuse de certificare;

Selecţionarea celor mai bune clone din punct de vedere al autenticităţii,calităţilor pomologice şi al productivităţii;

Metode optimizate pentru devirozarea materialului infectat, obţinereaplantelor candidat;

Tehnologii/secvenţe tehnologice de menţinerea şi înmulţire a materialuluisăditor pomicol prin metode clasice şi neconvenţionale (culturi de ţesuturi);

Ghiduri de bune practici pentru producerea, menţinerea şi multiplicareamaterialului săditor pomicol;

Metode şi proceduri care să conducă la îmbunătăţirea schemelor actuale decertificare a materialului săditor;

Spaţii protejate pentru menţinerea plantelor candidat, prebază şi bază înconformitate cu normele în vigoare;

Obţinerea materialului prebază şi conservarea în biodepozitar; Completarea bazei materiale necesare testărilor şi stabilirii tehnicilor şi

tehnologiilor de lucru; Producerea materialului săditor bază.

31/ADER 2.2.7.- FAZA 6

Denumirea fazei 6:Înmulţirea materialului biologic în vederea obţinerii

plantelor BazăObiectivele fazei 6: Retestarea materialului Prebază existent Testarea materialului biologic înmulțit și obţinerea

de plante Bază Retestarea materialului Bază existent Participare manifestări ştiinţifice/publicaţii – ghid

31/ADER 2.2.7.- FAZA 6Rezultatele scontate: Producerea prin metode clasice şi

neconvenţionale şi menţinerea plantelor din categorii biologice superioare. Constituirea nucleului de plante sănătoase şi conservarea în biodepozitar/raport

Lucrări ştiinţifice, publicaţii, ghid

Retestarea materialului Prebază existent la ICDP Piteşti-Mărăcineni Rezultatele testelor DAS - ELISA şi biologice, nu au scos în evidenţă rezultate

pozitive (ceea ce înseamnă că plantele sunt sănătoase) la probele testate după cum urmează:

la măr 11 soiuri şi 1 portaltoi pentru virusurile ACLSV, ApMV, ASGV, ASPV, ApP,

Platycarpa scaly bark, Spy epinasty and decline, Russet ring;

la păr şi gutui 9 soiuri şi 2 portaltoi pentru virusurile ASGV, ASPV, Rubbery wood,

Pear decline phytoplasma, Vein yellows/red mottle;

la cireş 6 soiuri şi vişin 6 soiuri şi şi 5 portaltoi pentru virusurile ACLSV, ApMV,

ArMV, PDV, PNRSV, TBRV, CLRV, RpRSV, SLRSV;

la prun 4 soiuri, cais 1 soi şi 4 portaltoi pentru virusurile ACLSV, ApMV, , PDV,

PNRSV,PPV, ACLRV;

la piersic pentru virusurile ACLSV, ApMV, PDV, PNRSV, PPV, SLRSV, ACLRV, PLMVd.

Testare virală prin metoda biologică Pentru o identificare cât mai sigură a eventualelor

infecţii virale la plantele mamă din categoriile biologice Prebază şi Bază, în anul 2014 s-a înfiinţat un nou câmp de cu indicatori lemnoşi. Câmpul cuprinde toate speciile lemnoase, iar ca indicatori au fost utilizaţi:

-la măr: Lord Lambourne, Malus platycarpa, Spy 227, Golden delicious, Virginia Crab, R 12-740-7A;

-la păr: Williams, Beurre Hardy, Doyenne du Comice; -la prun: Vânăt de Italia, Agen 707, Tuleu dulce, GF

305; -la cais şi piersic: GF 305; -la cireş şi vişin: Sam, Bing.

Testarea materialului biologic înmulţit şi obţinerea plantelor Bază; Rezultate privind înmulţirea prin butăşire a unor specii de portaltoi BazăNr.crt.

