Curs Cocobacili Gram Negativi

99
Cocobacili gram Cocobacili gram negativi negativi Haemophilus Haemophilus , grupul HACEK, , grupul HACEK, specii specii Bordetella Bordetella , , Legionella Legionella , , Brucella Brucella , , Francisella tularensis Francisella tularensis . .

description

microbi

Transcript of Curs Cocobacili Gram Negativi

Page 1: Curs Cocobacili Gram Negativi

Cocobacili gram Cocobacili gram negativinegativi

HaemophilusHaemophilus, grupul HACEK, , grupul HACEK, specii specii BordetellaBordetella, , LegionellaLegionella, , BrucellaBrucella, ,

Francisella tularensisFrancisella tularensis. .

Page 2: Curs Cocobacili Gram Negativi

Genul Genul HaemophilusHaemophilus

Page 3: Curs Cocobacili Gram Negativi

Caractere generaleCaractere generale

• cocobacili gram-negativi, frecvent polimorfi;cocobacili gram-negativi, frecvent polimorfi;

• imobili;imobili;

• dependenţi în cultivare de factorul de creştere dependenţi în cultivare de factorul de creştere X X (hemina)(hemina) şi/sau V şi/sau V (nicotinamid-dinucleotid) (nicotinamid-dinucleotid)

prezenţi în hematii;prezenţi în hematii;

• favorizaţi sau dependenţi de prezenţa COfavorizaţi sau dependenţi de prezenţa CO22;;

• include specii prezente la om şi animale, cu include specii prezente la om şi animale, cu specificitate de gazdă;specificitate de gazdă;

• H.influenzaeH.influenzae este specia de interes medical este specia de interes medical majormajor;;

• alte specii întâlnite la om: alte specii întâlnite la om: H.parainfluenzaeH.parainfluenzae, ,

H.aphrophilusH.aphrophilus, , H.paraphrophilusH.paraphrophilus, , H.haemolyticusH.haemolyticus, etc, etc.,., izolate mai rar din izolate mai rar din infecţii oportuniste.infecţii oportuniste.

Page 4: Curs Cocobacili Gram Negativi

Haemophilus influenzaeHaemophilus influenzaeCaractere morfo-tinctorialeCaractere morfo-tinctoriale

• bacili pleomorfi: cocobacili sau cu aspect filamentos;bacili pleomorfi: cocobacili sau cu aspect filamentos;

• capsula, prezentă la tulpini invazive, poate fi pusă în capsula, prezentă la tulpini invazive, poate fi pusă în evidenţă microscopic prin metode imunologice evidenţă microscopic prin metode imunologice (reacţia de umflare a capsulei sau IF).(reacţia de umflare a capsulei sau IF).

Caractere de culivareCaractere de culivare• dependent de prezenţa în mediu a factorilor X şi V;dependent de prezenţa în mediu a factorilor X şi V;

• cultivă pe geloză şocolat, în atmosferă umedă cu cultivă pe geloză şocolat, în atmosferă umedă cu COCO22;;

• cultivă pe geloză sânge de berbec numai în cultivă pe geloză sânge de berbec numai în vecinătatea coloniilor de vecinătatea coloniilor de S.aureusS.aureus care sintetizează care sintetizează factorul V (fenomen de satelitism);factorul V (fenomen de satelitism);

• catalază şi oxidază pozitiv;catalază şi oxidază pozitiv;

• unele caractere biochimice permit diferenţierea de unele caractere biochimice permit diferenţierea de alte specii şi în cadrul acestei specii a 8 biotipuri.alte specii şi în cadrul acestei specii a 8 biotipuri.

Page 5: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 6: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 7: Curs Cocobacili Gram Negativi

Rezistenţa în mediul externRezistenţa în mediul extern• defavorabil influenţat de defavorabil influenţat de

- desicaţie;desicaţie;

- temperaturi scăzute;temperaturi scăzute;

• distrus dedistrus de- antiseptice şi dezinfectante uzuale.antiseptice şi dezinfectante uzuale.

