pagina 1 din 388

Viorel ORDEANU

Imunologie si Microbiologie

note de curs si lucrari practice

pentru rezidentii de Laborator Farmaceutic anul II

Bucuresti 2012

pagina 2 din 388

Viorel ORDEANU

Imunologie si Microbiologie

- note de curs si lucrari practice

Manual pentru rezidentii de Laborator Farmaceutic, anul II, Facultatea de Farmacie, Universitatea de Medicina si Farmacie Carol Davila Bucuresti, anul universitar 2010-2011; redactate cu si pentru rezidenti, sub coordonarea Dr. Viorel Ordeanu, CS gr.1, in conformitate cu Curicula de Laborator Farmaceutic, cap. Imunologie-Microbiologie, 2007, p. 9, adaptata pe baza experientei didactice personale.

Manualul a fost scris pe baza notitelor de la curs si lucrari practice, a referatelor studentilor, rezidentilor si cursantilor Disciplinei de Microbiologie generala si farmaceutica. Este structurat pe sedinte, conform timpului avut la dispozitie de rezidenti pentru activitatile didactice. Pe baza experientei Manualului din 2010 si din 2011 (nepublicate) se va putea imbunatati viitorul manual, care sa fie tiparit la editura. Spre deosebire de manualul pentru studentii Facultatii de Farmacie anul II, care prezinta o sinteza de Microbiologie generala si farmaceutica, cuprinzand strictul necesar pentru formarea viitorilor farmacisti, acest manual abordeaza domeniul Imunologie-microbiologie mai larg (390 pagini), pentru ca viitorul specialist sa isi poata alege si aspectele care il intereseaza in mod deosebit. Fata de aceasta, recomandam ca lectura suplimentara orice documentatie din domeniu, incepand cu Elemente de microbiologie farmaceutica publicata de colectivul disciplinei, in Editura Universitara Carol Davila, 2010.

Obiective: - insusirea cunostintelor necesare pentru intelegerea fenomenelor mediate prin

procese imune si pentru aplicarea si interpretarea testelor imunologice; insusirea cunostintelor si deprinderilor necesare pentru diagnosticul de laborator al infectiilor si parazitozelor, precum si pentru controlul microbiologic al diferitelor produse medicale si preparate farmaceutice.

Tematica 20 ore (35 subiecte):

Continutul cursului (16 subiecte):

Imunologie

1. Mecanisme de aparare a organismului

2. Mijloace specifice de aparare imuna; celule implicate in raspunsul imun

3. Mediatori moleculari ai raspunsului imun

pagina 3 din 388

4. Fazele raspunsului imun si cooperarea dintre celulele implicate

5. Teste imunologice: reactii de precipitare, reactii de aglutinare, fixarea complementului, investigatiile clinice in starile de hipersensibilitate, detectarea complexelor imune, investigatii in bolile autoimune, investigarea imunodeficientelor

Microbiologie

6. Morfologie, fiziologie si genetica bacteriana

7. Microorganisme cu poarta de intrare: digestiva, respiratorie, cutanata, genito-urinara

8. Clasificarea virusurilor

9. Principalele grupe de paraziti si caracteristicile definitorii

10. Recoltarea produselor patologice in vederea analizei

11. Tehnici de insamantare, izolare si identificare a germenilor

12. Testarea sensibilitatii la antibiotice

13. Examenul microbiologic al diferitelor produse patologice

14. Controlul microbiologic al preparatelor medicale nesterile

15. Controlul microbiologic al preparatelor injectabile

16. Diagnosticul imbolnavirilor produse de principalele bacterii, protozoare si helminti; controlul contaminarii microbiene al substantelor farmaceutice, personalului, mediului, materialelor sanitare si al medicamentelor

Evaluarea cursantilor prin colocviu si referat

Activitati practice si de seminar (19 subiecte):

1. Tehnici de sterilizare prin caldura

2. Tehnici de sterilizare prin alti factori fizici si chimici, controlul sterilizarii

3. Examenul microscopic al formelor fundamentale bacteriene

4. Tehnici de efectuare a frotiurilor, coloratii

5. Recoltarea produselor patologice, coloratii

6. Tehnici de insamantare si izolare, identificarea germenilor

pagina 4 din 388

7. Testarea sensibilitatii la antibiotice: antibiograma difuzimetrica, stabilirea CMI, CMB, NEI, NEB

8. Generalitati asupra importantei pentru diagnostic a reactiilor Antigen-Anticorp (reactia Ag-Ac), exemple, serodiagnostic, seroidentificare

9. Reactia de aglutinare: tehnica si aplicatii

10. Reactia de precipitare: tehnica si aplicatii

11. Reactia de fixare a complementului: tehnica si aplicatii

12. Reactia de seroneutralizare: tehnica si aplicatii

13. Reactia cu anticorpi marcati: tehnica si aplicatii

14. Examenul microbiologic al produselor din tractul digestiv

15. Examenul microbiologic al produselor din tractul respirator

16. Examenul microbiologic al produselor din tractul genito-urinar

17. Examenul microbiologic al produselor de la nivel cutanat

18. Examenul microbiologic al sangelui

19. Controlul microbiologic al preparatelor medicale nesterile, sterile si al produselor antimicrobiene (antibiotice, chimioterapice, dezinfectante, antiseptice, decontaminante, conservanti) conform farmacopeei FR X/1993 si suplimentele.