Specia Portaltoiul % deînrădăcinare

Mediarădăcinilor/

butaş

Media lungimii 

înrădăcinată/butaş (cm)

Lungimea medie aanticipaţilor/

butaş (cm)

1 Cireş IP‐C2 96,9 62 0,8 0,8

2 Cireş IP‐C3 80,8 14,1 1,3 0

3 Cireş IP‐C4 93 14,9 1,9 0

4 Cireş IP‐C5 78,1 38,7 2,9 2,5

5 Cireş IP‐C7 93,6 56,8 3 1,2

6 Piersic şi nectarin

Adaptabil 85,3 22,4 1,6 8,2

7 Cais Apricor 91,7 13,8 0,8 0,9

8 Prun Mirobolan dwarf

58,9 9,4 1 0

9 Prun BN4Kr 54,9 14,5 1,8 6,4

10 Păr şi gutui Gutui A 38,9 10,3 4,8 0

Plante certificate la categoria Bază -1

Specia Soiul Număr plante certificate

Lot nr. Document certificare

Capşun Premial 3000 4AG5631 – 4AG02 Document oficial de certificare 

28/17.10.2014Real 1500 4AG5671 – 4AG02

Magic 3000 4AG5641 – 4AG02

Redgauntlet 2000 4AG5651 – 4AG02

Benton 1500 4AG5661 – 4AG02

Mur Darrow 200 3AG6471 – 3AG01 Document oficial de certificare 

100/28.10.2014Thornfree 250 3AG 6481– 3AG01

Dar 8 100

Dar 24 100

Zmeur Opal 500 4AG2681 – 4AG01 Document oficial de certificare 

99/28.10.2014

Plante certificate la categoria Bază -2

Portaltoi măr M106 1000 4AG5571 – 4AG01 Document oficial de certificare 27/17.10.2014

Gutui Gutui A 50 Document oficial de certificare BN 70 50

Prun Mirobolan dwarf 50 Document oficial de certificare Mirobolan C 5 50

BN‐4 Kr 25Piersic Adaptabil 50 Document oficial 

de certificare Miroper 25Cais Apricor 30 Document oficial 

de certificare Cireş/vişin IP‐C 2 10 Document oficial 

de certificare IP‐C 3 10IP‐C 4 10IP‐C 5 10 Document oficial 

de certificare 

Plante certificate la categoria Prebază - 2014

Specia Soiul Număr plante certificate

Lot nr. Document certificare

Afin Blueray 20 4AG2501‐4 AG01 Document oficial de certificare 133/14.11.2014

Pemberton 20 4AG2481‐4 AG01

Coville 20 4AG2491‐4 AG01

Simultan 20 4AG2471‐4 AG01 Document oficial de certificare 132/14.11.2014

Căpşun Premial 3000 4AG5581‐4 AG01 Buletin de analiză 31 /17/10/2014Real 1500 4AG5621‐4 AG01

Magic 1500 4AG5591‐4 AG01

Redgauntlet 800 4AG5601‐4 AG01

Benton 800 4AG5611‐4 AG01

Coacăz negru Poli 51 100 4AG8541‐4 AG01 Document oficial de certificare 138/14.11.2014

Tsema 20 4AG8551‐4 AG01

Abanos 20 4AG8561‐4 AG01

Coacăz roşu Jonkheer van Teets 60 4AG8531‐4 AG01 Document oficial de certificare 139/14.11.2014

Retestarea materialului Prebază şi Bază existent la SCDP Bistrița

Rezultatele analizelor serologice reconfirmă statusul fitosanitar “liber de virusuri” a materialului “Prebază” şi Bază conservat la SCDP Bistriţa

Biodepozitarul cu plante de prun certificate Prebază şi Bază de la SCDP Bistriţa

Rezultatele testărilor moleculare a materialului propus pentru certificare la categoria BAZĂ la specia prun - SCDP Bistrita 2014Denumire soi /pozitie planta

