Metode moderne de identificare şi monitorizare a calităţilor biotehnologice ale drojdiilor de vin Saccharomyces bayanus izolate din struguri şi

suşe autohtone

dr. Enikő GAŞPAR Izolare tulpini de Saccharomyces bayanus din zone viticole autohtone.

Caracterizarea tulpinilor de Saccharomyces bayanus.

Identificarea proprietăţilor biotehnologice.

Selectarea tulpinilor cu proprietăţi biotehnologice superioare.

Tutore:Prof.univ.dr. Letiţia OPREAN

Caracterizarea fizico-chimică şi microbiologică a drojdiilor de vin izolate

din areale vinicole consacrate

Podgoria Sebeş- Apold Centrul viticol Apold

Struguri Iordana

Saccharomyces bayanus

Podgoria TârnavelorCentrul viticol Blaj

Struguri Riesling italian

Saccharomyces bayanus

Podgoria TârnavelorCentrul viticol Jidvei

Struguri Feteasca regala

Saccharomyces bayanus

EC118

SBIA

SBRI SBFR

Izolarea ADN-lui s-a realizat din culturi de Saccharomyces bayanus incubate 24 de ore.

Amplificarea secvenţei 5.8S AND ribosomal şi secvenţelor ITS s-a realizat cu primerii ITS4 si ITS5 având următoarele secvenţe:

Primer Secvenţă

ITS 4 5’ TCCTCCGCCTTATTATTGATATGC 3’

ITS5 5’ AGTAAAAGTCGTAACAAGG 3’

Enzimă Secvenţa de clivareAluI 5'...AG▼CT...3'

3'...TC▼GA...5'TaqI 5’...T▼CGA...3’

...AGC▼T...5’

Analiza RFLP (analiza polimorfismul )ADN-ul amplificat se digeră cu două enzime de restricţie – Alu I (Arthrobacter luteus), şi Taq I (Thermophylus aquaticus). Enzimele de restricţie folosite pentru analiza RFLP

Cele 4 tulpini de drojdii s-au dovedit a fii identice pe baza analizei secventei ITS cu 2 enzime de restrictie (AluI si TaqI).

Culturile de drojdii au fost supuse urmatoarelor determinari fizico-chimice: Culturile de drojdii au fost supuse urmatoarelor determinari fizico-chimice:

Extracţia lipidelor

Determinarea cenuşii

Determinarea substanţelor volatile

Determinarea umidităţii

Determinarea proteinei brute

Din punct de vedere microbiologic drojdiile prezintă diferite caracteristici şi anume: • viabilitate,

• puterea alcooligenă,

• capacitate de fermentare,

• osmotoleranţă,

• sulfitorezistenţă,

• termotoleranţă,

• caracter Killer.

CONCLUZIICONCLUZII

Testele au demonstrat că tulpinile izolate fac parte din genul Saccharomyces specia Saccharomyces bayanus.

Determinările fizico-chimice au scos în evidenţă însuşirile specifice ale acestei specii comparativ cu proba martor Saccharomyces bayanus.

Testele biologice şi tehnologice au confirmat rezultatele moleculare.

VVĂĂ MUL MULŢŢUMESC!UMESC!