06/01/2015 1

Program major de testare:

longevitate

Cartografierea efectelor pe termen lung asupra

sănătății:

Testarea celor mai promitatoare terapii impotriva

imbatranirii si a bolilor asociate pe scară largă la

șoareci în vârstă.

Longevitate : revolutia

• Descoperire revoluționară în 1980: 8 moduri de a extinde durata de viata a acestora [1]

• În 1993, o mutație a dublat durata de viata, in mare vitalitate [2]

• În 2003 mii de teste efectuate; aproximativ 10% prelungesc durata de viață. [3]

• În 2008, o mutație înmulțeste durata de viata de aproape 10 ori

06/01/2015 2

O revoluție s-a întâmplat în

nematozi ( C. elegans )

Nematozii si soareci nu

imbatranesc in acelasi fel

• Nematozii au un număr fix de celule: prelungirea duratei de viata a celulei este cu siguranță cheia • Șoarecii sunt mamifere și regenerare a țesuturilor este cu siguranță cheie

• Revoluția se apropie de soareci, dar câteva teste sunt efectuate. • Tratamentele de extindere a vietii la soareci cunoscute până acum functioneaza si la oameni (aspirină, metformin, metoprolol, rapamicină) • Modele genetice de extindere a vietii la soareci au fost găsite în familii umane procesul de îmbătrânire (Larron-pitici, FOXO-3A,-Akt 1)

Să efectuam mai multe teste de longevitate in paralel la soareci, in moduri care pot fi transpuse la om .

Major Mouse Testing Program

Revoluția longevitatii a

ajuns la șoareci și este

promițătoare pentru oameni

PAST

NOW

Prezentare generală,program de testare

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 3

Locuri de muncă

Am comunicat cu un număr de cercetători și am identificat un grup de laboratoare

cu condiții cheie pentru animale și

experiență în teste durata de viata si

medicina regenerativa.

Aplicarea în studiile de

longevitate umana

Dacă vom începe programul nostru de testare în acest an

ne așteptăm să vedem impactul concret în mai puțin

de 10 ani.

Cronologie

Un set de teste de durata de viata va începe cu animale pre-imbatranite și

durează timp de 18 luni

Un alt set de teste are nevoie de creerea unei linii de soareci și va dura 38 luni

Rezultatele vor fi triplu verificate și reglate în moduri care pot fi transpuse la om. Cea mai importantă parte a rezultatelor va veni

în 5 ani după începerea testelor.

Buget

Costul estimat pentru 1000 teste diferite este de € 20 de

milioane.

Există, de asemenea, o corelație directă între

finanțare, numărul de teste și program.

Rezultatele așteptate

Pe baza experienței anterioare ne așteptăm la 100 rezultate pozitive din 1000 teste:

În nematozi, 10% din teste au fost pozitive (multe teste au fost efectuate)

La șoareci, ~ 10% (greu de estimat, s-au facut cateva teste; ITP + Spindler)

Beneficii:

1. Rezultatele trebuie să ofere o imagine de ansamblu cu privire la ceea ce prelungește viața.

2. Sperăm să obținem extensii de viață majore.

3. Sperăm că unele se aplică la oameni.

Ce să testam : intervenții sursă

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 4

Primary sources

Observare Baza de date Durată de viață : 3359 extensii de viață raportate la rozătoare (114), nematode (2400), alte

Rezultatele la rozătoare sunt adesea neclare, dar promițătoare; confirmări suplimentare trebuie să se facă la soareci.

http://lifespandb.sageweb.org

Longevitatea BD: peste 1000 de intervenții

Baza de date enumeră gene umane, care sunt corelate statistic cu longevitatea; pentru multei o cauzalitate ar putea fi testata pe șoareci.

http://longevitydb.org/browse

Secondary sources

Diverse alte surse

Diferite baze de date similare au fost găsite. Sunt analizate numeroase forumuri relevante și liste de discuții. A început să circule o hârtie de cercetare a imbatranirii pentru a lista idei.

Grup Facebook: peste 300 de postari în prezent

Fiecare mesaj este o interventie potențiala de extinderea vietii pentru a fi testate la soareci.

https://www.facebook.com/groups/gerontodrugs

Numărul total al intervențiilor este imens. Analiza este în curs de a stabili prioritățile.

Ce să testam:tip de interventii

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 5

Pentru variantele gasite in populatiile umane care sunt deja considerate ca favoriza o viață lungă si sănătoasă la oameni și care pot fi transpuse într-o terapie genica la soareci in varsta. Concept: dacă șoarecii traiesc mai mult și sănătos, se pare că într-adevăr varianta imbunatateste sanatatea la oameni și că o astfel de terapie genica ar fi eficientă la om de asemenea.