ATENTIE! Izolarea este strATENTIE! Izolarea este strictict dependentă dependentă de asigurarea viabilităţii în timpul de asigurarea viabilităţii în timpul transportului (cât mai scurt posibil; transportului (cât mai scurt posibil;

ideal: însămânţarea imediat)ideal: însămânţarea imediat)

Page 8: Curs Cocobacili Gram Negativi

Factori de patogenitateFactori de patogenitate

• capsulacapsula polizaharidică care diferenţiază specia în polizaharidică care diferenţiază specia în 6 serotipuri (a-f) are proprietăţi antifagocitare;6 serotipuri (a-f) are proprietăţi antifagocitare;

• fimbriifimbrii cu rol în ataşarea bacteriilor la receptorii cu rol în ataşarea bacteriilor la receptorii celulari;celulari;

• adezine non-fimbrialeadezine non-fimbriale;;

• proteine de legare a transferineiproteine de legare a transferinei intervin în intervin în obţinerea Fe;obţinerea Fe;

• LOSLOS are efect ciliostatic şi ciliolitic la nivelul are efect ciliostatic şi ciliolitic la nivelul mucoasei căilor respiratorii, în plus de stimulează mucoasei căilor respiratorii, în plus de stimulează procesul inflamator;procesul inflamator;

• IgA1-proteazaIgA1-proteaza interferează cu răspunsul imun interferează cu răspunsul imun local.local.

Page 9: Curs Cocobacili Gram Negativi

Habitat naturalHabitat natural

• omul este singura gazdă naturală;omul este singura gazdă naturală;

• tulpinile necapsulate colonizează frecvent tulpinile necapsulate colonizează frecvent mucoasa oro- şi nazo-faringiană, rar mucoasa oro- şi nazo-faringiană, rar mucoasa vaginală sau uretrală;mucoasa vaginală sau uretrală;

• portajul tulpinilor invazive (Hib) este portajul tulpinilor invazive (Hib) este redus.redus.

Page 10: Curs Cocobacili Gram Negativi

Tipuri de infecţiiTipuri de infecţii

(i(i) infecţii oportuniste) infecţii oportuniste• sunt de origine endogenă;sunt de origine endogenă;

• evoluează la nivelul tractusului respirator evoluează la nivelul tractusului respirator superior (otite medii, sinuzite) sau inferior superior (otite medii, sinuzite) sau inferior (bronşite cronice acutizate, pneumonii);(bronşite cronice acutizate, pneumonii);

• determinate în special de tulpini determinate în special de tulpini necapsulte;necapsulte;

• favorizate de viroze respiratorii, boli favorizate de viroze respiratorii, boli cronice respiratorii;cronice respiratorii;

• alte infecţii localizate (rare): conjunctivite, alte infecţii localizate (rare): conjunctivite, infecţii urinare;infecţii urinare;

Page 11: Curs Cocobacili Gram Negativi

Tipuri de infecţiiTipuri de infecţii

(ii)(ii) infecţii invaziveinfecţii invazive• meningite purulente (cele mai frecvente), meningite purulente (cele mai frecvente),

artrite septice, epiglotite, celulite, artrite septice, epiglotite, celulite, pericardite;pericardite;

• determinate în special de serotipul Hib;determinate în special de serotipul Hib;

• evoluează la copii evoluează la copii << 5 ani, în absenţa Ac 5 ani, în absenţa Ac specifici.specifici.

Page 12: Curs Cocobacili Gram Negativi

ImunitateImunitate

• Ac specifici anti – Hib prezenţiAc specifici anti – Hib prezenţi

- după vârsta de 5 ani, consecutiv infecţiilor după vârsta de 5 ani, consecutiv infecţiilor naturale cu Hib sau cu bacterii Ag înrudite;naturale cu Hib sau cu bacterii Ag înrudite;

- după vaccinare;după vaccinare;

- în primele 2 luni de viaţă, prin transfer de în primele 2 luni de viaţă, prin transfer de la mamă;la mamă;

• Ac faţă de proteine din membrana externă Ac faţă de proteine din membrana externă (P1, P2).(P1, P2).

Page 13: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 14: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 15: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 16: Curs Cocobacili Gram Negativi

Principii de terapie etiotropă Principii de terapie etiotropă • sensibil natural la aminopeniciline, sensibil natural la aminopeniciline,

cefalosporine din generaţia 2 şi 3, cefalosporine din generaţia 2 şi 3, carbapeneme, fluorochinolone, cloramfenicol, carbapeneme, fluorochinolone, cloramfenicol, tetracicline, cotrimoxazol, rifampicină; tetracicline, cotrimoxazol, rifampicină;

• rezistenţă câstigată la peniciline prinrezistenţă câstigată la peniciline prin::- producere de beta-lactamază, inactivată de acidproducere de beta-lactamază, inactivată de acid

clavulanic;clavulanic;

- modificarea PLP (rar);modificarea PLP (rar);

• ceftriaxona sau cefotaxim sunt folosite în ceftriaxona sau cefotaxim sunt folosite în tratamentul infecţiilor invazive;tratamentul infecţiilor invazive;

• în infecţii la nivelul tractusului respirator se în infecţii la nivelul tractusului respirator se folosesc aminopeniciline iar pentru tulpinile cu folosesc aminopeniciline iar pentru tulpinile cu rezistenţă enzimatică pot fi utilizate rezistenţă enzimatică pot fi utilizate aminopeniciline aminopeniciline + + inhibitor de beta-lactamază, inhibitor de beta-lactamază, cefalosporine orale din generaţia 2 sau 3 sau cefalosporine orale din generaţia 2 sau 3 sau fluorochinolone.fluorochinolone.

