1

Lucrarea practic 1.

Microscopul. Tehnica microscopic. Metodele histochimice i imunohistochimice. Celula. Criterii generale de recunoatere a esuturilor. Coloraii: HE Tricrom Masson Tricrom Gmri PAS Impregnare argentic pentru reticulin Albastru de toluidin Anti-actin Anti-citokeratine

2

1. Microscopul optic:

Corp (rol de susinere) Oculare Revolver cu obiective Platin Macro i microviz Condensator Sistem de iluminare

Corpul microscopului

- susine celelalte componente - plaseaz ocularele, obiectivele, preparatul i sursa de iluminare n acelai ax

Ocularele - lentile mritoare (10x) - formeaz prin intermediul prismei o imagine binocular - distana interpupilar reglabil (privind cu 2 ochi se vede un singur cmp) - dioptrii reglabile (imagine clar pentru fiecare ochi)

Revolverul cu obiective - permite schimbarea lor facil - obiective de 4x, 10x, 20x, 40x, 100x - obiectivele se schimb din revolver FR modificarea macrovizei

Platina - susine lama cu preparatul - sistem de fixare a lamei (cavaleri) - sistem de deplasare a lamei pe axele Ox i Oy

Macro i microviza - sisteme de angrenaje - permit deplasarea pe axa Oz - macroviza produce deplasri vizibile - microviza produce deplasri de ordinul micrometrilor

Condensatorul

- sistem de lentile care mpreun cu apertura transform fasciculul de lumin emis de surs ntr unul paralel (iluminare uniform a cmpului)

Sursa de lumin

- permite trecerea luminii prin preparat (transiluminare)

Etapele examinrii unei lame la microscop - se mut platina n cea mai de jos poziie - se fixeaz n ax obiectivul 4x - se ajusteaz intensitatea luminoas a sursei - se ajusteaz distana interpupilar (un singur cmp la privirea cu ambii ochi) - plasarea lamei cu preparatul pe platin - aducerea preparatului n axul optic - privind n microscop, se deplaseaz platina din macroviz (se ridic preparatul) pn se obine imaginea relativ clar - se clarific imaginea cu microviza - deplasarea zonei de interes n mijlocul cmpului - schimbarea obiectivului

Prelucrarea primar a preparatelor - permite conservarea i manipularea lor - este standardizat (Ehrlich, acum peste 100 ani) - etape: - fixarea: ntrerupe procesele de distrucie celular post mortem

- incluzionarea: nlocuirea apei din preparat cu alcool i apoi cu benzen sau xilen i n final cu parafin bloc care se poate manipula - secionarea: cu ajutorul microtomului, seciuni cu grosimea de 5 care se lipesc pe lam (de obicei cu albumin) - colorarea are ca scop creterea contrastului dintre nucleu i citoplasm, permind identificarea celulelor i esuturilor (pe lama necolorat nu se vd detaliile morfologice celular tisulare)

- montarea: lipirea unei lamele deasupra seciunii cu balsam de Canada Colorarea

acidofilia: afinitatea pentru colorani acizi (caracteristic substraturilor bazice proteine citoplasmatice, colagen) bazofilia: afinitatea pentru colorani bazici (caracteristic substraturilor acide acizi nucleici nucleu i reticul endoplasmic rugos) metacromazia: proprietate mixt a substratului i a colorantului: virarea culorii colorantului n contact cu anumite substraturi (cea mai frecvent: albastruviolet)

Coloraii: 1. Morfologice: - bicrome (un colorant nuclear bazic i unul acid, pentru citoplasm) - cea mai frecvent utilizat: Hematoxilin Eozin (HE)

- tricrome (un colorant nuclear, 2 colorani acizi, din care de regul unul pentru colagen) - cele mai frecvente: - Masson: colagenul este colorat n albastru

- Gmri: colagen verde, citoplasma rou aprins, nuclei violet nchis

3

4

2. Coloraii histochimice:

- permit identificarea cu relativ specificitate a unui substrat prin reacii de culoare sau de precipitare datorate unor grupri ale acestuia - se mai folosesc: - reacia PAS: identificarea polizaharidelor prin colorarea n violet-rou a gruprilor aldehidice libere create n structura lor (glicogen, membrane bazale) - coloraia cu albastru de toluidin: identificarea glicozaminoglicanilor din granulaiile mastocitelor i mucinelor prin metacromazie (violet), utilitate pentru organele nervoase - coloraia albastru alcian: mucine (glicozaminoglicani) - impregnrile argentice: 4 tipuri - pentru fibre de reticulin i membrane bazale - pentru componente ale neuronilor i celulelor gliale - pentru celule neuroendocrine - pentru germeni (H. pylori) - mucicarmin (pentru mucus) - orcein pentru fibre elastice

- coloraii histoenzimologice: identificarea prezenei i activitii unor enzime - se mai folosesc:

- ATP aza (intens pozitiv la polul biliar al hepatocitelor, identificarea canaliculilor biliari) - mieloperoxidaza (identificarea unor subtipuri de leucocite)

3. Coloraii imunohistochimice: - bazate pe reacia antigen anticorp - anticorp primar anticorp secundar - anticorpul secundar este marcat, de regul enzimatic

- vizualizare prin reacie de culoare catalizat de enzima care marcheaz anticorpul secundar - identific tipuri de celule i molecule ale acestora, inclusiv cnd celulele sunt transformate malign - utile n embriologie molecular, histologie i patologie - exemple de markeri: citokeratine, vimentin, actin de tip muchi neted, cromogranin A, enolaz neuronal specific, protein glial fibrilar acid, colagen IV

4. Coloraii citologice: - APT - Drgan: - simpl, nu d foarte multe detalii celulare - Papanicolaou:

- mai complicat - d detalii celulare mai multe (ex. acumularea de keratin n citoplasm, util n diagnosticul cervico vaginal, pleural, lavaj bronic)

- May Grnwald Giemsa: - util pentru frotiuri de snge periferic i mduv osoas hematogen - d detalii citoplasmatice mai multe (granulaii)

Lucrarea practic 2. Epitelii de acoperire: simple, pseudostratificate i stratificate. Membrana bazal. Coloraii: HE Impregnare argentic PAS Anti pancitokeratin Preparate: Epiteliu simplu scuamos aort Epiteliu simplu cubic rinichi, glande salivare Epiteliu simplu columnar stomac, intestin, uter Epiteliu pseudostratificat uroteliu, epiteliu respirator, epididim Epiteliu stratificat scuamos nekeratinizat esofag, limb Epiteliu stratificat scuamos keratinizat piele Membrana bazal PAS, impregnare argentic

1

2

ESUTURILE EPITELIALE

Definiie: esuturile epiteliale sunt formate preponderent din celule dispuse ordonat pe membrana bazal, strns unite ntre ele prin intermediul jonciunilor. Marker-ul imunohistochimic este citokeratina.

Criterii de recunoatere:

sunt formate predominant din celule, apoziionate i dispuse ordonat; prezint pol bazal pe membrana bazal i pol apical liber; prezint polaritate structural i funcional, prin microdomeniile de membran, apical,

bazal i lateral; nu sunt vascularizate cu excepia striei vasculare din urechea intern; conin n citoplasm filamente de citokeratin (CK).

Clasificare general Epiteliile se clasific n 5 categorii :

Epitelii de acoperire - acoper suprafaa corpului i delimiteaz organele cavitare; Epitelii glandulare secret produi specifici; Mioepiteliile prezint n citoplasm, pe lng CK, actin, cu rol contractil; Epitelii senzoriale - recepioneaz stimuli din exterior pe care i transform n influx

nervos (ex. mugurii gustativi din cavitatea bucal); Epitelii atipice.

Epiteliile de acoperire:

se clasific n funcie de: numrul de straturi de pe membrana bazal:

o epitelii simple o epitelii pseudostratificate o epitelii stratificate

forma celulelor din stratul superficial: o scuamoase o cubice o columnare

Forma celulei se apreciaz dup forma nucleului:

- celula scuamoas are nucleul ovalar, paralel cu membrana bazal; - celula cubic are nucleul rotund; - celula columnar are nucleu ovalar, perpendicular pe membrana bazal.

Prin combinarea numrului de straturi i a formei celulelor rezult urmtoarele tipuri de epitelii de acoperire:

Epitelii simple scuamoase: sunt formate dintr-un singur rnd de celule

turtite, cu limea mai mare dect nlimea; localizare: endotelii, mezotelii, foia parietal

a capsulei Bowmann, alveole pulmonare.

Epitelii simple cubice: sunt formate dintr-un rnd de celule

izodiametrice: limea este egal cu nlimea;

localizare: ducte excretorii din glandele exocrine, epiteliul de acoperire al ovarului.

Epitelii simple columnare: sunt formate dintr-un rnd de celule

columnare: nlimea celulei este mai mare dect limea, iar axul lung al celulei este perpendicular pe membrana bazal;

localizare: epiteliul intestinal, tube uterine, vezicula biliar.

3

Epitelii pseudostratificate: sunt formate dintr-un singur rnd de celule

cu nucleii situai la nlimi diferite n grosimea epiteliului, ceea ce creeaz impresia de fals stratificare;

toate celulele ajung cu polul bazal pe MB, dar nu toate ajung cu polul apical la suprafaa liber;

localizare: o trahee - epiteliul pseudostratificat ciliat

de tip respirator; o vezic urinar, uretr uroteliul;

Epiteliu respirator

Uroteliu

o epididim.

Epiteliile stratificate sunt formate din mai multe straturi celulare, doar stratul profund fiind situat pe membrana bazal. Fiecare strat poate fi format din unul sau mai multe rnduri de celule. Dup forma celulelor din ultimul strat, epiteliile stratificate se clasific n scuamoase, cubice i columnare.

4

Epiteliul stratificat scuamos keratinizat: localizare: epiderm; are urmtoarele straturi:

o bazal: regenerator, un rnd de celule cubice;

o intermediar: 3 5 rnduri de celule izodiametrice, unite prin desmozomi, care n urma deshidratrii capat un aspect spinos;

o granulos: 2 3 rnduri de celule scuamoase, citoplasma acidofil, granule citoplasmatice bazofile de keratohialin;

o cornos sau exfoliativ: scuame celulare fr nucleu, complet keratinizate, intens acidofile.

particulariti: o pielea de pe talp: ntre stratul

granulos i cel cornos se interpune stratul lucios sau lucid, o mas citoplasmatic fr nuclei, intens acidofil, eozinofil.

5

Epiteliul stratificat scuamos nekeratinizat: localizare: mucoasa bucal, orofaringe,

esofag, exocol uterin, vagin, canal anal; are trei straturi celulare:

o stratul bazal: regenerator, pe membrana bazal (MB), alctuit dintr-un rnd de celule cubice;

o stratul intermediar: 3 - 5 rnduri de celule epiteliale izodiametrice;

o stratul superficial: 2 - 3 rnduri de celule scuamoase, cu nuclei ovalari, axul mare paralel cu MB.

Epiteliile stratificate cubice: sunt alctuite din dou rnduri de celule

izodiametrice; localizare: ducte exctretorii mari; Epiteliile stratificate columnare: sunt alctuite din mai multe rnduri de

celule, celulele stratului superficial sunt columnare;

localizare: ducte excretorii mari.