Variante genetice umane

De obicei in vivo și in vitro rezultatele de la șoareci, șobolani, nematozi sau muste de fructe au nevoie de confirmari robuste de durata de viata si sanatate .

Rezultatele cercetării fundamentale

Pentru tratamentele luate de populațiile umane, care sunt deja considerate ca favoriza o viață lungă si sănătoasă la om. Concept: dacă șoarecii traiesc mai mult și sănătos, se pare că într-adevăr, medicamentele imbunatatesc sanatatea la oameni.

Tratamente medicamentoase umane

terapii genetice la șoarece

diverse terapii la soareci

Baze de date Interventii

Program ansamblu

06/01/2015 6

Faza II 2 luni

Faza III 14 luni

Major Mouse Testing Program

1.5 m€ = 130 terapii ≈9 rezultate pozitive

11 m€ = 1300 terapii ≈90 rezultate pozitive

Faza IV 18 luni

Preparare

Echipamente

Testare 130

pana la 300

terapii

Confirmarea si

optimizarea

rezultatelor

Protocol

initiere la

oameni

Faza V 18 luni

38 luni

Faza I 1 an

Constituirea

echipelor, strângere

de fonduri

Numărul _ intervențiilor de testare depinde de finanțare

TESTELE ÎNCEP CU ȘOARECI DEJA IN VARSTA

2 luni 18 luni

Preparare

echipamente Testare 130

pana la 300

terapii

Confirmare si

optimizarea

rezultatelor

18 luni

TESTS STARTING WITH SETTING A MOUSE LINE

Protocol

initiere la

oameni

TODO: update budget

Faza III schema

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 7

6 luni

Nastere 18 luni :

Inceputul

tratamentului

32 luni:

Deci, a extins durata de viata,

comparativ cu grupul mare de

control care a trăit în paralel?

Decizii pentru pasul urmator

14 luni

30 masculi

30 femele

Pentru cele mai bune rezultate pozitive ale

fazei III, fazei IV: validarea și reglarea la șoareci și șobolani în alte laboratoare +

studiu _ diverse efecte asupra

sănătății

Faza III a: pornind de la soareci tineri

Pentru majoritatea terapiilor,genetice si altele.

Faza III b:test real

Toate: medicamente,

gene, altele

18 luni

prep

arare

?

Organizare generala

8

Donatori

Echipa

Longevity Santé

Producatori soareci Facilități

Fonduri

Soareci

Rezultate

Major Mouse Testing Program 06/01/2015

Lista de sarcini actuala

06/01/2015 Major Mouse Testing Program

9

Identificarea și sortarea potențialelor intervenții Identificarea

surselor de finantare

Localizare laboratoare potrivite pentru muncă și

discutare termeni și condiții

Se calculează costurile de experimente (echipament &

personal)

Contactați potențialii investitori. Acorduri generale

Primirea sumei necesare pentru începerea proiectului

Rafinarea metodologie de

testare cu laboratoarele

Fonduri Negocieri detaliate

Astazi

Viitor

Work in progress…

Work in progress…

Work in progress…

Echipe si laboratoare

Laboratoare echipate cu cele mai bune facilitati pentru animale (cuști cu filtre individuale și ventilație) și de specialitate in medicina regenerativa si in cercetarea împotriva proceselor de îmbătrânire

•Arlan Richardson

– 40 ani de experiență în teste pe rozătoare pe termen

lung(compuși și terapii genetice)

–Laborator USA (Oklahoma)

•Alexandra Stolzing

– Medicina regenerativa si imbatranirea celulelor stem

– Centrul translational pentru medicina regenerativa

Leipzig University (Leipzig)

•Jean-Marc Lemaitre

– Medicina regenerativă pe celule de șoarece și umane

– (terapie genică si celule stem)

–Inserm in France (Montpellier)

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 10

Echipa de voluntari

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 11

Principalele persoane active :

Edouard Debonneuil, Rached Messaoudi, Valentin Socolov, Martin Dinov, Daniel

Krochmal, Maciej Michalak, Nicoleta Reinald

Temporar ajutati de: (Steve Coles), Johnny Adams, Daria Khaltourina, Matthew Scholtz, Didier Coeurnelle, Anton Kulaga, Paul Spiegel, Liz

Parrish, Alexandru Chircu, Alexandre Blanc, Dmitri Borisogliebsky… și multi alti cercetători și voluntari

on-line.

Mulțumiri speciale pentru echipele de voluntari:

▲Longévité & Santé,săptămânal pentru a

organiza proiectul : La Paillasse, Paris.

◄helpers from various countries and for various occasions

Va multumim pentru atentia acordata !

