Pezentare Compact Dry
-
Upload
emona-anemona -
Category
Documents
-
view
22 -
download
2
description
Transcript of Pezentare Compact Dry
CeCe esteeste Compact Dry?Compact Dry?Este un mediu uscat,gata preparat,simplu de utilizat la analize de rutina.
1. Mediu uscat gata de utilizare.2. Disponibil pentru depistarea principalilor germeni patogeni,transmisibili prin alimente.3. Placi mici,compacte,portabile. 4. Termen de valabilitate indelungat,la temperatura camerei.5. Corelare buna a rezultatelor cu metode conventionale.
PrincipiulPrincipiul Compact DryCompact Dry
Picurati pe suprafata placii 1 ml. specimen siIncubati dupa specificatii.
Precautie 1:La utilizarea Compact Dry nu se va depasi limita superioara de incarcare a placii, 300 cfu/ml/placa
In cazul in care se estimeaza concentratii mai mari de 300 cfu/ml se vor face dilutii succesive ale mostrei de testat.
Precautie 2:La utilizarea Compact Dry SA intai se inoculeaza specimenul ,dupa care suspensia de galbenus de ou.
Precautie 3:La utilizarea Compact Dry SL ,volumul specimenului si procedurile sunt diferite fata de celelalte.
Picurati specimen diluat
Difuzeaza automat
Difuzie automata a specimenului.
Membrane filtrante•
Compact Dry poate
fi
utilizat
pentru
analizarea
mostrelor
lichide
cu volum
de 100 mililitri
si
mai
mult. Filtrati
100 mililitri
apa, sau
orice
alt
lichid
utilizand
o membrana
filtranta
normala
( 47 mm, 45µm. ), pipetati
un mililitru
apa
sterila
pe
suprafata
Compact Dry, dupa
care
asezati
membrana
pe
placa. Coloniile
formate
vor
creste
pe
membrana
filtranta.•
Metoda
membranelor
filtrante
‐
procedura
pentru
Compact Dry•
Selectati
tipul
de placa
Compact Dry,
corespunzator
cu organismul
tinta, indepartati
capacul
si
pipetati
1 mililitru
apa
sterila
in
centrul
acesteia.•
Utilizind
penseta
sterila, extrageti
o membrana
sterila.
•
Filtrati
mostra
la presiune
scazuta.•
Dupa
prima filtrare, spalati
interiorul
pilniei
de
filtrare
cu 25‐30 mililitri
apa
sterila
si
refiltrati.
Repetati
acelasi
pas de doua
sau
trei
ori.•
Dupa
filtrare, preluati
membrana
de pe
dispozitivul
de filtrare
si
asezati
pe
Compact
Dry fara
a forma goluri
de aer. Suprafata
de
captura
a membranei
in sus.•
Puneti
capacul
pe
placa, intoarceti
placa
si
incubati
in acord
cu specificatiile.
PrincipiulPrincipiul difuzieidifuziei automateautomate
- Specimenul lichid difuzeaza automat in masa placii.- Specimenul lichid constituie mediul.- Mediul uscat se transforma in gel.
Mediu+gelifiant Strat uscat
Baza placiiInoculare mostra
Mediu intregit
(Netesut)
Forma Forma - 5 cm. diametru,plastic,suprafata 20 cm patrati.- 4 placi ambalate in folie de aluminiu,detasabile individual.- Sterilizate cu raze gama.
Gama Compact DryGama Compact Dry
Drojdii si mucegaiuri
YM
Coliforme
CF+ c.fec ali
Numar total germeni
TC
E. coli & coliforme
EC
Staphylococcus aureus
SA ETCETB
Enterobacterii
SL
Salmonella Enterococi
MediuMediu de de bazabaza Compact DryCompact DryDeterminare Tip Mediu de baza Interpretare
Numar total germeni TCMetoda standard agar
Toate coloniile
E. coli & coliforme EC Mediu selectiv,bacili gram negativ,substrat enzimatic cromogenic
E. coli : AlbastruColiform: rosu/roz
Coliforme CF Mediu selectiv,bacili gram negativ,substrat enzimatic cromogenic.