Membrana bazal separ esutul epitelial de cel conjunctiv

subadiacent; este groas la trahee i cornee, dar foarte

subire la uroteliu. n coloraia HE se distinge greu, sub

forma unei structuri slab acidofile (eozinofile), omogen, acelular.

se identific specific prin reacia PAS, impregnare argentic sau cu anticorpi anti-colagen IV sau anti-laminina.

Lucrarea practic 3. Epitelii glandulare exocrine: tipuri de acini i glandele tubulare. Epitelii glandulare endocrine: cuiburi, foliculi, cordoane Coloraii: HE Tricrom Azan Mallory PAS Albastru alcian Anti citokeratin 8 Anti actin de tip muchi neted Anti chromogranin A Preparate: Epitelii glandulare exocrine: Celule caliciforme colon Glande tubulare simple uter Glande tubulare ramificate stomac (corp i fundus gastric) Glande tubulo-acinare glandele salivare, esofag Celule mioepiteliale anti actin muchi neted Epitelii glandulare endocrine: Insule pancreas Foliculi tiroid Cordoane suprarenale Cuiburi hipofiz

6

EPITELIILE GLANDULARE

Definiie: sunt formate din celule specializate n sinteza unor produi specifici, intr n alctuirea glandelor exo- i endocrine.

Clasificare Dup locul de eliminare a produsului de secreie, se clasific n:

o epiteliile glandulare exocrine: i elimin produsul de secreie la suprafaa organismului sau n cavitile acestuia,

printr-un sistem de ducte; o epiteliile glandulare endocrine:

i elimin produsul de secreie, denumit hormon, direct n snge; nu prezint sistem de ducte; sunt puternic vascularizate; celulele sunt organizate sub form de cuiburi (adenohipofiza), cordoane (suprarenal,

paratiroide), foliculi (tiroid), insule (gonade, pancreas endocrin); celule izolate localizate n structura diferitelor esuturi i organe care au posibilitatea de

a prelua, sintetiza i excreta substane care acioneaz similar hormonilor (amine biogene i peptide cu grutate molecular mic)

markeri imunohistochimici: sinaptofizina, Chromogranina A. Epitelii glandulare exocrine se clasific 1. dup numrul de celule:

o unicelulare: celula caliciform; o multicelulare: formeaz glandele exocrine:

prezint poriune secretorie (format din epitelii glandulare exocrine) i poriune excretorie reprezentat de un sistem de ducte, prin care produsul sintetizat este eliminat la suprafa sau n caviti.

2. dup forma poriunii secretorii: acinare: form sferic sau elipsoidal acini seroi, mucoi, micti, acini

mamari i prostatici; tubulare: forma unui tub; tubulo-acinare.

dac ductele nu sunt ramificate, glanda se numete simpl. n cazul n care sistemul de ducte este ramificat glanda se numete compus.

Tipuri de glande multicelulare:

o strat continuu de celule columnare secretoare de mucine: epiteliu gastric; o glande tubulare simple: glandele gastrice, intestinale, sudoripare i endometriale; o glande tubulare ramificate: endocol, corp gastric o glande tubulo-acinare: glandele salivare, glandele mamare, prostata.

7

Celula caliciform pol apical dilatat de vacuole de mucus; pol bazal efilat, nucleu heterocromatic mpins bazal, citoplasm spumoas palid; localizare: epiteliul intestinal i respirator. histochimic: pozitiv la reacia PAS, albastru

alcian, mucicarmin i metacromatic la coloraia cu albastru de toluidin.

Acinul seros structur bine delimitat dimensiuni mici form rotund lumen punctiform celulele seroase:

o citoplasm ntunecat, acidofil, granular la polul apical.

o citoplasm bazofil la polul bazal (RER).

o nucleu eucromatic, rotund, dispus ordonat n treimea bazal a celulei.

Acinul mucos structur bine delimitat dimensiuni mari form ovalar lumen larg celulele mucoase:

o citoplasma spumoas, palid colorat; o nucleu eucromatic, ovalar, turtit,

mpins periferic pe MB.

Acinul mixt structur bine delimitat dimensiuni mari are dou componente:

o mucoas situat central i o seroas situat periferic, sub

forma unei semilune.

8

Acinul mamar (TDLU unitatea terminal ductal - lobular):

dimensiuni mici lumen ngust epiteliu cu celule secretorii i

celule mioepiteliale

Acinul prostatic: dimensiuni mari form neregulat lumen larg epiteliu cu 3 tipuri de celule

- bazale proliferativ - principale secretorii (PSA) - endocrine (ChrA, Syn)

Celulele mioepiteliale: fusiforme sau stelate ntre membrana bazal i celulele

epiteliale acinare i ductale glandele salivare, glanda mamar,

sudoripare, lacrimale marker: actin de tip muchi neted

9

Insule, Chr A Cordoane, HE

Foliculi, HE Cuiburi, tricrom

Epitelii glandulare endocrine

Glanda tubular simpl: invaginare a epiteliului de acoperire: localizare: antru gastric, endometru,

intestin subire; Gland tubular ramificat: localizare: cardie, corp gastric, endocol

uterin;

10

Lucrarea nr. 4

esuturile conjunctive. Celulele conjunctive fixe i mobile. Fibrele conjunctive.

Coloraii:

HE Tricrom AT/ AA Orcein Impregnare argentic

1

Lucrarea nr. 4. ESUTURILE CONJUNCTIVE. Celulele conjunctive fixe i mobile. Fibrele conjunctive.

Definiie: esuturile conjunctive au origine comun (mezenchimul - ectomezenchimul embrionar), dar cu funcii variate. Acest grup de esuturi are n structur celule i matrice extracelular, alctuit din componente celulo-dependente (fibrele conjunctive i substana fundamental).

Caractere generale: esuturile conjunctive se caracterizeaz prin polimorfism celular i aparent dezordine celular-fibrilar.

Componente: Celule conjunctive fixe i mobile, distanate unele de altele. Fibre conjunctive: colagene, de reticulin, elastice i oxitalanice. Substan fundamental (cromofob sau slab cromofil). Lichid interstiial (cromofob).

CELULELE CONJUNCTIVE Celulele conjunctive fixe Au mobilitate limitat, fiind rezideni permaneni ai esutului conjunctiv. Celulele conjunctive fixe: celula mezenchimal, reticular, fibroblastul, fibrocitul, miofibroblastul, mastocitul, celula adipoas alb i brun, pericitul i macrofagul.

Celula mezenchimal Localizare: pe lamele de embrion ntre primordiile de organe sau la periferia seciunii. Form stelat, cu prelungiri fine, ramificate Nucleu mare, eucromatic, polinucleolat. Citoplasm slab bazofil sau cromofob.

Celula reticular Localizat n srtoma organelor hematolimfoformatoare. Form stelat, prelungiri lungi, ramificate. Nucleu central,eucromatic, nucleolat. Citoplasma slab bazofil.

2

Fibroblastul Localizat n toate esuturile conjunctive, n contact cu fibrele. Forma alungit sau stelat, cu prelungiri groase; din profil are form efilat, alungit. Nucleu oval, eucromatic, nucleolat. Citoplasma slab bazofil.

Fibrocitul Localizat n toate esuturile conjunctive, mulat pe fibre. Form alungit, puine prelungiri scurte. Nucleu heterocromatic, ovalar sau aplatizat (din profil). Citoplasma slab acidofil

Mastocitul Localizat n esutul conjunctiv perivascular, ntre fibrele musculare etc. Nucleu oval, central, haterocromatic. Citoplasma conine granulaii specifice care NU se vd la HE. Metode de evideniere pentru granulaii: AT (orto/metacromazie), AA, AAS, PAS (inconstant+).

Miofibroblastul are form asemntoare cu fibroblastul de care nu poate fi deosebit n coloraiile morfologice. Se identific imunohistochimic cu anticorpi antiactin muchi neted.

3

Adipocitul alb (unilocular) Formeaz esutul adipos alb i se gsete izolat (n grupuri mici) n esutul conjunctiv lax i seroase. Form sferic sau poliedric. Nucleu heterocromatic, la periferia celulei. Citoplasma -inel acidofil fin la periferie. Centrul celulei este ocupat de o pictur lipidic cromofob n coloraii uzuale.

Adipocitul brun (multilocular) Localizare: embrion, ft; la adult sunt limitate la axil, perirenal, regiunea cervical. Form poliedric. Nucleu rotund, dispus central sau uor excentric. Citoplasma acidofil, conine numeroase globule lipidice, de diferite dimensiuni, cromofobe n coloraiile morfologice.

Pericitul Localizat n MB a capilarelor i venulelor postcapilare. Form stelat, cu prelungiri lungi. Nucleu oval, uor turtit. Citoplasma acidofil. Evideniere: imunohistochimic cu anticorp antiactin muchi neted.

Macrofagul Form neregulat, cu prelungiri scurte, sau rotund-ovalar. Nucleu ovalar, heterocromatic, central sau excentric. Citoplasma slab acidofil, poate conine material fagocitat.

Caracterele morfologice ale macrofagelor variaz n raport cu momentul funcional (repaus sau fagocitoz). Totalitatea macrofagelor formeaz sistemul monocitomacrofagic, care cuprinde: macrofagul conjunctiv, osteoclastul, celulele cu praf din plmn, celula Kupfer din ficat, microglia din SNC

4

Celulele conjunctive mobile Sunt celule migrate din snge n esuturile conjunctive ca rspuns la stimuli specifici: monocitul, limfocitul, plasmocitul, granulocitele.

Plasmocitul Form ovalar. Nucleu ovalar, excentric, heterocromatic, cu cromatina dispus n blocuri triunghiulare pe membrana nuclear. Citoplasma bazofil cu excepia unei zone perinucleare, unde este cromofob.

FIBRELE CONJUNCTIVE Sunt produsul de secreie al celulelor NU AU NUCLEI.

Fibrele colagene Localizare: n esuturile conjunctive, n cantiti, i cu orientri variabile. Morfologie: fibre groase, polifibrilare, lungi, sinuoase, neramificate, neanastomozate, organizate n fascicole de grosimi variabile Evideniere: HE roz; tricrom Gmri verde, tricrom Masson albastru, van Gieson rou.

Fibrele de reticulin Localizare: organe hematolimfoformatoare, rinichi, ficat, plmni, glande endocrine. Morfologie: subiri, monofibrilare, cu grosime variabil n lungul aceleiai fibre i de la o fibr la alta; sunt ramificate i anastomozate, formnd reele. Evideniere: impregnare argentic negru.

Granulocitele neutrofil, acidofil i bazofil-, limfocitul i monocitul, vor fi studiate la capitolul Snge

5

Fibrele elastice Localizare: piele, ligamente, plmn, vase. Morfologie: monofibrilare, sinuoase, cu grosime variabil de la o fibr la alta, dar constant n lungul aceleai fibre. Fibrele se ramific i se anastomozeaz, formnd reele sau lamele. Evideniere: orcein: brun-viiniu; rezorcin-fuxin: rou; aldehid-fuxin: negru.

6

Lucrarea nr. 5.

