Prezentare Elisa Pcr654

7/21/2019 Prezentare Elisa Pcr654

1/17

Tehnica ELISA

Enzyme

Linked

Immuno

Sorbent

Assay

Biochimie Medicina dentara


2/17

Ce este ELISA?

Tipuri

Aplicatii

Principiu

ELISA



3/17

ELISA


Ce este?Evaluarea prezentei si concentratiei anticorpilor siantigenilor dintro proba

Primele studii au !ost !acute in "#$" !olosita pentruscreeningul %I&

' tehnica biochimica !olosita in special in imunologie

Primul si cel mai comun test !olosit pentru detectareaunui patogen dintro proba

Avanta(e sensitiva )*+*""*ng,ml- cantitativa reproductibila !ormat de kit


4/17

ELISA


Tipuri ELISA Calitativa rezultatele sunt pozitive sau negative

ELISA Cantitativa densitatea optica a probei este comparata

cu un standard

ELISA indirecta competitiva sand.ich )directa-


5/17

ELISA


Aplicatii Evaluarea cantitativa,calitativa a anticorpilor si antigenilordintro proba

/edicina0 metoda de diagnostic %I&1 holera1 bolivenerice1 gripa aviara sau porcina1 hormoni )sarcina-

Industria alimentara0 detectarea alergenilor din mancarelapte1 alune1 oua

To2icologie0 detectarea drogurilor

Cercetare


6/17

ELISA


Principiu Ce este un antigen?Ce este un anticorp?

Anticorp

Antigen

Epitop

Enzymelinked immunosorbent assay0 numele sugereaza

3 componente Anticorp permite detectia analitului de interes 4aza solida suportul unde are loc adsorbtia Enzima determina schimbarea de culoaresemn


7/17

ELISA


Primul anticorp

Antigenul

Al doilea anticorpcon(ugat cu enzima

ELISAsand.ichdirect

Principiu

5

"

3


8/17

ELISA


Principiu

substrat

produs

standard

proba


9/17

Tehnica PC6

Polymerase Chain 6eaction



10/17

PC6

Ce este PC6?

Tipuri

Aplicatii

Principiu



11/17

PC6

Ce este?


Polymerase Chain 6eaction )6eactia in lant apolimerazei-

/ullis 7 4aloona 8 Specific synthesis of DNA invitro via a polymerase-catalyzed chain reaction1"#9$

/ullis0 Premiul :obel1 Chimie1 "##3

Ampli!icarea cu a(utorul unei enzime )A;:polimeraza- a numary /ullis


12/17

PC6

Tipuri


E2ista multe variatii ale acestei tehnici0 long PC61 late PC6 in situ PC61 colony PC61 single cell PC6

Cele mai !olosite0

standard PC6 6TPC6 ) realtime-


13/17

PC6

Aplicatii


Testarea unor mutatii )e2+0 !ibroza chistica1 gene tumorale-

Testare prenatala )si screening preimplantare-

In!ectii virale )%I&-1 bacteriene )>-

Teste de histocompatibilitate

/edicina legala

Teste de paternitate

Identi!icarea de persoane

Cladistica

clade


14/17

PC6

Principiu


/ateriale

A;: de ampli!icat0 Sange1 Sperma1 Par1 Periuta dedinti1 Insecte )in chilhlimbar-1 /umii1 Amprente1 @rina

Primeri )oligonucleotide1 amplimeri- 0 5*3* dedezo2iribonucleotide complementare e2tremitatilor

B sau 3B ale !ragmentului de ampli!icat

A;:polimeraza 0 enzima care catalizeazapolimerizarea dT:P in catene A;: )elongareaprimerilor-

d:TP )dezo2iribonucleotid tri!os!ati-

Solutie tampon

Colectare probe A;:


15/17

PC6

Principiu


Etapele PC6

;enaturarea A;:ului dublu catenar

Cuplarea primerilor de A;:ul simplucatenar

E2tensia primerilor


16/17

PC6

Principiu


;enaturarea A;:

##9 DC1 5*3* de secundeA;:ul este des!asurat in doua

lanturi A;: simplucatenare

complementare

Cuplarea primerilor

* DC1 5** de secunde

Lant dublucatenar hibrid 8primeri si A;: de ampli!icat

E2tensia primerilor

A;:polimeraza0 Se leaga delantul hibrid FCitesteGsecven=a lantului A;:tintaHAlungeste primerii prinadaugarea de d:TP1 pe bazaregulii complementaritatii


17/17

PC6

Principiu


Ampli!icarea

/0 dimensiuni cunoscute

"0 J"9* bp50 J9** bp30 nu sa ampli!icat0 J9** bp0 benzi multiple

&izualizare produsi de ampli!icare

Prezentare Elisa Pcr654

Documents

Transcript of Prezentare Elisa Pcr654