Albastru/Albastru-verde
Drojdii si mucegaiuri YM Agar cu cartof si dextroza,substrat enzimatic cromogen.
Drojdii: Albastru + forma colonii.Mucegaiuri: colonii pufoase.
Staphylococcus aureus
SAMannitol Salt agar Galben deschis + reactia
coagulazo pozitiva.
Enterococcus faecalis ETC X-Gal agar substrat enzimatic cromogenic Albastru/Albastru-verde
Enterobacterii ETB Rosu purpuriu
Salmonella SL MLCB agar, substrat enzimatic cromogenic.
Culoare colonii verde+negruMediu galben.
Mobilitate Salmonella
- Analiza microbiologica a alimentelor:Testare microbiologica produs finit / materii prime /ingrediente.・Indicator de contaminare: Numar total germeni / E. coli
/coliforme/drojdii si mucegaiuri.・Toxine alimentare : E. coli / Coliforme / S. aureus /
Salmonella / V. parahaemolyticusTestare mediu,suprafete:Prin metoda stergerii(swab).・Aeroflora: Numar total germeni / E. coli
/Coliforme/Drojdii si mucegaiuri.- Analiza apei: E.coli si coliformi fecali, Enterobacterii, Enterococi, Numar total de germeni si altele
DestinatieDestinatie Compact DryCompact Dry
Metoda turnarii Compact Dry
① Preparare mediu(cantarire – sterilizare)
↓
② Pregatirea placii Petri ① Pregatire Compact Dry↓ ↓
③ Pregatirea specimenului ② Pregatirea specimenului(cantarire-omogenizare) (cantarire-omogenizare)
↓ ↓
④ Dilutii in serie. ③ Dilutii in serie↓ ↓
⑤ Inoculare specimen diluat. ④ Inoculare specimen diluat↓
⑥ Distribuirea mediului.↓
⑦ Procedura de turnare(+multistrat)↓
⑧ Incubare ⑤ Incubare↓ ↓
⑨ Numarare colonii ⑥ Numarare colonii(In total,9 pasi) (In total,6 pasi)
Aproximativ 2 ore.
Pentru 100 placi:
Aproximativ o ora.
Diferenta de timp
Utilizare,comparativUtilizare,comparativ..
Pentru numar total germeni(TC = numar total)
Bacteriile formeaza colonii colorate in rosu.
〔Caracteristici〕
Are la baza compozitia mediului de la metoda standard de numarare.Contine indicatori de reducere a TTC. Aproape toate coloniile crescute sunt
colorate in rosu.
〔Incubare〕
35±2 Celsius℃, 48 ore
〔Interpretare〕
Numarati toate coloniile crescute pe placa.
Compact Dry Compact Dry TCTC
Pentru coliforme(CF = Coliforme)
Coliformele formeaza colonii de culoare albastra ,pe placa.
Compact Dry CFCompact Dry CF
〔Caracteristici〕
Coliformele dezvolta colonii de culoare albastru/albastru-verde ,datorita substratului enzimatic cromogenic X- GAL. Dezvoltarea altor bacterii este inhibata.
〔Incubare〕
35±2℃ Celsius, 20 - 24 ore
〔Interpretare〕
Numarati toate coloniile de culoare albastru/albastru-verde.
E. coli formeaza colonii de culoare albastra.Coliformele formeaza colonii de culoare rosie.
Compact Dry ECCompact Dry ECPentru E. coli si Coliforme
〔Caracteristici〕Mediul contine doua feluri de substrat enzimatic cromogenic, magenta-GAL si X- GLUC.In consecinta, pe placa se vor observa colonii cu doua culori diferite. Rosu-roz pentru coliforme si albastru/albastru-purpuriu,pentru E coli.
〔Incubare〕
35±2℃Celsius 20 - 24 ore
〔Interpretare〕
Numarati toate coloniile de culoare rosu/roz ca si Coliforme si toate coloniile de culoare albastru/albastru-purpuriu ca si E coli.