Tipuri de esut conjunctiv. esutul mezenchimal. esutul conjunctiv lax. esuturi conjunctive dense dezordonate i ordonate. esutul adipos. esutul conjunctiv reticular. Coloraii: HE Tricrom Impregnare argentic

7

Lucrarea nr. 5. TIPURI DE ESUT CONJUNCTIV esuturile conjunctive pot fi clasificate pe criterii funcionale, dup raportul dintre celule- fibre -i substana fundamental, i dup gradul de organizare al celulelor i al componentelor extracelulare. esuturile conjunctive embrionare: esutul mezenchimal, esutul conjunctiv mucos. esuturile conjunctive propriu zise: esutul conjunctiv lax, esutul conjunctiv dens (ordonat i

dezordonat), esutul adipos (alb i brun). esuturile conjunctive specializate: cartilaginos, osos, snge, esutul mieloid, limfoid, reticular

i elastic.

esutul mezenchimal Criterii de recunoatere: reea tridimensional de celule mezenchimale, n ochiurile creia se gsete substan fundamental (SF) amorf slab bazofil sau cromofob. Nu are fibre. Localizare: embrion, ntre primordiile de organe.

esutul conjunctiv lax Criterii de recunoatere: dezordine celular-fibrilar; prezint toate tipurile de celule fixe i mobile, SF bogat i rare fibre colagene subiri. Localizare: derm papilar, stroma organelor parenchimatoase, lamina propria a mucoasei organelor cavitare i tubulare.

8

esuturi conjunctive dense Criterii de recunoatere: varietati de esut conjunctiv n care predomin fibrele de colagen, cu puine celule (fibroblaste, fibrocite) i puin SF. n funcie de aranjamentul fibrelor, se clasific n: esut conjunctiv dens dezordonat i esut conjunctiv dens ordonat. esutul conjunctiv dens dezordonat

Criterii de recunoatere: fascicule groase de fibre colagene orientate n diferite direcii, puine fibroblaste -cite, SF redus cantitativ. Localizare: dermul reticular, submucoasa organelor cavitare sau tubulare, stroma unor organe parenchimatoase.

esutul conjunctiv dens ordonat Criterii de recunoatere: fibre dispuse ordonat i orientat pentru a forma structuri fasciculare sau lamelare, puine celule aplatizate i puin SF. Localizare: tendoane, ligamente, cornee.

Tendonul esut conjunctiv dens ordonat fascicular i esut conjunctiv lax (endotenonium, peritenonium, epitenonium). n seciune longitudinal: fascicole paralele de fibre colagene groase, ntre care se gsesc n SF redus, tenocite (fibrocite) aplatizate, grupate cte 2 (bigeminism).

9

Tendonul n seciune transversal: arii acidofile omogene de form rotund sau poligonal, ntre care se observ nucleii hipercromi, de form stelat, ai tenocitelor. Un grup de fascicole, mpreun cu tenocitele i SF dintre ele, este separat de fascicolele nvecinate prin endotenonium.

esutul conjunctiv dens lamelar Fibrele colagene sunt dispuse ordonat, n lamele paralele sau concentrice. ntre lamele se gsesc puine fibroblaste aplatizate i SF. Localizare: teaca conjunctiv a nervului, a foliculului pilos, capsula corpusculilor senzitivi, stroma cornean.

esutul adipos Criterii de recunoatere: esut conjunctiv cu predominan de celule adipoase, puine celule mobile, puine fibre, SF redus. esutul adipos alb Aspect dantelat datorit predominanei de adipocite uniloculare. ntre celule numeroase vase. Localizare: subcutanat unde este septat prin trabeculi conjunctivi n lobuli-, n jurul unor organe ochi, rinichi.

10

esutul adipos brun esut adipos caracterizat prin predominana de adipocite brune. Este lobulat prin septuri conjunctive. ntre celule numeroase vase sanguine i pot apare adipocite albe. Localizare: axilar, cervical, perirenal.

esutul reticular Criterii de recunoatere: reea tridimensional celulo-fibrilar (celule i fibre reticulare), n ochiurile creia se gsete o SF bogat. Localizare: stroma organelor hematolimfoformatoare (cu excepia timusului)

11

Lucrarea nr. 6. esuturi cartilaginoase: hialin, elastic, fibros. esutul osos: tipuri de os, sisteme haversiene. Coloraii HE Tricrom Orcein Alizarin Albastru Evans

12

Lucrarea nr. 6. esuturi cartilaginoase: hialin, elastic, fibros. esutul osos: tipuri de os, sisteme haversiene. ESUTUL CARTILAGINOS Varietate de esut conjunctiv specializat, alctuit din celule specifice (condroblaste, condrocite) i o matrice extracelular. Criterii generale de recunoatere: mase compacte de esut, n care, celulele specifice (condrocitele) sunt dispuse izolat sau n grupuri izogene, n lacune spate n matricea extracelular. Componentele cartilajului: celule specifice (condroblaste, condrocite, condroclaste), matrice extracelular, pericondru. Clasificare: n funcie de structura histologic: cartilaj hialin, elastic, fibros

Condroblastele Form lenticular sau ovalar, nucleu mare, eucromatic, nucleolat, citoplasm slab bazofil. Localizare: la periferia cartilajului, parial incluse n matricea cartilaginoas. Condrocitele Form ovalar sau angular, nucleu rotund, hipercrom, excentric, citoplasm slab bazofil sau acidofil. Localizare: fiecare celul este cantonat ntr-o lacun spat n matrice, i se dispun izolat, sau n grupuri izogene.

Grupuri izogene: grupuri de condrocite cu genitor comun. n funcie de dispoziia celulelor, pot fi: -axiale- celulele sunt dispuse de-a lungul unui ax (cartilajul de cretere). -coronare- celulele sunt dispuse de-a lungul unor axe radiare (cartilaj hialin matur).

13

Matricea extracelular Compus din fibre (colagene, elastice) i SF (glicoproteine i proteoglicani). Matricea este uor acidofil, metacromatic i alcianofil. Intensitatea cromatic este mai mare n jurul celulelor (matricea teritorial) i mai slab n zonele dintre celule (matrice interteritorial).

Pericondrul Delimiteaz cartilajul la periferie. Are dou zone: -extern- esut conjunctiv dens dezordonat -intern- pericondrul condrogen- conine numeroase condroblaste. Din pericondru se pot desprinde canale vasculare- canale cartilaginoase.

Cartilajul hialin Criterii de recunoatere: matrice amorf, relativ bogat, n care se gsesc grupuri izogene mari (3-5-7) de condrocite. La periferie prezint pericondru. Localizare: schelet primitiv, cartilajele de cretere, sept nazal, cartilaje laringiene mari, inele traheale i bronhice, cartilaje costale, cartilajele articulare.

14

Cartilajul elastic Criterii de recunoatere: numeroase condrocite relativ mari, aranjate n grupe izogene mici; matrice redus cantitativ, bogat n fibre elastice care formeaz o reea dens pericelular. La periferie prezint pericondru. Localizare: pavilionul urechii, tuba auditiv, epiglota, cartilajele laringiene mici.

Cartilajul fibros Criterii de recunoatere: insule de esut cartilaginos (condrocite izolate sau n grupuri izogene mici, matrice teritorial), separate prin esut conjunctiv dens dezordonat. Nu prezint pericondru. Localizare: disc intervertebral, simfiza pubian, articulaia temporo-mandibular i sterno-clavicular, la inseria tendoanelor mari de os.

ESUTUL OSOS Varietate de esut conjunctiv specializat, alctuit dintr-o matrice extracelular intens mineralizat i celule specifice, isolate n lacune spate n matrice. Criterii generale de recunoatere: matrice extracelular organizat n lamele, n/ ntre care, n lacune izolate, se gsesc celulele specifice. Componente: celule osoase (osteoprogenitoare, osteoblaste, osteocite, osteoclaste) i matrice extracelular organizat n lamele. Lamelele osoase mpreun cu osteocitele aferente, formeaz unitile morfofuncionale ale esutului osos. Clasificare: dup dispoziia lamelelor osoase, se disting dou tipuri de esut osos: compact i spongios.

15

esut osos compact Criterii de recunoatere: lamelele osoase sunt fie paralele ntre ele i cu suprafeele libere ale osului (esut osos circumferenial), fie dispuse concentric n jurul unui canal (esut osos haversian- osteon). Osteoanele sunt unite prin lamele arcuate necentrate de canale sisteme interstiiale) Localizare: compacta oaselor scurte i late, diafiza oaselor lungi.

esut osos spongios (trabecular) Criterii de recunoatere: lamelele osoase se ntretaie formnd trabeculi de grosimi variabile, care delimiteaz caviti pline cu mduv osoas. Localizare: formeaz zona central a oaselor scurte i late, i epifizele oaselor lungi.

16

Lucrarea nr.7. Celulele osoase. Osul ca organ. Osificarea endomembranoas i endocondral. Creterea oaselor n lungime. Coloraii: HE Tricrom

17

Lucrarea nr. 7. Celulele osoase. Osul ca organ. Osificarea endomembranoas i endocondral. Creterea oaselor n lungime.

Celulele esutului osos - Osteoprogenitoare: sunt localizate pe suprafeele osoase. Au form ovoidal sau aplatizat, nucleu eucromatic, nucleolat, citoplasm bazofil. - Osteoblastele: sunt dispuse n strat continuu pe suprafaa matricei osoase. Au form poliedric sau cuboidal, nucleu eucromatic, nucleolat, citoplasm intens bazofil. - Osteocitele: celule cu prelungiri, nucleu rotund sau ovalar fr nucleol, citoplasma slab bazofil sau acidofil. Corpul celular este cantonat n lacune matriceale, iar prelungirile- n canaliculi osoi care comunic cu canaliculii lacunelor nvecinate. - Osteoclastele: sunt localizate pe suprafaa lamelelor osoase, n depresiuni lacunare. Sunt celule gigante, multinucleate (10- 60 nuclei) i au citoplasm acidofil.

Osul ca organ -Periostul: esut conjunctiv dens dezordonat, cu o zon intern bogat celular (celule osteoprogenitoare, osteoblaste). Acoper suprafaa extern a oaselor, cu excepia suprafeelor articulare. -esut osos compact circumferenial (compacta extern i intern) -esut osos compact haversian (diafiza oaselor lungi). Canalele Havers, paralele ntre ele i cu axul lung al osului, sunt interconectate i comunic cu periostul i cu canalul medular central, prin canale oblice, nenconjurate de lamele osoase. --Endost- esut conjunctiv bogat n celule osteoprogenitoare, care tapeteaz toate cavitile osoase. - n centrul diafizei oaselor lungi- canal medular

central, iar n centrul oaselor scurte i late- esut osos spongios.

18

Osteogeneza -Procesul de formare i difereniere a esutului osos din esut mezenchimal (osificare intramembranoas) sau cartilaginos (osificare endocondral). Osificarea intramembranoas (oasele cutiei craniene, maxil). Etape: - apariia de nuclee de condensare celular n esutul mezenchimal. - diferenierea celulelor mezenchimale n celule osteoprogenitoare osteoblaste care sintetizeaz matrice preosoas (spiculi). Pe msur ce matricea se acumuleaz, celulele rmase incluse n matrice se transform n osteocite. - unirea spiculilor cu formarea de trabeculi pe suprafaa crora se dispun osteoblastele - mezenchimul restant de la periferie- se transform n periost.