•Doriți să ajutati,

– Contact mouseproject.info@longevityalliance.org propuneri ajutor specific

–Donatii at xxx

•At American Longevity Alliance if you are in the USA

•Ajutor specific : – Dacă sunteți specialist in testarea duratei de viata si sanatate la soareci , tehnica

terapie genică, sau încorporare medicamente, etc., va rugam sa nu ezitati sa ne dati feedback-ul și numele dumneavoastra

– Dacă știți unele surse potențiale de finanțare care credeți că ar putea corespundesau sunt interesați de petrecerea timpului în scris subvenții (ca și noi pe o bază fără scop lucrativ), vă rugăm să nu ezitați să ne sugerati

– Dacă sunteți interesat în prezentarea proiectului la o conferință sau în traducerea diapozitivelor într-o altă limbă vă rugăm să ne contactați.

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 12

Apendice

•Listă de terapii pentru a fi testate la soareci

•Tehnici de terapie cu o genă

•Alte

06/01/2015 Edouard Debonneuil -- Mouse Lifespan

Fast Track project 13

Finantare & Buget

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 14

Privire de ansamblu intervenții detaliate

•Details on interventions – a number of slides

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 15

Astazi sunt mai putin de 10 teste reale pe an. Obiectivul nostru: 1000 teste in mai putin de 5 ani

•În nematozi_ 10% din mii de teste au fost pozitive

•La soareci_ de asemenea, aproximativ 10% [5/67 de Spindler.S _ 5/15 teste de ITP_ 1-2 în comun]:

•Other results being checked in rodents (fullerenes)

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 16

Everolimus:in curs de testare pe vârstnici

(consolidarea vaccinului împotriva gripei)

Metformina: scăderea mortalității confirmat la

om

•Intervențiile programului de testare_ Statele Unite ale Americii: - NDGA (masculi_ + 10% duratei de viata si sanatate) •- Rapamicină (bărbați_ femei și_ + 10-25%) - acarboza (masculi_ + 22%) •- Aspirina (masculi_ + 10%) - α-Estradiol (masculi_ + 10%)

Aspirina: mortalitate mai scăzută confirmat la om (80 mg / zi_ ≥5 ani)

Rezultate asteptate

06/01/2015 Major Mouse Testing Program

17

Descoperirile la soareci au un potențial enorm _ duc la progrese in domeniul sanatatii pe termen lung la om

Declanșarea unei schimbari de mentalitate la toate nivelurile societății Biologie aplicată de longevitate este viitorul", având în vedere numeroasele terapii care previn inverseaza

/opresc procesele de îmbătrânire Putem obține extensii de viață de câteva ori la șoareci?

1

Un nou domeniu pe termen lung pentru sanatate, industria farmaceutică

Descoperirea unor noi aplicații ale medicamentelor existente privind îmbătrânirea umana _ sănătatea pe termen lung

2

O ruptură in știința pentru prelungirea duratei de viață

Ghid de cercetare longevitate prin ceea ce extinde durata de viata si sanatate intr-adevar. Evidențierea mecanismelor care stau la baza.

În legătură cu statisticile la om_ speram ca unele rezultate sa poata fi aplicate, probabil, în mai putin de

cinci ani.

3

Referinte

06/01/2015 Major Mouse Testing Program

18

[1] Klass MR (1983). "A method for the

isolation of longevity mutants in the

nematode Caenorhabditis elegans and

initial results". MECHANISMS OF

AGEING AND DEVELOPMENT 22 (3-

4): 279–286. PMID 6632998

[2] Kenyon C, Chang J, Gensch E,

Rudner A, Tabtiang R (1993). "A

C. elegans mutant that lives twice

as long as wild type". Nature

(journal) 366 (6454): 461–

464. PMID 8247153

[4] Ayyadevara S, Alla R, Thaden

JJ, Shmookler Reis RJ (2008).

"Remarkable longevity and stress

resistance of nematode PI3K-null

mutants". AGING CELL 7 (1): 13–

22. PMID 17996009

C elegans revoluție longevitate

Soarece viitoarea revoluție in longevitate

Martin-Montalvo A, Mercken EM, Mitchell SJ,

Palacios HH, Mote PL, Scheibye-Knudsen M,

Gomes AP, Ward TM, Minor RK, Blouin MJ,

Schwab M, Pollak M, Zhang Y, Yu Y, Becker

KG, Bohr VA, Ingram DK, Sinclair DA, Wolf

NS, Spindler SR, Bernier M, de Cabo R (2013).

Metformin improves healthspan and lifespan in

mice. NAT COMMUN. 4:2192. PMID 23900241

Spindler SR, Mote PL, Li R,

Dhahbi JM, Yamakawa A, Flegal

JM, Jeske DR, Li R, Lublin AL

(2013). β1-Adrenergic receptor

blockade extends the life span of

Drosophila and long-lived mice.