Pentru Staphylococcus aureus
(SA = Staphylococcus aureus)
Diferentiere simpla a coloniilor de S.Aureus,datorita reactiei coagulazo- pozitive.
Staphylococcus aureus
Bacterii contaminate
Compact Dry Compact Dry SASA
〔Caracteristici〕Mediu selectiv pentru S. aureus si diferentiere prin reactia coagulaza- pozitiva(colonii de culoare galben deschis cu aura alba cetoasa).
〔Incubare〕
35±2℃Celsius, 48 ore
〔Interpretare〕
Numarati toate coloniile de culoare galben deschis cu aura cetoasa alba.〔Precautie〕
Picurati pe placa un mililitru de specimen si suspensie de galbenus de ou in 7-8 puncte,distribuite uniform pe suprafata placii.
Utilizare,CompactUtilizare,Compact Dry SADry SA
35±2℃Celsius, 48 oreUnele tulpini nu reactioneaza imediat cu suspensia de galbenus,fiind necesara incubarea timp de 48 ore.
S. S. aureusaureus genereaza pigment galben pentru a forma colonii de culoare galben-deschis,si descompune complexul lipide-proteine al galbenusului de ou prin enzima sa,schimband mediul din jurul coloniilor in alb tulbure.
1. Inoculare mostra.
Picurati in mijlocul placii, un mililitru de mostra.
2. Difuzie automata a mostrei.
Scuteste proceduri suplimentare.
3. Galbenus de ou
Picurati in 7-8 puncte distribuite uniform pe suprafata placii,suspensie de galbenus de ou,pentru reactia coagulazo- pozitiva.
4. Incubare
5. Detectie si interpretare.
Compact Dry X-SA cu galbenus de ou
• Nou!• Coloniile sunt de culoare albastra• Incubare 24ore la 35C.
Pentru Vibrio parahaemolyticus
(VP = Vibrio parahaemolyticus)
V. parahaemolyticus dezvolta colonii de culoare albastru/albastru-verde.
Compact Dry Compact Dry VVPP
〔Caracteristici〕Mediul contine substrat enzimatic cromogenic, V. parahaemolyticus formand colonii de culoare albastru/albastru-verde.Alte tulpini de Vibrio formeaza colonii de culoare rosie.
〔Incubare〕
35±2℃Celsius, 18 - 24 ore
〔Interpretare〕
Toate coloniile de culoare albastru/albastru-verde,numarate pe placa,sunt V. parahaemolyticus.
Pentru drojdii si mucegaiuri.
(YM = Yeast,Mold)
Compact Dry YMCompact Dry YM
〔Caracteristici〕Mediul contine substrat enzimatic cromogenic,X-Phos,care permite dezvoltarea coloniilor de culoare albastra pentru majoritatea genurilor de drojdii,si antibiotic care inhiba dezvoltarea bacteriilor de contaminare.Mucegaiurile formeaza colonii cu consistenta vatei si culoare specifica.
〔Incubare〕
20 - 25℃ Celsius, 3 – 7zile
〔Interpretare〕Numarati toate coloniile de culoare albastra si pe cele de culoare alb laptos,cu forma bine definita,ca si drojdii.Numarati toate coloniile pufoase ca si mucegaiuri.
Cresterea drojdiilor si mucegaiurilor este selectiva pe Compact Dry YM.
Pentru detectare Salmonella
(SL = Salmonella spp.)
Detectare calitativa Salmonella pe baza caracterelor specifice, reactivitate biochimica si mobilitate.
Compact Dry Compact Dry SLSL
〔Caracteristici〕Detectarea prezentei Salmonella in mostra este rezultanta a trei principii de testare. Alcalinizarea mediului (culoarea mediului devine galbena),formare de colonii verzi (si negre), mobilitate Salmonella.
〔Incubare〕
42 ±1℃Celsius, 20 – 24ore
〔Interpretare〕Numarati toate coloniile verzi si negre.Pentru confirmare verificati modificarea culorii mediului si mobilitatea Salmonella.