Osificare endocondral (oase lungi i scurte) Se realizeaz pe modelul de cartilaj hialin al viitorului os. Etape: - formarea modelului de cartilaj hialin -formarea (prin osificare intramembranoas) a osului periostal. Pericondrul se transform n periost. - degenerarea condrocitelor i calcificarea matricei cartilaginoase n centrul diafizei. - invadarea cartilajului calcificat de ctre un mugure osteogenic (esut conjunctiv tnr cu celule osteoprogenitoare) i apariia centrului de osificare primar (diafizar). - celulele osteoprogenitoareosteoblaste care sintetizeaz matrice preosoas, cu apariia primelor trabecule de os primar. - esutul osos din centrul diafizei este rezorbit de osteoclaste: apare canalul medular. - formarea centrelor secundare epifizare- de osificare. - esutul cartilaginos rmne cantonat la jonciunea diafizo- epifizar (cartilajul de cretere) i pe suprafeele articulare.

19

Creterea oaselor n lungime Se realizeaz pe seama cartilajului de cretere metafizar, n care se disting, dinspre epifiz spre diafiz, urmtoarele zone: - zona cartilajului de rezerv cartilaj hialin; - zona cartzilajului hiperplazic grupe izogene axiale mari, paralele ntre ele i cu axul lung al diafizei; - zona cartilajului hipertrofic condrocite hipertrofiate, matrice redus la septe fine intercelulare; - zona cartilajului degenerat condrocitele degenerate las lacune goale; calcificarea septurilor matriceale; - frontul de naintare vascular; - zona de osificare formarea osului imatur; - zona esutului osos matur.

20

1

Lucrarea practic 8. esuturile musculare. esutul muscular striat scheletal. Placa motorie. esutul muscular striat cardiac. esutul nodal. esutul muscular neted. Coloraii: HE Heidenheim Tricrom Impregnare argentic pentru placa motorie Anti-actin Anti-desmin

2

ESUTURILE MUSCULARE Definiie. esuturi caracterizate prin prezena de celule specializate pentru funcia de contracie, responsabile de micrile corpului, de meninerea poziiei acestuia, precum i de modificrile de form i de mrime ale unor organe. Marker-ul imunohistochimic este desmina.

Clasificare morfologic:

o esut muscular striat: o caracterizat prin prezena striaiilor transversale n citoplasma celulelor. o se subclasific, dup localizare, n: esut muscular striat scheletal - asociat scheletului; esut muscular striat visceral limb, esofag, faringe; esut muscular striat cardiac - cord i la baza vaselor mari.

o esut muscular neted: o caracterizat prin absena striaiilor transversale (cu prezenta striaiilor

longitudinale); o formeaz tunica muscular a organelor cavitare.

Celulele musculare striate scheletale, seciune transversal: arii poligonale, acidofile, cu aspect punctat

datorit miofibrilelor; nuclei multipli, heterocromatici, rotunzi, sub

sarcolem.

Celulele musculare striate scheletale, seciune longitudinal: sinciiu morfologic multinucleat; form: coloan cilindric; sarcolem, dublat la exterior de o lamin

bazal cu fibre de reticulin i celule satelite; nuclei multipli: ovalari, heterocromatici,

dispui imediat sub sarcolem; sarcoplasma acidofil, cu striaii transversale,

determinate de dispoziia ordonat a miofibrilelor n sarcomere.

3

esutul muscular striat cardiac : Celulele musculare striate cardiace, seciune longitudinal:

form de coloan ramificat; 1 - 2 nuclei dispui central, ovalari,

eucromatici; sarcoplasm acidofil, cu striaii

transversale; Celulele sunt solidarizate ntre ele prin

discuri intercalare (ansamblu de jonciuni strnse i comunicante care permit musculaturii s se contracte sincron, devenind un sinciiu funcional).

Muchiul striat scheletal are: o o componenta muscular; o o componenta conjunctiv:

o endomisium - esut conjunctiv lax, bogat n fibre de reticulin dispuse n jurul fiecrei fibre musculare;

o perimisium - esut conjunctiv lax, ce nconjoar fasciculele de fibre musculare;

o epimisium - esut conjunctiv dens, dispus la exterior, peste care se suprapune fascia sau aponevroza.

4

esutul muscular neted: Celulele musculare netede, seciune longitudinal:

au form de fus; un singur nucleu, situat central, form

de bastona; citoplasma acidofil omogen, fr

striaii transversale; particularitate structural: dispoziia

alternativ a nucleilor; diagnostic diferenial cu tendonul

(nuclei bigeminai la tendon).

Celulele musculare striate cardiace, seciune transversal:

arii acidofile, de form neregulat, de mrimi diferite, cu aspect punctat;

1 2 nuclei situai central, doar n ariile acidofile mari.

5

Celulele musculare netede, seciune transversal:

arii rotunde, acidofile, omogene, de mrimi diferite;

nucleu rotund, central, n ariile mari.

Lucrarea nr. 9 esutul nervos.

Coloraii: HE tricrom Masson impregnare argentic enolaza neuronal specific GFAP proteina S100

Preparate de examinat: Neuroni:

- unipolari - bipolari - multipolari

Astrocite protoplasmatice Oligodendrocit Microglia celula Schwann celule satelite

esutul nervos 1.Celulele sistemului nervos

1.1.Neuroni 1.2.Glii 1.3.Celule de susinere

2. Neuropil 3. Organizarea general

2.1. Substana cenuie 2.2. Substana alb

1. Celule sistemului nervos 1.1. Neuronii-celulele nervoase, prezint corp (pericarion) i

prelungiri neuronale (multiple-dendrite, unic-axon)

Criterii microscopice de recunoatere:

- corp de forme diferite: rotund-neuroni unipolari (1), fusiform, alungit - neuroni bipolari (2), piramidal (3) sau stelat (4) -neuroni multipolari, aspect piriform (neuroni Purkinje) (5)

- nucleu mare, veziculos, central, cu nucleol proeminent.

- prezena corpilor Nissl ca i formaiuni poligonale sau neregulate, bazofile n coloraia HE (stnga), metacromatic cu albastru de toluidin (dreapta) i violet intens n coloraia cu cresyl violet

- +/- pigment lipofuscinic - dendritele: prelungiri ramificate ale neuronului (HE-stnga,

impregnare argentic-dreapta)

- prelungirea unic, axonul, reprezint fibra nervoas i poate fi mielinizat sau nemielinizat.

Axon mielinizat seciune longitudinal: neurit (asterix), teaca de mielin (sgeat galben), celula Schwann (triunghi), nod Ranvier (sgeat albastr), coloraie HE

- Axon mielinizat seciune transversal

Neurit punctiform Halou clar Inel acidofil-Celula Schwann

- Evideniere teaca de mielin (longitudinal i transversal), tetraoxid de osmiu

1.2. Gliile :astrocite, oligodendrocit, microglie

Astrocite : corp mic, prelungiri numeroase, arborizate, n contact

direct cu vasele sanguine

Oligodendrocite, celule mici, cu prelungiri butonate, nucleu situat la

distan de axonul pe care-l mielinizeaz

Microglie. Corp alungit, procese gliale care pornesc din capetele efilate ale corpului celular, arborizaii scurte.

Impregnare del Rio Hortega

1.3. Celulele de susinere: celule Schwann, celule satelite

2. Neuropil

Poriune din substana cenuie, dispus ntre corpii neuronali, constituite din terminaii axonice, dendritice i procesele celulelor gliale.

Lucrarea nr. 10

Sistemul nervos central. Sistemul nervos periferic Coloraii: HE Tricrom Impregnare argentic NFAP tetraoxid de osmiu enolaza neuronal specific proteina S100

Preparate: Creier Cerebel Mduva spinrii Ganglion spinal Ganglion nervos autonom Nerv periferic seciune transversal Nerv periferic seciune longitudinal Terminaii nervoase libere receptori senzitivi: corpusculi Meissner, corpusculi Vater Pacini

1

Sistemul nervos central. Organizare general

Creier Cerebel Mduva spinrii nveliurile sistemului nervos central

Organele sistemului nervos central sunt organe pline, ncapsulate, organizate sub form de substan alb i substan cenuie

Substana alb are n structura sa: segmentul de conducere, mielinizat al axonilor neuronilor motori

celule gliale-oligodendroglii vase capilare Substana cenuie are n structura sa: corpul neuronilor dendritele i segmentul iniial al axonilor neuronilor motori toate componentele inerneuronilor celule gliale-astrocite vase sanguine La coloraia HE:acidofil datorit corpilor neuronali pe care i conine.

2

Creierul (Encefalul)

Este un organ plin, alctuit din: Capsul reprezentat de meninge. Substan cenuie situat la periferie-cortex cerebral. Substan alb situat central, care conine nucleii cerebrali (aglomerri de neuroni ce

ndeplinesc aceeai funcie) Cortexul cerebral este alctuit din 6 straturi, fr delimitare net ntre ele.

1.molecular: sub pia mater, conine fibre amielinice, neuroni orinzontali Cajal

2. granular extern: neuroni piramidali

mici, neuroni stelai 3. piramidal extern: neuroni piramidali

mici i mijlocii 4. granular intern: neuroni stelai mici 5. piramidal intern: este stratul marilor

neuroni piramidali (neuronul caracteristic

pentru creier), numii i celule Betz 6. stratul polimorf: interneuroni

Printre neuroni, n cele ase straturi, se gsesc i celule gliale.

3

Cerebelul

Este un organ plin alctuit din: Capsul reprezentat de meninge. Substana cenuie este situat la periferie-cortex cerebelos.

Substana alb este situat central; conine nucleii cerebeloi.

Cortexul cerebelos este format din 3

straturi, net delimitate unul de altul

1.stratul molecular: bogat n fibre

nervoase i srac n neuroni 2.stratul neuronilor Purkinje - neuronul

caracteristic pentru cerebel- ai cror pericarioni sunt dispui pe un singur rnd, dendritele se ramific n stratul molecular, iar axonul trece prin stratul granular n

substana alb 3.stratul neuronilor granulari: conine cei mai mici neuroni din organism

4

Mduva spinarii

Este un organ plin alctuit din: Capsula este reprezentat de meninge. Substana alb este situat la periferie, conine axoni mielinizai organizai in tracturi.

Substana cenuie este situat central, are form de fluture sau H ; prezint dou coarne anterioare n care se gsesc neuroni stelai multipolari (neuronul caracteristic pentru mduva spinrii), dou coarne posterioare i dou coarne laterale. n mijlocul substanei cenuii se gsete canalul ependimar, tapetat de celule

ependimare de form columnar dispuse pe un singur rnd.

Canalul ependimar este delimitat de

epiteliul ependimar.

Celulele ependimare sunt de form columnar cu dispoziie n palisad.

5

Sistem nervos periferic. Ganglion spinal

1. 2. 3.

Ganglion nervos autonom

6

Structur nencapsulat n peretele organelor cavitare i tubulare Neuroni multipolari Prelungiri dispuse n toate direciile Celule satelite rare, strat discontinuu n jurul

neuronilor multipolari

Organ plin, ncapsulat. Capsula de esut conjunctiv dens dezordonat Componenta nervoas: organizare zonal

1. Poriune periferic: corpi neuroni unipolari 2. Poriune central: fibre nervoase: alternant de structuri liniare, acidofile (neuriti) i

cromofobe (teaca de mielin) n HE 3. Celule satelite: strat continuu n jurul corpilor neuronali.