Nested PCR Status fitosanitarESFY

Agent P1‐P5 ‐ Liber de fitoplasmaAgent P6‐P10 ‐ Liber de fitoplasmaAgent P11‐P15 ‐ Liber de fitoplasmaAgent P16‐P20 ‐ Liber de fitoplasmaGras ameliorat P1‐P5 ‐ Liber de fitoplasmaGras ameliorat P6‐P10 ‐ Liber de fitoplasmaGras ameliorat P11‐P15 ‐ Liber de fitoplasmaCentenar P1‐P5 ‐ Liber de fitoplasmaCentenar P6‐P10 ‐ Liber de fitoplasmaCentenar P11‐P15 ‐ Liber de fitoplasmaCentenar P16‐P20 ‐ Liber de fitoplasmaMinerva P1‐P5 ‐ Liber de fitoplasmaMinerva P6‐P10 ‐ Liber de fitoplasmaMinerva P11‐P15 ‐ Liber de fitoplasmaAndreea P1‐P5 ‐ Liber de fitoplasmaAndreea P6‐P10 ‐ Liber de fitoplasmaAndreea P11‐P15 ‐ Liber de fitoplasmaDelia P1‐P5 ‐ Liber de fitoplasmaDelia P6‐P10 ‐ Liber de fitoplasmaESFY + +ESFY ‐ ‐

Material Bază certificat al specia prun (6 soiuri de prun: Agent - 20 plante, Gras ameliorat

- 15 plante, Centenar - 20 plante, Minerva - 15 plante, Andreea - 15 plante şi Delia - 10 plante) îndeplineşte condiţiile şi a fost certificat ca material Bază.

Materialul Bază obţinut este prevăzut a fi utilizat la înfiinţarea, în primăvara anului 2015, a unei plantaţii mamă, iar ramurile altoi rezultate vor fi utilizate pentru producerea pe scară largă a pomilor certificaţi, liberi de virusuri.

Material categoria PREBAZĂ şi BAZĂ la piersic, cais şi nectarin În această etapă au fost certificate la categoria PREBAZĂ 111 plante

aparținând speciilor: piersic și cais. Pentru specia piersic sunt 19 soiuri și un portaltoi (Cecilia, Melania, Florin, Filip, Southland, Redhaven, Springcrest, Raluca, Monica, Iustin, Minodora, Mimi, Catherine Sel.1, Valerica, Liana, Costin, Marina, Cora, Romamer 2. și portaltoiul Tomis 1) şi pentru specia cais 12 soiuri și un portaltoi (Amiral, Augustin, Auraș, Elmar, Goldrich, Mamaia, Neptun, Olimp, Ovidius, Sirena, Sulmona, Tudor și portaltoiul Constanța 14).

La categoria BAZĂ au intrat în procesul de certificare următorelor specii: piersic și nectarin, 10 soiuri și un portaltoi iar la cais 5 soiuri și un portaltoi. Soiurile ce vor constitui materialul Bază pentru speciile piersic și nectarin sunt : Springtime, Flavorcrest, Red Haven, Springcrest, Springtime, Snow Queen, Fantasia, Flavortop, May Gold, Stark, Red Gold, și portaltoi piersicGF 677. Soiurile ce vor constitui materialul Bază pentru specia cais sunt: Bergeron, Goldrich (Sungiant), Hargrand, Portici, San Castrese și portaltoiul Mirobolan 29 C.

31/ADER 2.2.7.- FAZA 6Diseminare rezultate

Ghid: Materialul de înmulţire pomicol-studiu de caz: căpşunul”. Ghidul a fost editat în 30 exemplare în format electronic (DVD) Ed. INVEL MULTIMEDIA, ISBN 9780973-1886-90-9 şi 10 exemplare tipărit. Echipa de lucru a proiectului a pregătit,

susţinut şi publicat 8 lucrări ştiinţifice şi de popularizare şi a participat la 4 manifestări ştiinţifice (3 simpozioane şi un seminar).

CONCLUZII Rezultatele obţinute, în urma aplicării la scară extinsă a metodelor de testare/retestare virală şi

înmulţirea prin diferite metode, validează calitatea materialului biologic conform cu standardeleOEPP.