AGE. PMID 23314750

Harrison, D. E., Strong, R., Sharp, Z. D.,

Nelson, J. F., Astle, C. M., Flurkey, K.,

Nadon, N. L., Wilkinson, J. E., Frenkel, K.,

Carter, C. S., Pahor, M., Javors, M. A.,

Fernandez, E. and Miller, R. A. (2009)

Rapamycin fed late in life extends lifespan

in genetically heterogeneous mice.

NATURE 460:392-395. PMID 19587680

Bartke A, Brown-

Borg H (2004). Life

extension in the dwarf

mouse. CURR TOP

DEV BIOL. 63:189-

225. PMID 15536017

[3] Lee SS, Lee RY, Fraser

AG, Kamath RS, Ahringer

J, Ruvkun G (2003). A

systematic RNAi screen

identifies a critical role for

mitochondria in C. elegans

longevity. NAT GENET.

PMID 12447374

06/01/2015

Edouard Debonneuil --

Mouse Lifespan Fast Track

project

Un exemplu: transpunerea rs9330200 la soareci

rs9330200 este o variantă a unei gene la om care codifică proteina tubulinei beta4b. Varianta corespunde cu un "T la un loc. Acesta a fost găsit în Framingham Heart Study_ la cetățeni americani_ ca cei cu doua copii ale genei T au riscuri cardiovasculare mai mici_ riscurile de cancer si mai mici și riscuri de deces prematur mai mici decat la altii _ intr-un mod foarte foarte foarte ... foarte semnificativ statistic (p_value = 6E-53)

referință: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3592948/

Șoarecii de laborator au aceeași genă! (ortolog), indicând că aceasta are aceeași funcție la soareci. Firește că au o C_ nu un "T. De aceea_ dorim să oferim același varianta: intr-un mod foarte concret_ parte a genei la soareci de laborator este "GCCGCATGTCTATGAAGGAGGTGGACGAACAGATGCTTAATGTCCAAAACA"_ scopul este să-l înlocuiască în GCCGCATGTCTATGAAGGAGGTGGATGAACAGATGCTTAATGTCCAAAACA folosind tehnologii CRISPR în cazul în care ii face sa traiasca mai mult ... (imbunatateste sanatatea lor. _ etc), atunci este confirmare probabil că funcționează la oameni ...

Scopul este de a testa rs933020200, precum și multi alti candidați (avem mai mult de 1400!). Ce va veni originar din statisticile la om _ este confirmată in testarea durata de viata si sanatate soareci ar trebui să aibă șanse bune sa functioneze la _ om destul de probabil_ în cazul în care proiectul nu este oprit particular,

_ In 5 ani de acum unele persoane (intai probabil pacienții și batranii ) vor începe să faca terapie genică _ vor fi monitorizate pentru a verifica dacă este bine pentru sanatatea lor_

_ potențial în 10 ani va deveni frecvent să facem aceste terapii genetice _ pentru a trai mai mult sănătos

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 20

Terapia genică la bătrânețe: Privire de ansamblu

•La Șoareci in varsta bază non-transgenica (18 lună) •Schimbarea ADN-ul lor •Prin injectarea unui virus adeno-asociat (AAV) conținând gena_ la vârsta de 18 luni •Eficacitate scăzută (trebuie să găsească drumul în celulele _ în nucleul). •Transpunerea scăzut la om (aceasta este "virus" și schimba "definitiv") •Exprimând Temporar un mesaj genetic •Prin injecție bilunar de lyposomes care conțin minicercuri_ incepand de la varsta de 18 luni •Totusi eficacitate scăzută (trebuie să găsească drumul în celulele) •Transpunerea ridicat la om (lyposomes_ schimbarea temporară) •terapii la gena care ar trebui să vizeze țesuturi specifice (celule sanguine_ ficat ...) •Posibilități de a fi mult mai eficient

•Bazat pe o linie șoarece transgenic 06/01/2015 Major Mouse Testing Program 21

Schimbare ADN la varsta de 18 luni

•Prin doar o singură injecție de asociate adeno-Virus ('AAV')

•Aceste virusuri încorporeaza o parte a ADN-ului în ADN-ul recepient pe care il infecta.

•Unele dintre acestea au fost selectate pentru a fi utilizate științific în ultimele decenii să se aplice la diferite organe: AAV1_ AAV2..AAV9

•Eficiența este scăzută (acestea trebuie să intre în celulă _ nucleul)

•În timp ce vorbim despre viruși și modificări genetice definitive_ traducerea la oamenii nu pare să se dezvolte usor _ perspectivă pe termen scurt

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 22

TODO: update in English based on wikipedia/other

Exprimare temporala a unui mesaj genetic

•Minicercuri purtate de vectori liposomali

–Dfdf

•dfdfd

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 23

TODO: update in English based on wikipedia/other

Linie de soareci sensibila la medicamente

06/01/2015 Major Mouse Testing Program 24

TODO: update in English based on

http://www.clontech.com/US/Products/Inducible_Systems/Protein