Criterii microscopice GANGLION NERVOS SPINAL GANGLION NERVOS AUTONOM

CAPSULA CONJUNCTIV DEFINIT

prezent absent TIP DE NEURONI unipolari multipolari

CORPI NEURONALI grupai la periferie fr o organizare ordonat, dispui printre fibrele musculare ale organelor tubulare i cavitare

PRELUNGIRI NEURONALE Distribuite grupat n centrul ganglionului

Organizare dezordonat, printre corpii neuronali

CELULE SATELITE Numeroase , n strat continuu n jurul corpilor neuronali globuloi

Rare, strat discontinuu n jurul corpilor neuronali multipolari

Nervul periferic a. Fibra nervoas(cadran galben) b. Nerv periferic(sgeat albastr)

3.1. Componentele conjunctive al nervului periferic

Neurit Celule Schwann +/-Teaca de mielin

Endonerv(1): esut conjunctiv lax n jurul fiecrei fibre nervoase Perinerv(2): esut conjunctiv dens ordonat de tip fibrolamelar care delimiteaz un fascicul

de fibre nervoase Epinerv(3):esut conjunctiv dens dezordonat bogat vascularizat

nveliuri conjunctive Fascicule de fibre nervoase

7

Nervul periferic-seciune transversal

Ob.4: fascicule (F) de fibre nervoase observate ca arii acidofile delimitate de perinerv (P) i solidarizate de epinerv(E)

Ob.x200.HE. Detaliu de la nivelul unui fascicul de fibre nervoase mielinice: structuri repetitive (fibre nervoase). Microscopic, fiecare fibr nervoas este

constituit dintr-o arie punctiform acidofil (neurit) nconjurat de un halou clar (teaca de mielin) i delimitat de un inel subire de asemenea acidofil

(membrana celulei Schwann).

Ob 40. Acid osmic.Evidenierea tecilor de mielin seionate transversal, ca structuri

inelare repetitive, de culoare neagr

8

Nerv periferic seciune longitudinal

Terminaii nervoase libere

Corpuscul Meissner

Terminaii nervoase libere din piele, impregnare argentic, ob.x 200. Structuri liniare de culoare neagr pe fond brun cu traiect

sinuos.

Aspect fibrilar, palid colorat cu metoda HE datorit dizolvrii mielinei; ntre tecile de mielin ale fibrelor nervoase vecine- celule Schwann (stnga). Teaca de mielin, seciune longitudinal,

evideniat cu acid osmic (dreapta)

9

Corpuscul Vater Pacini

Structur senzorial cu dou componente: conjunctiv dispus la periferie, acidofil, cu aspect spiralat(stnga) i component nervoas, evideniat prin impregnare argentic(dreapta).

Terminaii nervoase ncapsulate. esut conjunctiv fibrolamelar dispus concentric (HE, stnga, tricrom, dreapta), n jurul unei terminaii nervoase evideniat prin impregnare argentic n centrul structurii conjunctive cu aspect punctiform, culoare neagr (jos)

10

1

Lucrarea practic 11. Sngele. Efectuarea frotiului sangvin. Recunoaterea elementelor figurate sangvine. Formula leucocitar. Coloraii:

May Grnwald - Giemsa

2

SNGELE Definiie: Este o varietate de esut conjunctiv fluid, format din plasm i elemente figurate: eritrocite (hematii, globule roii), leucocite (globule albe) i trombocite (plachetele sanguine). Se studiaz pe frotiuri colorate cu diferite metode, cea mai utilizat fiind coloraia May-Grnwald Giemsa (MGG).

Tehnica executrii frotiului Principiu : o pictur de snge capilar se ntinde n strat subire pe o lam, aa nct elementele figurate s nu fie suprapuse. Etalarea frotiului se face cu o lam lefuit, cu colul rupt, pstrnd un unghi de nclinaie de 45 grade. Imediat dup ntindere, frotiul se usuc prin agitare cu scopul primei fixri i apoi se coloreaz.

Timpii tehnicii de colorare MGG: 1. Se prepar soluia de lucru Giemsa prin

diluarea a 3 picturi de colorant cu 2 cm de ap distilat.

2. Fixarea: se acoper frotiul cu 20-25 de picturi de soluie May- Gruenwald, se las 2 - 3 minute, timp n care are loc fixarea chimic.

3. Colorarea se face n 2 timpi: peste soluia M-G se adaug 20-25 de

picturi de ap tamponat, obinnd colorantul n stare nativ, care se las s acioneze 2 minute.

Amestecul colorant se ndeprteaz fr a spla lama, dup care aceasta se acoper cu soluia Giemsa diluat care se las s acioneze 25-30 minute.

4. Frotiul se spal cu un jet puternic de ap de robinet, se usuc i se examineaz la microscop, cu obiectiv imersie.

Rezultate: Frotiul corect colorat trebuie s aib culoarea roz-violet sau rou-violet. Nucleii apar colorai n violet de intensiti

variabile, n funcie de raportul ntre eucromatin/ heterocromatin.

Nucleolii sunt colorai n albastru deschis. Citoplasma : o acidofil se evideniaz n roz, rou sau

crmiziu, prin colorare cu eozin; o bazofil apare n nuane de albastru, , prin

colorare cu albastru de metilen; Granulaiile: o neutrofile sunt colorate n violet, cu eozinatul

de albastru de metilen (colorant neutru); o acidofile (eozinofile) apar n rou crmiziu; o bazofile sunt colorate n albastru, sau n

violet (metacromatic) cu albastru de metilen; o azurofile, se coloreaz n violet purpuriu cu

azur II, din compozitia colorantului Giemsa.

3

Criteriile de recunoatere ale elementelor figurate prezente pe frotiu:

ERITROCITELE (hematiile) Form: disc biconcav, (rotund pe frotiu); Diametru mediu de 7m, fiind considerate

etalon pentru estimarea dimensiunii celorlalte elemente figurate;

Sunt anucleate; Citoplasma lor este omogen i se

coloreaz n rou-crmiziu (cu eozin), datorit coninutului n hemoglobin;

Prezint o zon central, palid colorat care ocup 1/3 din diametru.

Numr: 4,5-5 milioane/mmla brbai 4-4,5 milioane/mmla femei

RETICULOCITELE Sunt hematii tinere, prezente n

circulaie n proporie de 0,5-1,5%. Prezint n citoplasm: ribozomi,

resturi de ARN, care se evideniaz cu albastru-briliant cresyl, sub forma unei reele de filamente i granule, colorate n albastru.

4

LEUCOCITELE (globulele albe) Se recunosc uor dup morfologia nucleului

i dup dimensiuni, diametru 10-21m, adic de 2 -3 ori mai mari dect hematiile,

Conin n citoplasm dou tipuri de granulaii: specifice i nespecifice.

Clasificarea leucocitelor se face dup prezena granulaiilor specifice, n: Granulocite: neutrofile, bazofile, eozinofile Agranulocite: monocite i limfocite

Numr: 4000-8000 /mm

o GRANULOCITUL NEUTROFIL Form sferic, (rotund pe frotiu), Mrime: de 2 ori ct o hematie, Nucleu segmentat format din 3-5 lobi unii

ntre ei prin filamente de cromatin, Citoplasm abundent, acidofil, care

conine 2 tipuri de granulaii: o neutrofile-specifice: violete, mici,

pulverulente, numeroase, o azurofile-nespecifice, reduse

numeric.

1-3% din granulocitele neutrofile pot prezenta nuclei nesegmentai: n form de potcoav (metamielocite) sau majuscul I, S, Z (stabkernige) i reprezint forme imature.

Legend: 1.granulocit neutrofil, 2. granulocit acidofil, 3. granulocit bazofil, 4. limfocit mic, 5, 6. monocite

5

GRANULOCITUL ACIDOFIL sau EOZINOFILUL Form sferic, (rotund pe frotiu), Mrime: de 2 ori ct o hematie, Nucleu format din 2 lobi unii ntre ei, Citoplasm: acidofil, care conine

granulaii specifice: acidofile, (eozinofile), mari, rotunde, egale ca form, mrime i distribuie n citoplasm.

GRANULOCITUL BAZOFIL Form sferic, (rotund pe frotiu), Mrime: de 2 ori ct o hematie, Nucleu indentat, nesegmentat, Citoplasm: acidofil care conine

numeroase granulaii specifice, bazofile: orto i metacromatice, inegale ca form, mrime i rspndire, care acoper nucleul i-l fac greu de examinat.

6

MONOCITUL Form sferic, ovalar sau neregulat, Mrime: este cel mai mare dintre

leucocite (15-21m), fiind de aproximativ de 3 ori mai mare dect o hematie,

Nucleul: excentric, are forme diferite (reniform, oval, trapezoid), iar cromatina este dispus n lamele sau blocuri mari,

Citoplasma bazofil este abundent, de culoare albastr-cenuie i conine poate conine granulaii azurofile (lizozomi).

LIMFOCITUL MIC Form sferic, (rotund pe frotiu), Mrime: ct o hematie, avnd un

diametru 6-8, Nucleu: mare, sferic, heterocromatic, Citoplasm: bazofil, redus cantitativ,

sub forma unui lizereu fin, perinuclear. Prin activare, se transform n limfocit mijlociu sau mare.

FORMULA LEUCOCITAR Reprezint raportarea procentual a leucocitelor,

obinut dup numrarea pe frotiu a cel puin 300 de leucocite consecutive;

Valori normale: Granulocite neutrofile segmentate 55-65% Granulocite neutrofile nesegmentate 1-3% Granulocite eozinofile 2-4% Granulocite bazofile 0-1% Limfocite 25-35% Monocite 5-8%

7

TROMBOCITELE Sunt fragmente citoplasmatice; Au form de disc lenticular, cu

o o zon periferic omogen, palid colorat, numit hialomer, care conine microtubuli i microfilamente,

o o zon central, ntunecat, numit granulomer, format din: lizozomi, peroxizomi, granule alfa, corpi deni i mitocondrii;

Nu au nucleu Numr: 150.000-300.000 /mm

Lucrare practic numrul 12 Hematopoeza. esutul mieloid. Mduva hematogen

Coloraii: May Grunwald Giemsa Hematoxilin eozin

1

Hematopoeza

Definiie: procesul de formare al elementelor figurate sanguine. La adult, toate elementele figurate sanguine se formeaz numai n mduva

hematogen. Metode de studiu: frotiul efectuat prin puncie aspirativ din stern sau creasta iliac. Medulograma reprezint raportarea procentual a precursorilor elementelor

figurate sanguine. Toate elementele figurate deriv din celula stem pluripotent. Hematopoeza la adult cuprinde: eritropoez, granulocitopoez, trombocitopoez,

limfocitopoez, plasmocitopoez, monocitopoez.

Eritropoeza

Reprezint formarea eritrocitelor, se desfoar n mduva hematogen Filiaie: stem uniti formatoare de colonii eritrocitare proeritroblast eritroblast bazofil

eritroblast policromatofil eritroblast acidofil reticulocit - eritrocit

Prima celul care se identific morfologic: proeritroblastul Caracterele morfologice ale seriei eritrocitare:

Unitatea formatoare de colonii eritrocitar nu se poate diferenia n microscopia optic de celulele stem.