Page 17: Curs Cocobacili Gram Negativi

Măsuri profilacticeMăsuri profilactice

• profilaxie specificăprofilaxie specifică cu vaccin conjugat anti- cu vaccin conjugat anti-HibHib

- se administrează la copii cu vârsta 2 luni-5 ani;se administrează la copii cu vârsta 2 luni-5 ani;

- a redus sub 2% frecvenţa infecţiilor invazive;a redus sub 2% frecvenţa infecţiilor invazive;

- nu influenţează infecţiile determinate de alte nu influenţează infecţiile determinate de alte serotipuri capsulare sau cu tulpini netipabile;serotipuri capsulare sau cu tulpini netipabile;

• chimioprofilaxiechimioprofilaxie cu rifampicină cu rifampicină

- realizată la contacţii de casa sau colectivităţi cu realizată la contacţii de casa sau colectivităţi cu un caz de infecţie invazivă, când aceştia sunt un caz de infecţie invazivă, când aceştia sunt nevaccinaţi, vaccinaţi incomplet sau cu stări nevaccinaţi, vaccinaţi incomplet sau cu stări imunodepresive.imunodepresive.

Page 18: Curs Cocobacili Gram Negativi

0

5

10

15

20

2530

35

40

45

50

1987 1991 1995 1999

Inci

denc

e

Page 19: Curs Cocobacili Gram Negativi

Grupul HACEKGrupul HACEK

H H HaemophilusHaemophilus A A Actinobacillus (Aggregatibacter)Actinobacillus (Aggregatibacter) C C CardiobacteriumCardiobacterium E E EikenellaEikenella K K KingellaKingella

Page 20: Curs Cocobacili Gram Negativi

HACEKHACEK reprezintă un acronim mnemotehnic reprezintă un acronim mnemotehnic rezultat din denumirile celor cinci genuri bacteriene rezultat din denumirile celor cinci genuri bacteriene ce intră în compoziţia grupului: ce intră în compoziţia grupului: HaemophilusHaemophilus, , Actinobacillus (Aggregatibacter)Actinobacillus (Aggregatibacter), , CardiobacteriumCardiobacterium, , EikenellaEikenella, , KingellaKingella..

Deşi incluse în unităţi taxonomice superioare Deşi incluse în unităţi taxonomice superioare diferite, aceste microorganisme au cîteva caractere diferite, aceste microorganisme au cîteva caractere comune pe baza cărora au fost astfel grupate:comune pe baza cărora au fost astfel grupate:

ssuunt nt bacili gram-negativibacili gram-negativi,, au au creştere lentăcreştere lentă, necesitînd 48-72 ore de , necesitînd 48-72 ore de

incubare la 37incubare la 37ooC pentru obţinerea culturilor pe medii C pentru obţinerea culturilor pe medii solide,solide,

ssuunt microorganisme nt microorganisme pretenţioase nutritivpretenţioase nutritiv, care au , care au nevoie de medii îmbogăţite pentru cultivare,nevoie de medii îmbogăţite pentru cultivare,

nu cresc pe mediile selective,nu cresc pe mediile selective, izolarea lor este facilitată de prezenţa heminei izolarea lor este facilitată de prezenţa heminei

(factor X) în mediul de cultură şi de incubarea în (factor X) în mediul de cultură şi de incubarea în atmosferă cu COatmosferă cu CO22,,

Page 21: Curs Cocobacili Gram Negativi

H H HaemophilusHaemophilus : : H.H. aphrophilusaphrophilus şi şi H. H. paraphrophilusparaphrophilus (familia (familia PasteurellaceaePasteurellaceae))

A A ActinobacillusActinobacillus: : A. A. actinomycetemcomitansactinomycetemcomitans, nou , nou Aggregatibacter Aggregatibacter actinomycetemcomitansactinomycetemcomitans

C C CardiobacteriumCardiobacterium: : C. hominis C. hominis (familia (familia CardiobacteriaceaeCardiobacteriaceae))

E E Eikenella;Eikenella; E. corrodensE. corrodens (famili (familiaa NeisseriaceaeNeisseriaceae))

K K KingellaKingella: : K. kingae K. kingae, , K. denitrificansK. denitrificans şi şi K. K. oralisoralis (famili (familiaa NeisseriaceaeNeisseriaceae))

Page 22: Curs Cocobacili Gram Negativi

HaemophilusHaemophilus

Caractere generaleCaractere generale. Haemophilus . Haemophilus aphrophilusaphrophilus şi şi H. paraphrophilusH. paraphrophilus (familia (familia PasteurellaceaePasteurellaceae) s) suunt nt singurele specii ale genului care fac singurele specii ale genului care fac parte din grupul HACEK. parte din grupul HACEK.

