Medii de cultura

download Medii de cultura

of 36

  • date post

    01-Jul-2015
  • Category

    Documents

  • view

    888
  • download

    4

Embed Size (px)

Transcript of Medii de cultura

Medii de culturaMedii de cultur : complexe de substan e care permit cre terea i multiplicarea bacteriilor

Scopuri : - izolarea in cultura pur - identificare - diagnostic, tratament - producerea industrial a unor substan e (prepararea vaccinurilor) - controlul sterilit ii sau inc rc turii microbiene a unor elemente de mediu (ap , alimente)

Conditii 1. Surse de C, N, ap , substan e minerale, energie, substan e nutritive, factori de crestere 2. pH optim, temperatura optima 3. atmosfer corespunz toare (aero/anaerobioza) 4. sterile

Ingrediente: Pepton Extracte sau infuzii de carne Agenti de solidificare: agar Indicatori de pH: turnesol, ro u fenol Agenti selectivi Zaharuri

Clasificarea mediilor de cultur: lichide solide semisolide Dup provenien : naturale sintetice Dup compozi ie i scop: simple scop: complexe speciale Dup consisten

Clasificarea mediilor de cultur Medii complexe: 1. De utilitate general :uzuale 2. Medii speciale : selective de imbog ire anaerobi teste biochimice

Dup con inutul de substan e nutritive: nutritive:1.Medii naturale: con in substan e 1.Medii naturale: nutritive n forma lor natural , f r a fi prelucrate n prealabil: mediul cu bil , mediul cu lapte, mediul cu ou , ser de bou coagulat

2. Medii artificiale: artificiale: A) Medii de baz pentru germeni nepreten iosi 1) bulion simplu 2) geloza simpl bulion + agar-agar (un agarextract de alge care asigur consisten a solid , nu are propriet i nutritive)

B) Medii compuse 1. Medii complexe: mediu de baz + complexe: substan e organice (snge, ser, glucoz ), sunt folosite pentru cultivarea germenilor preten iosi (geloza snge) 2. Medii de mbog ire: con in agen i ire: selectivi, care inhib dezvoltarea unor bacterii si permit cre terea altora

3) Medii speciale - mediul Lwenstein-Jensen pt. cultivarea Lwensteinmicobacteriilor - mediul Sabouraud pt. cultivarea levurilor (Candida) - mediul chocolat neisserii, hemofili

4) Medii diferen iale si selectiv-diferen iale: selectiviale: - indicator de culoare, +/- substan e +/selective (inhib cresterea unor bacterii) + zaharuri/polialcooli ; - sunt folosite pentru izolare si identificare (geloza lactozat , TSI, Leifson, Chapman)

Medii lichide- bulion simplu lichide-

Categoria: Mediu de baz Componente:macerat de carne + pepton + NaCl 0,5% Utilizare: pentru germeni nepreten io i

Geloza simpla Categoria: mediu de baz Componente: bulion simplu + agar-agar agar-

Geloza lactozataCategoria: mediu diferen ial Componente: geloz simpl + lactoz + albastru bromtimol Utilizare: studierea ferment rii lactozei

Fermentarea lactozei pe geloz lactozatBacteriile care degradeaza lactoza din mediu = lactozo pozitive Bacteriile care nu degradeaza lactoza din mediu = lactozo negative

Geloza sangeCategoria: mediu compus Componente: geloz simpl r cit la 45C + 45 snge defibrinat 1010-20%

Geloza socolatieCategoria:mediu special Componente: geloz simpl r cit la 60-80C + snge 60-80 Utilizare: cultivarea neisseriilor, hemofililor

Mediul ChapmanCategoria:mediu selectiv i diferen ial (evidentiaza o proprietate biochimica a tulpinii) Componente:geloz simpl + NaCl 7,5% + manitol + ro u fenol Utilizare:selectiv pentru stafilococ

Mediu Chapman:descompunerea manitolului Stafilococ manito-negativ (sus) manitoStaphylococcus aureus (jos)

Medii folosite pentru enterobacterii (agar, lactoza, indicatori de pH) Drigalski Istrate McConkey Levine

Mediul LevineCategoria: Mediu selectiv i diferen ial Componente:geloz simpl + eozin + lactoz + albastru de metilen Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E.coli)

ADCL (Leifson)Categoria: mediu selectiv i diferen ial Componente: geloz simpl + s ruri biliare + lactoz + ro u neutru Utilizare: cultivarea shigelelor i salmonelelor

Mediul Muller - Hinton Categoria: mediu special Utilizare: efectuarea antibiogramelor

Mediul OCSTCategoria: mediu de mbog ire (favorizeaza X bacteriilor, mai ales cand acestea sunt in concentratie mica) Componente: ou + cistein + ser + telurit de potasiu Utilizare: cultivarea bacililor difterici

Mediul SabouraudCategoria: mediu special Componente: geloz simpl + maltoz /glucoz + antibiotice Utilizare: cultivarea levurilor

Mediul Lowenstein-Jensen Lowenstein-

Medii pentru anaerobi: - Bulion cu acid thioglicolic (mediu lichid; la suprafata se adauga ulei de parafina - Tarozzi (mediu lichid, cu albus de ou; lasuprafata se adauga ulei de parafina) - Geloza Veillon (se obtin culturi in profunzimea mediului, realizate prin incorporare) - Tehnica Ott (se insamanteaza pe mediu solid, agenti reducatori si se sigileaza cu parafina)

Caractere de cultur

Se studiaz aspectul macroscopic al coloniilor bacteriene izolate

In mediu lichid se descrie: - turbiditatea - formarea de depozite - culoarea - suprafata Medii lichide - tulburare uniforma a mediului: E. coli - tulburare + pelicula la suprafata: b. piocianic - mediu limpede + pelicula: b. carbunos - grunji: streptococul

Colonia= Colonia= ansamblu localizat, alc tuit din populatie pur de bacterii provenite dintr-un dintrsingur parental. Pe mediu solid se descrie: - forma coloniei - culoarea - marimea - consistenta - suprafata - emulsificabilitatea - margini - mirosul culturii

1. Coloniile de tip S (smooth) - colonii rotunde - margini regulate, bombate - suprafa a neted , translucid - usor detasabile de pe mediu - suspensionate n sol. saline produc suspensii omogene (ser fiziol.) - reprezint forma normal pentru majoritatea bacteriilor patogene, fiind dotat cu calit i optime de structur antigenic si de patogenitate.

Staphylococcus aureus Cultur pur geloz simpl Colonii S pigment galben-auriu galben-

2. Coloniile de tip R (rough) - colonii neregulate - plate, uscate - suprafa a zbrcit - aderente la mediu - n solu ii saline produc suspensii neomogene (fenomenul de aglutinare spontan ) - este caracteristic , n general, bacteriilor nepatogene, cu 3 excep ii: Bacillus anthracis, Mycobacterium tuberculosis, Corynebacterium diphtheriae

3. Forme intermediare: S-R , R-S SR4. Coloniile de tip M - aspect mucos - foarte mari - foarte bombate - foarte lucioase - cu tendin de curgere si de confluare caracteristice bacteriilor care posed capsul (de ex. Klebsiella)

KLEBSIELLA GELOZAGELOZA-SANGE COLONII MUCOASE

KLEBSIELLA ADCL COLONII MUCOASE

5. Coloniile pufoase - mucegaiuri

Aspergilus niger

Candida albicans

6. Fenomen de c rare Proteus: pe medii simple creste sub forma unui v l care acoper toat suprafa a mediului (nu apar colonii)