Proeritroblastul Form rotund, ovalar Citoplasm bazofil, cu halou perinuclear cromofob Nucleul rotund eucromatic cu nucleoli distinci Raportul N/C este supraunitar Eritroblastul bazofil Form rotund Citoplasma intens bazofil, omogen Nucleu heterocromatic Raportul N/C este supraunitar

2

Eritroblastul policromatofil Form rotund Citoplasma cu zone de acidofilie i bazofilie Nuleu mic cu cromatina dispus n blocuri mari Raportul N/C este subunitar Eritroblastul acidofil Form rotund Citoplasm acidofil Nucleu mic, picnotic, uneori fragmentat Raportul N/C este supraunitar

Reticulocitul este o celul anucleat, rotund, citoplasma conine resturi de ARN, care se evideniaz cu albastru cresyl.

Eritrocitul (hematia) este elementul matur al seriei eritocitare.

Trombocitopoeza

Filiaie: stem uniti formatoare de colonii trombocitare - megacarioblast propriu-zis - megacatioblast bazofil - megacarioblast granular - megacariocit trombocitogen - megacarocit

netrombocitogen

Prima celul care se identific morfologic: megacarioblastul Caracterele morfologice ale seriei trombocitare:

Unitatea formatoare de colonii trombocitare nu se poate diferenia n microscopia optic de celulele stem.

Megakarioblastul propriu-zis este cea mai mic celul din serie, cu citoplasm bazofil, nucleu mare, ovalar, se divide prin amitoz.

Megakarioblastul bazofil are citoplasm bazofil, fr granulaii, iar nucleul este mare, polilobat.

3

Megakarioblast granular Dimensiuni mari Form rotund Citoplasm slab bazofil, cu granule azurofile concetrate perinuclear. Nucleu mare, cu contur neregulat

Megakariocit trombocitogen Citoplasm acidofil, numeroase

granulaii azurofile periferic Nucleu mare, lobulat, cromatin

dens, fr nucleol Prezint prelungiri citoplasmatice

care reprezint situsul de eliberare pentru trombocite

Megakariocitul netrombocitogen are citoplasm omogen acidofil, fr granulaii

azurofile.

Granulocitopoeza

Este procesul de formare al granulocitelor Filiaie: stem uniti formatoare de colonii granulocitare mieloblast promielocit

- mielocit (neutrofil, eozinofil, bazofil) - metamielocit (neutrofil, eozinofil) - granulocit nesegmentat

(neutrofil, eozinofil) - granulocit matur (neutrofil, eozinofil, bazofil)

Prima celul care se identific morfologic: mieloblastul Caracterele morfologice ale seriei granulocitare:

Unitatea formatoare de colonii granulocitar nu se poate diferenia n microscopia optic de celulele stem.

4

Mieloblastul Form rotund Citoplasm bazofil cu puine granulaii azurofile Nucleu mare eucromatic cu nucleoli

Promielocitul Form rotunda sau ovalar Citoplasm slab bazofil cu numeroase granulaii azurofile Nucleu mare eucromatic cu nucleoli Raportul N/C este supraunitar

Mielocitul Form rotund sau ovalar Citoplasm acidofil cu numeroase granulaii nedifereniate (azurofile) i difereniate (neutrofile, acidofile i bazofile) Nucleul este rotund sau ovalar heterocromatic Raportul N/C este egal cu unu

5

Mielocitul neutrofil Citoplasma este acidofil cu numeroase granulaii difereniate neutrofile.

Metamielocitul Form rotund sau ovalar Citoplasm acidofil cu granulaii difereniate neutrofile i acidofile Nucleul este nesegmentat, reniform sau n potcoav, heterocromatic Granulocitele nesegmentate Form rotund Citoplasm acidofil cu granulaii specifice neutrofile, eozinofile sau bazofile Nucleu n potcoav sau S, cu tendin la segmentare

Limfocitopoeza

Procesul de formare a limfocitelor Se desfoar n timus (limfocitul T) i mduva hematogen (limfocitul B) Filiaia: stem - uniti formatoare de colonii limfocitare - limfoblast - prolimfocit - limfocit Prima celul care se identific morfologic: limfoblastul Caracterele morfologice ale seriei limfocitare:

Unitatea formatoare de colonii limfocitar nu se poate diferenia n microscopia optic de celulele stem.

6

Limfoblastul Form rotund sau ovalar Citoplasm slab bazofil, omogen Nucleu rotund sau ovalar cu nucleoli

Prolimfocitul Form rotund Citoplasm bazofil cu granulaii azurofile Nucleu heterocromatic, cu un singur nucleol

Plasmocitopoeza

Se formeaz din limfocitul B sub influena limfocitului T helper Filiaie: limfocit B - plasmoblast - plasmocit

Caracterele morfologice ale seriei plasmocitare:

Plasmoblastul Form rotund sau ovalar Citoplasm bazofil Nucleul excentric cu cromatin

reticular i nucleoli

7

Monocitopoeza

Origine: celul progenitoare medular, comun cu cea pentru linia granulocitar Filiaie: stem - uniti formatoare de colonii monocitare monoblast promonocit - monocit Prima celul care se identific morfologic: monoblastul Caracterele morfologice ale seriei monocitare:

Unitatea formatoare de colonii monocitar nu se poate diferenia n microscopia optic de celulele stem.

Monoblastul Form rotund Citoplasma slab bazofil, cu puine granulaii azurofile Nucleu rorund, eucromatic cu nucleoli

Promonocit Talie mare Form rotund C itoplasm bazofil Nucleu cu aspect neregulat

esutul mieloid

Este format din celule aflate n diferite stadii de difereniere ale seriilor eritrocitare, leucocitare i trombocitare.

Are un aspect punctat, polimorf, policrom pe seciunile histologice. Conine megacariocite, celule marker pentru mduva hematogen.

8

Mduva hematogen Este singurul organ care produce toate elementele figurate n viaa postnatal. Se localizeaz n cavitile oaselor late i lungi. Histologic se descrie ca un organ plin care prezint un schelet de susinere i parenchim.

Megacariocitele Sunt celule mari Nucleul este nmugurit Citoplasm acidofil, granular, prin fragmentarea creia se formeaz

trombocitele

Scheletul de susinere: Capsul: endost, dublat de esut osos Trabeculi osoi acoperii de endost; nu delimiteaz lobi Strom: esut reticular Parenchimul: esut mieloid cu megacariocite, capilare sinusoide cu lumen larg; nu se organizeaz sub form de cortical i medular.

9

1

Lucrarea practic nr. 13 esutul limfoid. Forme de organizare

Organele limfopoetice. Timus. Splin. Ganglionii limfatici. Amigdalele. esutul limfoid asociat mucoaselor

Coloraii: HE

Tricrom Impregnare argentic Antigen comun leucocitar

2

esutul limfoid. Forme de organizare esutul limfoid este un esut conjunctiv specializat care formeaz parenchimul organelor

limfopoetice. Histologic se recunoate dup aspectul punctat monomorf, monocrom. Prezint trei forme de organizare: foliculii limfoizi, cordoanele limfoide, infiltrate limfoide difuze.

Foliculul limfoid Primar: mic, omogen, apare n perioada prenatal Secundar: mare, cu zon central mai palid colorat - centru germinativ - i zon

periferic (manta) mai intens colorat Format predominant din limfocite B Localizare: ganglioni limfatici, splin, amigdale, esut limfoid asociat mucoaselor

Cordonul limfoid Este format din limfocite dispuse n cordoane simple sau ramificate Format predominant din

limfocite T Localizare: zona medular a

ganglionului limfatic i tecile periarteriolare ale splinei

3

Organele limfopoetice: timus, splin, ganglionii limfatici, amigdalele, esut limfoid asociat mucoaselor

Planul general de organizare:

Sunt organe pline alctuite din schelet de susinere i parenchim. Scheletul de susinere este format din:

Capsul conjunctiv fibroas (ganglion, timus), conjunctivo-muscular (splin), conjunctivo-epitelial (amigdal)

Trabeculi conjunctivi cu excepia amigdalelor care prezint cripte Strom format din esut reticular, cu excepia timusului care are strom epitelial

Parenchimul este format din esut limfoid Timusul

Infiltratul limfoid difuz Este format din aglomerri

masive de limfocite, fr aranjament particular

Leag foliculii limfoizi ntre ei Conine limfocite B i T n

proporii aproximativ egale Localizare: esutul limfoid

asociat mucoaselor, jonciunea corticomedular a ganglionului limfatic, amigdal

Organ plin, lobulat Schelet de susinere Capsula: esut conjunctiv dens Tabeculi conjuctivi, delimiteaz lobi Strom epitelial Parenchim: infiltrate limfoide difuze

4

Splina

Lobulul timic Pentru fiecare lobul timic, parenchimul este organizat pe dou zone : Cortical, periferic, mai intens colorat datorit prezenei limfocitelor tinere Medular, central, mai palid colorat, datorit numrului mai redus de limfocite

Particularitate: prezena corpusculilor Hassall n zona medular a lobulului timic. Sunt formaiuni rotunde sau ovalare, de dimensiuni diferite, formai din celule epiteliale dispuse concentric.

Scheletul de susinere cuprinde : Capsula groas, conjunctivo-muscular, dublat pe faa extern de mezoteliu Trabeculi: conjunctivo-musculari; nu delimiteaz lobi Stroma: esut reticular Parenchimul este organizat sub form de pulp alb i pulp roie.

5

Ganglionul limfatic

Pulpa alb este format din esut limfoid organizat sub form de: foliculi limfoizi cu arteriol excentric- particularitate pentru splin cordoane limfoide periarteriolare

Pulpa roie este format din: cordoane splenice cu eritrocite,

macrofage, trombocite, limfocite, granulocite, plasmocite care dau aspectul puctat i pestri

sinusuri i capilare splenice care conin numeroase eritrocite n lumen

Scheletul de susinere: Capsula: esut conjunctiv dens dezordonat, dublat de esut adipos Trabeculi conjunctivi; delimiteaz lobi incomplei-loji ganglionare Stroma esut reticular Parenchimul este organizat pe 2 zone: cortical i medular

6

Particularitate: ganglionul limfatic conine toate cele trei forme de organizare ale esutului limfoid.