UtilizareUtilizare, Compact Dry , Compact Dry SLSL
Punga sterila omogenizare
1) Inoculare2) Incubare3) Interpretare
1. Preparare mostra 2. Preimbogatire
35 - 37℃, 20 – 24 oreMostra 25g
+Apa peptonata
225mL
3. Inoculare mostra 4. Incubare pe CD SL 5. Interpretare
41 - 43℃Celsius, 20 - 24 ore
Operatii cheie pentru CD SL
3-1.Picurati 0.1 ml. mostra lichida preimbogatita.
3-2.Picurati 1ml apa sterilizata.
1.Productia de hidrogen sulfurat.Coloniile de culoare neagra si virarea culorii mediului din albastru-purpuriu in galben se datoreaza productiei de hidrogen sulfurat.2. Descompunerea stratului cromogenic. O enzima specifica Salmonella,descompune stratul cromogenic,dand nastere la colonii de culoare verde-verzui.
3. Mobilitatea Salmonella.Se poate confirma prin observarea deplasarii punctului initial de inoculare a mostrei.
Mostra carne cu Salmonella
Salmonella Pozitiv.
Nu se observa schimbarea culorii mediulu.In jurul punctului de inoculare nu se observa coloratie rosie sau rosu- purpuriu.
Salmonella Negativ
InterpretareInterpretare, Compact Dry , Compact Dry SLSL
Mostra carne fara Salmonella
Conventional CD SL
Day 1 Mostra 25g Mostra 25g Preimbogatire Preimbogatire(BPW/EEM) (BPW/EEM)
↓ ↓
Day 2 Mediu de cultura selectiv CD SL(TT/RV/SBG/SC)
↓ ↓Day 3 Izolare Detectat, prezenta Salmonella
(MLCB/DHL/XLD/Rambach)↓
Day 4 Detectat, prezenta Salmonella (din colonii izolate pe MLCB) Cofirmare/Identificare
(Biochimic/Teste serologice)↓
Day 5 Raport,confirmare rezultate test.
TimpiTimpi de de lucrulucru comparativicomparativiCompact Dry Compact Dry SLSL sisi metodametoda conventionalaconventionala
O zi economisita pentru detectarea Salmonella in mostra de produs.
Pentru enterobacterii
Compact Dry ETBCompact Dry ETB
〔Incubare〕
35-37℃ Celsius, 24 ore si pina la 48 ore in cazul in care coloniile nu sunt vizibile dupa 24 ore.
〔Interpretare〕Numarati toate coloniile de culoare rosu - purpuriu.
Cresterea enterobacteriilor este selectiva pe Compact Dry ETB.
PentruEnterococi fecali
Compact Dry ETCCompact Dry ETC
〔Caracteristici〕
Coliformele dezvolta colonii de culoare albastru/albastru-verde ,datorita substratului enzimatic cromogenic X- GAL. Dezvoltarea altor bacterii este inhibata.
〔Incubare〕
35±2℃ Celsius, 20-24 ore〔Interpretare〕
Numarati toate coloniile de culoare albastru/albastru-verde.
ETC
Pentru numar total germeni din produsele pe baza de ceaiuri(TC = numar total)
Bacteriile formeaza colonii colorate in rosu.
〔Caracteristici〕
Are la baza compozitia mediului de la metoda standard de numarare.Contine inhibitori flavanoizi. Aproape toate coloniile crescute sunt
colorate in rosu.
〔Incubare〕
35±2 Celsius℃, 48 ore
〔Interpretare〕
Numarati toate coloniile crescute pe placa.
Compact Dry Compact Dry TCCTCC
Pentru bacterii heterotrofice din apa
Compact Dry R2ACompact Dry R2A
〔Caracteristici〕
Bacteriile heterotrofice dezvolta colonii de culoare albastru/albastru-verde . Dezvoltarea altor bacterii este inhibata.
〔Incubare〕
20-25℃ Celsius, 4-7 zile
〔Interpretare〕
Numarati toate coloniile de culoare albastru/albastru-verde.