Microscopic apar ca bacili gram-Microscopic apar ca bacili gram-negativi scurţi, regulaţi, rar forme negativi scurţi, regulaţi, rar forme filamentoase.filamentoase.

Page 23: Curs Cocobacili Gram Negativi

HabitatHabitat..

Fac parte din microbiota normală a Fac parte din microbiota normală a orofaringelui şi întră în componenţa plăcii orofaringelui şi întră în componenţa plăcii dentare, în special cea acumulată în dentare, în special cea acumulată în spaţiile interdentare şi în spaţiul spaţiile interdentare şi în spaţiul subgingival.subgingival.

Page 24: Curs Cocobacili Gram Negativi

Infecţii determinateInfecţii determinate..

H. aphrophilusH. aphrophilus şi şi H. paraphrophilusH. paraphrophilus au fost izolaţi din infecţii ale au fost izolaţi din infecţii ale tractusului respirator, infecţii ale tractusului respirator, infecţii ale ţesuturilor moi orale şi periorale, ţesuturilor moi orale şi periorale, artrite, osteomielite, bacteriemii şi artrite, osteomielite, bacteriemii şi endocardite. endocardite.

SSunt unt speciile din gen incriminate cel speciile din gen incriminate cel mai frecvent în producerea mai frecvent în producerea endocarditelor odontogene la adulţi endocarditelor odontogene la adulţi de vde vâârstă medie, cu sau fără rstă medie, cu sau fără afectare valvulară preexistentă. afectare valvulară preexistentă.

Page 25: Curs Cocobacili Gram Negativi

Descărcările bacteriemice sDescărcările bacteriemice suunt nt favorizate de procese infecţioase, favorizate de procese infecţioase, traumatisme sau intervenţii chirurgicale traumatisme sau intervenţii chirurgicale în teritoriul oro-maxilo- facial (inclusiv în teritoriul oro-maxilo- facial (inclusiv extracţiile dentare).extracţiile dentare).

Pot fi urmate de endocardită la pacienţi Pot fi urmate de endocardită la pacienţi cu variate afecţiuni cardiace sau la cei cu variate afecţiuni cardiace sau la cei cu apărarea antimicrobiană compromi-cu apărarea antimicrobiană compromi-să (neutropenii, tratament cu imunosu-să (neutropenii, tratament cu imunosu-presoare). presoare).

IIn multe cazuri, infecţia endocardului se n multe cazuri, infecţia endocardului se complică cu embolii arteriale, ceea ce complică cu embolii arteriale, ceea ce explică rata mortalităţii destul de explică rata mortalităţii destul de mare, de 10% pînă la15%.mare, de 10% pînă la15%.

Page 26: Curs Cocobacili Gram Negativi

Sensibilitate la antibioticeSensibilitate la antibiotice..

Cele două specii de hemofili sCele două specii de hemofili suunt nt sensibile la tetraciclină, sensibile la tetraciclină, cloramfenicol, aminoglicozide.cloramfenicol, aminoglicozide.

Au comportare variabilă faţă de Au comportare variabilă faţă de aminopeniciline, unele tulpini fiind aminopeniciline, unele tulpini fiind producătoare de beta-lactamaze.producătoare de beta-lactamaze.

Page 27: Curs Cocobacili Gram Negativi

Actinobacillus Actinobacillus (Aggregatibacter) (Aggregatibacter) actinomycetemcomitansactinomycetemcomitans

Studii de biologie moleculară şi Studii de biologie moleculară şi imunochimie au demonstrat că imunochimie au demonstrat că această specie se aseamănă mai această specie se aseamănă mai mult cu mult cu H. aphrophilusH. aphrophilus, , H. H. paraphrophilusparaphrophilus, , decdecâât cu alte specii t cu alte specii ale genului ale genului ActinobacillusActinobacillus..

Page 28: Curs Cocobacili Gram Negativi

Caractere generaleCaractere generale..