Amigdalele

Corticala ganglionului limfatic Localizat la periferie Conine foliculi limfoizi secundari

cu centru germinativ, sinusurile limfatice subcapsulare i interfoliculare

Medulara ganglionului limfatic Localizat central Conine cordoane limfoide, neregulate ramificate i anastomozate, separate de sinusurile limfatice medulare La jonciunea cortico-medular se gsete infiltrat limfoid difuz

Scheletul de susinere: Capsula epitelio-conjunctiv cu epiteliul stratificat scuamos nekeratinizat Criptele amigdaliene se formeaz prin invaginare n parenchim n profunzime prezint o pseudocapsul Nu prezint trabeculi conjunctivi Stroma: esut reticular

Parenchimul este format din: foliculi limfoizi cu centru germinativ, de dimensiuni diferite infiltrate limfoide difuze dispuse interfolicular

7

Particulariti: Amigdale palatine

sunt organe pereche capsula are epiteliu stratificat scuamos nekeratinizat prezint 20-25 cripte

Amigdale linguale multiple capsula are epiteliu stratificat scuamos nekeratinizat prezint o cript pentru fiecare amigdal

Amigdale faringiene capsula:epiteliu pseudostratificat la nazofaringe; epiteliu stratificat scuamos

nekeratinizat la orofaringe frecvent fr cripte

Amigdala faringian

8

esutul limfoid asociat mucoaselor

Localizare: tub digestiv (ileon terminal, colon, apendice), arborele bronic Componente:

Intraepitelial: limfocite izolate situate printre celulele epiteliale

Intraconjunctiv: foliculi limfoizi i infiltrate limfoide difuze

Strom reticular Nu au capsul

1

SISTEMUL CARDIOVASCULAR

Coloraii:

HE Orcein Imunohistochimic anticorp asociat FVIII

2

Componente:

Cord Sistem arterial Reeaua capilar Sistem venos Sistem limfatic

Structura general a vaselor sanguine:

1. Strat intern: intima (endoteliu, strat subendotelial, limitanta elastic intern)

2. Strat mijlociu: media (celule musculare netede, fibre elastice, fibre de reticulin, limitanta elastic extern)

3. Strat extern: adventicea(esut conjunctiv lax, vasa vasorum, fibre nervoase)

Excepie: vasele capilare

LEE

LEI

Artere Vene

Cord

Reeaua capilar

Sitemul limfatice

3

Cordul

Organ musculo-cavitar format din endocard, miocard, epicard Central: schelet fibros, valvule i sistem excitoconductor

Endoteliul: delimiteaz lumenul ntregului sistem cardiovascular Tip: simplu scuamos Celulele endoteliale conin Corpi Weibel-Palade (stocare von Willebrand) Markeri imunohistochimici: CD31, von Willebrand, CD34

Endocard: endoteliu, strat subendotelial cu trei zone:

Intern: (fibre elastice, reticulinice, substan fundamental)

mijlocie: conjunctivo-muscular

extern: esut conjunctiv lax, esut nodal

Miocard: esut muscular striat cardiac

Epicard:

foia visceral a pericardului, membran seroas

Extern:mezoteliu, cu membran bazal

esut conjunctiv lax, adipocite, vase sanguine, fibre nervoase, microganglioni nervoi

Cavitatea pericardic

4

Sistemul excitoconductor

Celule specializate incluse n esutul conjunctiv subendocardic

Tipuri celulare: P, T i Purkinje Bogate n glicogen Miofibrile situate la periferia

citoplasmei, nu sunt organizate n sarcomere

Capacitate de autostimulare

Valvulele: esut conjunctiv fibros central, acoperit de endoteliu

5

Tipuri de

Sistemul arterial

Criterii de recunoatere

lumen ngust comparativ cu grosimea peretelui

fr elemente figurate

nuclei proemineni de celule endoteliale

trei straturi distincte

media cu celule musculare

prezena limitantelor

Tipuri de vase arteriale

Dup diametru: artere mari, mijlocii, mici, arteriole

Dup elementele predominante din medie:

- artere elastice (aorta, a.pulmonare)

- artere musculare (a.renal, a.femural)

Artere specializate : coronare, cerebrale Artere de tranziie

6

Capilarele

Structur:

endoteliu spaiu subendotelial membrana bazal pericite

Clasificare:

capilare propriu-zise capilare fenestrate capilare sinusoide

Sistemul venos

Criterii de recunoatere

lumen larg comparativ cu grosimea peretelui

elemente figurate i/sau plasm n lumen

nuclei turtii de celule endoteliale

medie subire adventice groas

7

Tipuri de vene

Venule postcapilare: lumen mai larg dect capilarele, endoteliu cu nuclei alungii, distanai, pericite

Vene mijlocii:

Fibroase: sinusurile durei mater, vene cerebrale

Elastice: oftalmice Musculare:

- cefalic, venele profunde ale membrelor superioare- un strat de fibre musculare;

- venele renale, spermatice, dou straturi;

- profunde ale membrelor inferioare- trei straturi.

Vene mari: cav inferioar i superioar

Sistemul limfatic

Capilare limfatice

lumen larg, neregulat; fr elemente figurate n lumen; perete discontinuu, fr pericite ; endoteliu D2-40 pozitiv

Trunchiurile limfatice mici i mijlocii

intima: endoteliu de tip limfatic, strat subendotelial

media: fibroas la cele mijlocii adventice

Ductele limfatice mari: elemente musculare n medie

D2-40/MCT, vase limfatice D2-40

pozitive

1

Sistemul respirator

Coloraii

HE Tricrom Impregnare argentic Orcein

\

2

Sistemul respirator

Este format din organe cu rol n transportul i schimburile de gaze respiratorii: Poriune conductoare:

cavitile nazale, nazofaringele, laringele, traheea, bronhiile i bronhiolele Poriune respiratorie:

reeaua terminal a arborelui bronic i alveolele pulmonare

Epiteliul de tip respirator Pseudostratificat ciliat MB groas apte tipuri celulare:

o Ciliate o Caliciforme o Cu microvili o Seroase o Bazale o Intermediare-imature o Neuroendocrine

Cavitile nazale Versant extern: piele Versant intern: vestibul, arie respiratorie, arie olfactiv Vestibul:

o Epiteliu stratificat scuamos nekeratinizat o Lamina propria: esut conjunctiv dens dezordonat o Foliculi piloi, glande sebacee, sudoripare i mucoase

Aria respiratorie: o Epiteliu pseudostratificat ciliat, tip respirator, membran bazal groas o Lamina propria: esut conjunctiv dens dezordonat

Aria respiratorie

3

Traheea Organ tubular cu 4 straturi: Mucoasa:

o Epiteliu de tip respirator o Membran bazal groas o Lamina propria: esut conjunctiv lax,

glande seromucoase i vase sanguine Submucoasa

o esut conjunctiv dens dezordonat o Fibre elastice (lipsesc n mucoas)

Strat fibro-cartilaginos: inele incomplete de cartilaj hialin unite posterior prin esut muscular neted - muchiul traheal

Adventicea: esut conjunctiv lax

Plmnii Sunt organe pline formate din parenchim i schelet de susinere. Criterii de recunoatere:

Capsula: foia visceral a pleurei Stroma: bogat n fibre elastice i fibre de reticulin, macrofage pulmonare, mastocite,

fibroblaste, puine fibre de colagen Parenchimul: format numeroase caviti neregulate cu aspect dantelat - prezena alveolelor pulmonare, sacilor alveolari, bronhiilor intrapulmonare

4

Arborele bronic

Traheea se divide n bronhii primare, care mpreun cu vasele sanguine, limfatice i esutul conjunctiv formeaz hilurile pulmonare.

Prin ramificarea bronhiilor primare se formeaz bronhiile secundare sau lobare, iar din acestea se formeaz bronhiolele

Fiecare bronhiol intr ntr-un lobul pulmonar, se ramific i formeaz bronhiolele terminale, care reprezint ultima poriune a ramificaiilor bronice

Bronhiolele terminale se continu cu una sau mai multe bronhiole respiratorii care marcheaz nceputul poriunii respiratorii

Bronhiile au pretele format din 5 straturi: mucoas, muscular, submucoas, strat

cartilaginos i adventice. Pe msur ce bonhiile se divid structura peretelui se simplific gradat.

5

Structur histologic Mucoasa

o Epiteliu pseudostratificat de tip respirator la bronhiile mari, devine simplu columnar neciliat i apoi cubic la bronhiole

o Membran bazal o Lamina propria: esut conjuctiv lax

Musculara: esut muscular neted Submucoasa

o esut conjunctiv lax o Glande seromucoase, esut limfoid se reduc numeric odat cu reducerea

diametrului bronhiilor Stratul cartilaginos

o Cartilaj hialin: inele complete la bronhiile mari, discontinui la mijlocii i mici, absent la bronhiole

Adventicea o esut conjunctiv lax cu vase i nervi, comun cu vaselor din vecintate

6

Bronhiolele Segmente intralobulare Diametru

7

Celulele Clara Numeroase la bronhiole Columnare, apex rotunjit Nucleu ovalar, citoplasm

acidofil

Suprafaa respiratorie Bronhiola respiratorie:

o epiteliu simplu cuboidal cu perete ntrerupt de cte o alveol Ductele alveolare:

o epiteliu simplu scuamos Sacii alveolari:

o formaiuni cavitare formai din mai multe alveole Alveolele pulmonare:

o formaiuni cavitare delimitate de epiteliul alveolar

8

Epiteliul alveolar Celule alveolare (pneumocite) de tip I:

o acoper 95% din suprafaa respiratorie o realizeaz schimburile gazoase o nucleu heterocromatic, aplatizat, citoplasm subire (epiteliu simplu scuamos)

Celule alveolare (pneumocite) de tip II: o acoper 5% din suprafaa respiratorie o secret componente ale surfactantului o mari, poligonale, nucleu eucromatic, rotund, situat central, citoplasm

acidofil

Celul alveolar tip 2

Alveole pulmonare

9

Septele interalveolare (interstiiul pulmonar) Reprezint esutul dintre dou ceule epiteliale alveolare. Conine:

Fibre elastice Fibre de reticulin Capilare sanguine Fibroblaste Macrofage pulmonare Mastocite

Pleura Structur epitelio-conjunctiv, membran seroas Foie: visceral i parietal cavitatea pleural Organizare: Mezoteliu: epiteliu simplu scuamos sau cuboidal, celule cu microvili Membran bazal Strat subpleural: fibroblaste, fibrocite, fibre de colagen, fibre elastice; se continu cu stroma pulmonar

1

SISTEMUL URINAR Rinichiul

o organ pereche, situat retroperitoneal o macroscopic: dou poriuni distincte:

o extern cortical o intern medular.

o la om, o medulara: piramide renale, structuri

triunghiulare cu vrful la hil i baza spre capsul.

o corticala: striaii medulare formaiuni cu dispoziie radiar, desprinse din baza piramidelor renale.

Structura histologic

o organ plin, format din capsul, strom i parenchim.

o Capsula: o esut conjunctiv dens, o cu numeroase fibroblaste, fibre de

colagen i miofibroblaste; o nu trimite trabeculi n parenchim.

o Stroma renal (interstiiu renal): o este mai bine reprezentat n

medular o mai slab reprezentat n cortical. o alctuit din esut conjunctiv cu fibre

subiri de colagen i reticulin, fibroblaste i miofibroblaste.

o Parenchimul: o cuprinde corticala i medulara; o este alctuit din nefroni (unittile

morfo-funcionale ale rinichiului). o diagnostic de organ: prezena

corpusculilor renali la nivelul corticalei.

Nefronul: este alctuit din: o corpuscul renal o sistemul tubular cu trei componente:

o tub proximal, o segment intermediar o tub distal.

Tubii colectori: nu fac parte din structura nefronului, dar alctuiesc mpreun cu acesta tubul urinifer.