Evaluarea cursantilor prin examen practic si referat.

Examen final pentru modulul de Imunologie-Microbiologie

pagina 5 din 388

CUPRINSUL

1. CAPITOLUL 1. Imunologie: Mecanisme de aparare a organismului; Mijloace specifice de aparare imuna; celule implicate in raspunsul imun; Mediatori moleculari ai raspunsului imun; Fazele raspunsului imun si cooperarea dintre celulele implicate; Teste imunologice: reactii de precipitare, reactii de aglutinare, fixarea complementului, investigatiile clinice in starile de hipersensibilitate, detectarea complexelor imune, investigatii in bolile autoimune, investigarea imunodeficientelor p. 6

2. CAPITOLUL 2. Microbiologie: Morfologie, fiziologie si genetica bacteriana. Microorganisme cu poarta de intrare: digestiva, respiratorie, cutanata, genito-urinara; contaminarea microbiana in Laboratorul Farmaceutic. Clasificarea virusurilor; Principalele grupe de paraziti si caracteristicile definitorii. Recoltarea produselor in vederea analizei; Tehnici de insamantare, izolare si identificare a germenilor; Testarea sensibilitatii la antibiotice; Examenul microbiologic al diferitelor prelevate. Controlul microbiologic al preparatelor medicale nesterile; Controlul microbiologic al preparatelor injectabile si al produselor sterile. Diagnosticul imbolnavirilor produse de principalele bacterii, protozoare si helminti; controlul contaminarii microbiene al substantelor farmaceutice, personalului, mediului, materialelor sanitare si al medicamentelor p. 34

3. CAPITOLUL 3. Lucrari practice: Tehnici de sterilizare prin caldura; Tehnici de sterilizare prin alti factori fizici si chimici, controlul sterilizarii. Examenul microscopic al formelor fundamentale bacteriene; Tehnici de efectuare a frotiurilor, coloratii; Recoltarea produselor patologice, coloratii. Tehnici de insamantare si izolare, identificarea germenilor . Testarea sensibilitatii la antibiotice: antibiograma difuzimetrica, stabilirea CMI, CMB, NEI, NEB. Generalitati asupra importantei pentru diagnostic a reactiilor Antigen-Anticorp (reactia Ag-Ac), exemple, serodiagnostic, seroidentificare; Reactia de aglutinare: tehnica si aplicatii; Reactia de precipitare: tehnica si aplicatii; Reactia de fixare a complementului: tehnica si aplicatii; Reactia de seroneutralizare: tehnica si aplicatii; Reactia cu anticorpi marcati: tehnica si aplicatii. Examenul microbiologic al produselor din tractul digestiv; Examenul microbiologic al produselor din tractul respirator; Examenul microbiologic al produselor din tractul genito-urinar; Examenul microbiologic al produselor de la nivel cutanat; Examenul microbiologic al sangelui. Controlul microbiologic al preparatelor medicale nesterile, sterile si al produselor antimicrobiene (antibiotice, chimioterapice, dezinfectante, antiseptice, decontaminante, conservanti) conform farmacopeei p.159

Bibliografie p.386

pagina 6 din 388

CAPITOLUL 1. Imunologie

Mecanisme de aparare a organismului; Mijloace specifice de aparare imuna; celule implicate in raspunsul imun; Mediatori moleculari ai raspunsului imun; Fazele raspunsului imun si cooperarea dintre celulele implicate; Teste imunologice: reactii de precipitare, reactii de aglutinare, fixarea complementului, investigatiile clinice in starile de hipersensibilitate, detectarea complexelor imune, investigatii in bolile autoimune, investigarea imunodeficientelor

Imunitatea nespecifica. Imunitatea specifica

Imunologia este tiina care se ocup cu studiul tuturor modificrilor care apar n organism pentru aparare antiinfectioasa: 1. Reacii de aprare fa de ptrunderea n esuturi fie a unor ageni neinfecioi (celule, seruri, heteroloage, anumite grefe) pe care n general organismul dup un anumit interval le elimin sau pentru diferii ageni infecioi (bacterii, virusuri) mpotriva crora organismul se apar prin mecanisme imunologice complexe, umorale i celulare. Imunologia studiaz de asemenea i 2. Reaciile de sensibilizare, adesea duntoare pentru organism, reacii care sunt determinate de contactul repetat cu anumite substane care ajung n intimitatea esuturilor: unele substane chimice, anumite medicamente inclusiv antibiotice, seruri imune heterologice, unele bacterii etc.

Apararea sau rezistena antiinfecioas reprezint ansamblul adaptrilor organismului transmise pe cale ereditar sau ctigate n timpul vieii individuale, care mpiedic ptrunderea i multiplicarea agenilor infecioi n organism. Mecanismele prin care se realizeaz stare