La ICDP Piteşti Mărăcineni (CP), etapa 6 ,,Înmulţirea materialului biologic în vederea obţineriiplantelor bază” s-a încheiat cu obţinerea unui număr de 580 plante Bază, trecute prin procesulde certificare reprezentate de: portaltoi de măr (200 plante-M 106), păr/gutui (100 plante-GutuiA, BN 70), prun (125 plante-Mirobolan dwarf, Mirobolan C5, BN -4Kr), piersic (75 plante-Adaptabil, Miroper), cais (30 plante-Apricor), cireş/vişin (50 plante-IP-C2, IP-C3, IP-C4, IP-C5,IP-C7). Portaltoii Bază obţinuţi vor fi utilizaţi la producerea de pomi Bază din soiurile existente în

plantaţia mamă Prebază. Rezultatele retestărilor au relevat absenţa infecţiilor virotice la plantele Prebază conservate în

biodepozitarul de la SCDP Bistriţa. Rezultatele au confirmat statusul fitosanitar “virus free” al plantelor Bază conservate în

biodepozitarul de la SCDP Bistriţa (P1). P1 a reuşit certificarea la categoria Bază a 95 plante aparţinând altor şase soiuri de prun

(Agent, Gras ameliorat, Minerva, Centenar, Andreea şi Delia), folosind ca precursori plantelePREBAZĂ certificate în anul 2013.

Testele de diagnostic serologic, prin DAS-ELISA, la următoarele virusuri: PPV, PDV, PNRSV,ACLSV, ApMV şi MLRSV, şi molecular, prin Nested-PCR, la ‘Candidatus Phytoplasmaprunorum’, au confirmat statusul “virus free” în toate cazurile pentru materialul produs la SCDPBistriţa.

CONCLUZII În baza rezultatelor obţinute şi a inspecţiilor repetate efectuate de ITCSMS Cluj s-a considerat că

materialul biologic (6 soiuri de prun: Agent - 20 plante, Gras ameliorat - 15 plante, Centenar - 20 plante, Minerva - 15 plante, Andreea - 15 plante şi Delia - 10 plante) îndeplineşte condiţiile prevăzute în standardele naţionale şi internaţionale şi, prin urmare, a fost certificat ca material BAZĂ (document de certificare anexat).

Materialul Bază obţinut este prevăzut a fi utilizat la înfiinţarea, în primăvara anului 2015, a unei plantaţii mamă, iar ramurile altoi rezultate vor fi utilizate pentru producerea pe scară largă a pomilor certificaţi, liberi de virusuri.

SCDP Constanţa (P2) a atins în activitatea desfăşurată toate obiectivele conform planului de realizare a proiectului.

La 12 soiuri de cais şi un portaltoi (Constanţa 14) au fost testaţi 5 viruşi, toţi au prezentat a fi negativi. La 19 soiuri de piersic şi un portaltoi (Tomis 1) au fost testaţi 6 viruşi, toţi au prezentat a fi negativi. Acestea

sunt considerate soiuri valoroase din punct de vedere al productivităţi şi calităţii fructelor şi sunt certificaţi ca material Prebază.

Soiurile ce vor constitui materialul Bază pentru speciile piersic şi nectarin sunt: Springtime, Flavorcrest, Red Haven, Springcrest, Springcrest, Springtime, Snow Queen, Fantasia, Flavortop, May Gold, Stark, Red Gold, şi portaltoi piersic GF 677.

Soiurile ce vor constitui materialul Bază pentru specia cais sunt: Bergeron, Goldrich (Sungiant), Hargrand, Portici, San Castrese şi portaltoiul Mirobolan 29 C.

Soiurile ce vor constitui materialul Bază pentru specia migdal sunt: Supernova şi Tuono. Soiurile şi portaltoii de piersic, cais şi migdal certificaţi ca material BAZĂ vor asigura creşterea competitivităţii

şi credibilităţii materialului produs în pepiniera S.C.D.P. Constanţa atât pe plan intern cât şi internaţional. Retestarea a confirmat starea fitosanitară ”virus free” a materialului selectat în vederea certificării ca material

BAZĂ.