2

Corticala renal: o corpusculi renali; o tubi contori proximali; o tubi contori distali; o tubi conectori; o tubi colectori corticali;

Corpusculul renal: o pol vascular i pol urinar; o glomerul renal:

o ghem de capilare fenestrate o mezangiu:

celule mezangiale matrice mezangial.

o apare pe preparat ca o mas acidofil cu aproximativ 100 de nuclei pe seciune:

nuclei n bastona aparinnd celulelor endoteliale,

nuclei rotunzi intens cromatici aparinnd celulelor mezangiale i

nuclei mari, eucromatici dispui nspre spaiul de filtrare, care aparin podocitelor.

o capsula Bowmann: o foia visceral:

ader la ghemul de capilare fiind tapetat de podocite, celule mari, globuloase.

o foia parietal: epiteliu simplu scuamos.

ntre cele dou foie: spaiul de Tubul contort proximal:

o continu corpusculul renal; o tapetat de epiteliu simplu:

o nuclei dispui la distane inegale; o celulele epiteliale: nefrocite:

dispuse pe un rnd pe membrana bazal;

la polul apical: microvili muli i egali (marginea n perie);

lumen mic. la polul apical: fosfataza

alcalin (tehnici

3

Medulara renal: o tubii drepi proximali:

o asemntori tubilor contori proximali;

o lumen mai larg;

Tubul contort distal: o epiteliu simplu cubic,

o nefrocitele prezint microvili puini, o lumen larg, o nuclei la distane egale; o Macula densa:

o structur specializat n apropierea corpuscului renal;

o celule nalte, nuclei n palisad.

o segmentul intermediar: o epiteliu simplu scuamos; o 3 4 nuclei pe seciune transversal; o puin citoplasm; o diagnosticul diferenial: capilare (1

2 nuclei pe seciune).

o tubii drepi distali: o asemntori tubilor contori distali; o epiteliu simplu cubic; o lumen larg;

o tubii colectori medulari: o epiteliu simplu cubic; o celule clare i celule ntunecate;

4

Ureterul: o organ cavitar; o 3 tunici:

o mucoas: uroteliu; lamina propria: esut

conjunctiv lax; o muscular: celule musculare netede:

strat intern: circular; strat extern: longitudinal.

o tunica extern: adventice/seroas.

Vezica urinar: o organ cavitar; o 4 tunici:

o mucoas: uroteliu: epiteliu

pseudostratificat; lamina propria: esut

conjunctiv lax, musculara mucoasei;

o submucoas: esut conjuctiv dens

dezordonat, o muscular:

esut muscular neted dispus plexiform;

o tunic extern: adventice/seroas.

Tubii papilari: o rezult prin confluarea tubilor colectori, o tapetai de epiteliu simplu columnar; o se deschid n calice, iar acestea n bazinet.

1

Cavitate bucal: mucoasa oral, buzele, limba, glandele salivare majore, organul dentar

Coloraii:

HE Tricrom Impregnare argentic Citokeratin

2

Cavitatea bucal Este segmentul iniial al tubului digestiv Conine dinii i limba Este tapetat de mucoasa oral

Mucoasa oral

Prezint variaii regionale: Mucoasa oral de acoperire: buze, obraji, faa ventral a limbii Mucoasa oral de tip masticator: gingie, palatul dur Mucoasa oral de tip specializat: faa dorsal a limbii

Mucoasa oral-structura histologic: Epiteliu stratificat scuamos

o nekeratinizat la mucoasa oral de acoperire o keratinizat/parakeratinizat la mucoasa oral de tip masticator

Membrana bazal Lamina propria (corionul mucoasei): esut conjuctiv lax, vase, terminaii nervoase,

corpusculi senzitivi, microganglioni, glande salivare minore Submucoasa oral: este prezent n zonele cu mucoas oral de acoperire; esut conjunctiv dens

Buzele Versant extern - cutanat

o epiderm: epiteliu stratificat scuamos keratinizat o derm: esut conjunctiv cu foliculi piloi, glande sebacee, glande sudoripare,

corpusculi senzitivi Meissner Versant intern - mucos (mucoasa oral de acoperire)

o epiteliu stratificat scuamos nekeratinizat o lamina propria: glande salivare minore de tip seros i mucos (glande labiale)

3

Legend A-roul buzelor,

B-epiteliu stratificat scuamos nekeratinizat, C- muchiul orbicular al buzelor

Axul buzelor: Fibre musculare striate-muchiul orbicular esut conjunctiv Fibre nervoase Vase sanguine Glande salivare minore

zona de trecere de la mucoasa labial la tegument roul buzelor (vermilion)

epiteliul este foarte subire n aceast zon

vascularizaia este bogat

4

Limba Organ musculo-conjunctiv Faa ventral: mucoasa oral de

acoperire Faa dorsal: mucoasa oral

specializat o papile linguale o muguri gustativi

Axul limbii: fibre musculare striate viscerale dispuse perpendicular

Axul limbii: Fibre musculare striate viscerale esut conjunctiv lax, dens Glande salivare minore Vase sanguine, fibre nervoase, microganglioni esut limfoid-amigdala lingual

5

Papilele circumvalate proeminene turtite nconjurate

de un an adnc (vallum) n numr de 7-12, formeaz

V-ul lingual conin muguri gustativi pe

marginile anului n an se deschid glandele

seroase Ebner

Mugurii gustativi Se gsesc n papilele linguale excepie papilele filiforme Formaiuni ovalare, palid

colorate Ocup toat grosimea

epiteliului La polul apical: porul gustativ Dou componente: epitelial i

nervoas

Papilele linguale Papile filiforme: conice, subiri, pe toat suprafaa limbii, ax conjunctiv subire, epiteliu stratificat scuamos keratinizat, fr muguri gustativi Papilele fungiforme: printre papilele filiforme, ax conjunctiv bogat, epiteliu stratificat scuamos nekeratinizat, conin muguri gustativi Papilele foliate: reduse numeric la om, prezente pe marginile limbii, conin muguri gustativi

6

Componenta epitelial: celule gustative: fuziforme, dispuse central, nucleu eucromatic, la polul apical

microvili celule de susinere: fuziforme, dispuse periferic, nucleu heterocromatic celule bazale (stem): mici, rotunde/poligonale, asezate pe membrana bazal Componenta nervoas: Fibre nervoase ce ajung la celulele senzoriale, provin din nervii cranieni VII, IX i X Formeaz plexuri: perigemale, intragemale

Glandele salivare majore Schelet de susinere

Capsula: conjunctivo-fibroas Trabeculi: conjunctivi, delimiteaz lobi Stroma: esut conjunctiv lax cu fibre de reticulin, fibre nervoase,

microganglioni, esut limfoid Parenchimul

Poriune secretorie: acini Poriune excretorie: sistem de ducte

7

La om toate glandele salivare majore sunt mixte, dar n funcie de unitile

secretorii care predomin, sunt clasificate ca seroase, mucoase i mixte.

Acini seroi Form rotund, lumen ngust,

punctiform Celule seroase piramidale cu

granulaii acidofile, nuclei rotunzi Predomin n parotid

Acini mucoi Form ovalar, lumen larg,

neregulat Celule mucoase poligonale,

nuclei turtii la polul bazal Predomin n sublingual

Acini micti Forma ovalar, dimensiuni mari Component mucoas central Componenet seroas periferic n

form de semilun

8

Caractere particulare ale glandelor salivare majore

Celulele mioepiteliale localizate la nivelul acinilor, ductelor intercalate i striate ntre plasmalema celulelor epiteliale i membrana bazal pe care se dispun acestea se observ cu dificultate pe seciunile colorate de rutin markerul cel mai util este actina de tip muchi neted

Sistemul de ducte: Intralobulare

o Intercalate: epiteliu simplu cubic o Striate: epiteliu simplu columnar

Interlobulare: epiteliu pseudostratificat/stratificat Principale (colectoare): epiteliu stratificat

Parotida Cea mai mare, pereche Predominant seroas Ducte intercalate lungi Secreie apoas Parotina: menine troficitatea

smalului dentar Produsul de secreie: ductul Stenon,

n cavitatea bucal

9

Stuctura histologic a dintelui difereniat

Dintele mpreun cu esuturile nconjuratoare alctuiesc o unitate morfofuncional - organul dentar.

Din punct de vedere histologic prezint: esuturi proprii:

Pulpa dentar, dentina, smalul esuturi de susinere:

Cementul, ligamentul periodontal, gingia, osul alveolar

Submandibulara Gland pereche Predominant mixt, bogat n esut limfoid Ducte intercalate de dimensiuni medii Ductul principal: Wharton, orificii n vecintatea frenului lingual

Sublinguala Multipl Predominant mucoas Parenchim

o Acini mucoi, rar micti o Ducte intercalate foarte scurte

Duct principal o Unic: Bartholin o Multiplu: Rivinius

Ductul principal: Wharton

10

Pulpa dentar Ocup camera pulpar esut conjunctiv lax specializat Odontoblastele:

se dispun pe 1-2 rnduri la periferia pulpei; form columnar, citoplasma slab bazofil

la polul apical are o prelungire - proces odontoblastic (fibra Tomes) i este inclus n canaliculii dentinari

Dentina Se observ n jurul pulpei dentare; acoperit

la nivelul coroanei de smal, iar la rdcin de cement

Prezint 2 componente: canaliculi dentinari: structuri tubulare

dispuse paralel; necolorai la coloraie uzual; pe seciuni axiale dau aspect striat dentinei

matrice dentinar: fibre de colagen Predentina-stratul dentinoid circumpulpar,

mai palid colorat Smalul Este cea mai dur structur din organism, de

culoare alb 99% cristale de hidroxiapatit i 1% matrice

organic produs de ameloblaste Unitile morfo-funcionale: prismele de

smal care sunt unite prin substana interprimatic

!! Se evideniaz pe preparate de dinte uscat i lefuit

Gingia este mucoas oral de tip masticator, ader intim

de coletul dintelui prezint 2 versante:

o intern: epiteliul stratificat scuamos nekeratinizat, subire i lipsit de papile

o extern: epiteliul stratificat scuamos parakeratinizat, gros i cu numeroase papile voluminoase

lamina propria: esut conjunctiv dens, n vecintatea coletului dentar infiltrate limfocitare

Smal

Odontoblaste

11

Cementul o acoper dentina la nivelul rdcinii o are structur asemntoare osului, dar sistemele

haversiene lipsesc o dou tipuri de cement:

o acelular adiacent dentinei o celular cu cementoblaste i cementocite

incluse n lacune Ligamentul periodontal menine n poziie dintele funcional, ntre

cement i osul alveolar structur histologic:

o esut conjunctiv dens ordonat, bogat vascularizat i inervat, fibre de colagen numeroase, fibre oxitalanice

Osul alveolar Osul alveolar este n contact cu ligamentul

periodontal fiind un os imatur Conine rdcina dintelui, vasele i nervii Structur histologic:

o Extern: esut osos compact haversian o Intern: esut osos spongios

Ligament periodontal

Cement

1

SISTEMUL DIGESTIV Plan general de organizare Orofaringele

Peretele este format din 4 tunici care se suprapun: Mucoasa - format din trei componente:

Epiteliu care poate fi de mai multe tipuri. Lamina propria: esut conjunctiv lax bogat vascularizat i inervat; Musculara mucoasei: subire, format din esut muscular neted.

Submucoasa: esut conjunctiv dens dezordonat, cu vase i cu plexul submucos Meissner. Poate conine glande sau esut limfoid.

Musculara: esut muscular neted, strat intern: circular, strat extern: longitudinal,

cu excepia faringelui, 1/3 superioare a esofagului i a canalului anal; ntre straturile musculare: elementele plexului mienteric Auerbach,

Tunica extern: adventice sau seroas.

Organ cavitar cu peretele format din 3 tunici suprapuse: Mucoasa:

epiteliu stratificat scuamos nekeratinizat lamina p