Este un mic cocobacil gram-Este un mic cocobacil gram-negativ, foarte pretenţios negativ, foarte pretenţios nutritiv, care cultivă lent, după nutritiv, care cultivă lent, după minim 72 de ore de incubare în minim 72 de ore de incubare în atmosferă cu 5-10% COatmosferă cu 5-10% CO22. .

Prezenţa factorilor X şi V nu Prezenţa factorilor X şi V nu este indispensabilă. este indispensabilă.

In condiţii adecvate, formează colonii mici, In condiţii adecvate, formează colonii mici, netede, transparente, foarte aderente la netede, transparente, foarte aderente la suprafaţa mediului de cultură. suprafaţa mediului de cultură.

Page 29: Curs Cocobacili Gram Negativi

HabitatHabitat..

A. actinomycetemcomitansA. actinomycetemcomitans face face parte din microbiota cavităţii parte din microbiota cavităţii orale la un număr redus de orale la un număr redus de persoane din populaţia generală.persoane din populaţia generală.

Page 30: Curs Cocobacili Gram Negativi

Infecţii determinateInfecţii determinate..

Bacteria este implicată în producerea Bacteria este implicată în producerea parodontitei juvenile localizateparodontitei juvenile localizate, o infecţie , o infecţie cu caracter distructiv ce evoluează la cu caracter distructiv ce evoluează la nivelul ţesuturilor de susţinere a dintelui. nivelul ţesuturilor de susţinere a dintelui.

De remarcat că tulpinile izolate din astfel De remarcat că tulpinile izolate din astfel de lezuni au numerode lezuni au numeroşi factorişi factori de de patogenitate, patogenitate, ((e.g. leucotoxine, factor de e.g. leucotoxine, factor de inhibare a chemotaxiei polinuclearelor, inhibare a chemotaxiei polinuclearelor, toxină inductoare a resorbţiei osoase, toxină inductoare a resorbţiei osoase, factor inhibitor al fibroblaştilorfactor inhibitor al fibroblaştilor)), ceea ce , ceea ce explică liza osului alveolar, uneori masivă. explică liza osului alveolar, uneori masivă.

Page 31: Curs Cocobacili Gram Negativi

Infecţii determinateInfecţii determinate..

Consecutiv traumatismelor sau Consecutiv traumatismelor sau intervenţiilor stomatologice invazive, intervenţiilor stomatologice invazive, A. actinomycetemcomitansA. actinomycetemcomitans poate poate produce produce bacteriemii bacteriemii şi şi endocardite endocardite subacutesubacute, în special la tineri cu , în special la tineri cu prolaps sau stenoză de valvă mitrală.prolaps sau stenoză de valvă mitrală.

Page 32: Curs Cocobacili Gram Negativi

Sensibilitate la antibioticeSensibilitate la antibiotice..

Microorganismul este sensibil la Microorganismul este sensibil la tetraciclină, macrolide, streptomicină, tetraciclină, macrolide, streptomicină, cefalosporine de generaţia a 3-a. cefalosporine de generaţia a 3-a.

Au fost raportate tulpini rezistente la Au fost raportate tulpini rezistente la aminopeniciline şi aminoglicozide aminopeniciline şi aminoglicozide (exceptie streptomicina).(exceptie streptomicina).

Page 33: Curs Cocobacili Gram Negativi

Cardiobacterium hominisCardiobacterium hominis

Din punct de vedere taxonomic, Din punct de vedere taxonomic, similitudini ale secvenţelor ARN r 16S similitudini ale secvenţelor ARN r 16S justifică includerea acestei bacterii în justifică includerea acestei bacterii în familia familia CardiobacteriaceaeCardiobacteriaceae, , alături de alături de genurile genurile SutonellaSutonella şi şi DichelobacterDichelobacter..

Page 34: Curs Cocobacili Gram Negativi

Caractere generaleCaractere generale..

Unică specie a genului, Unică specie a genului, reuneşte bacili gram-negativi reuneşte bacili gram-negativi polimorfi, ocazional filamentoşi, polimorfi, ocazional filamentoşi, imobili.imobili.

Facultativ anaerobă, creşte Facultativ anaerobă, creşte foarte lent pe medii şi în condiţii foarte lent pe medii şi în condiţii de incubare speciale. de incubare speciale.

Atacă zaharurile fermentativ, produce Atacă zaharurile fermentativ, produce oxidază şi indol, este catalază negativ, nu oxidază şi indol, este catalază negativ, nu hidrolizează ureea şi nu reduce nitraţii. hidrolizează ureea şi nu reduce nitraţii.

Page 35: Curs Cocobacili Gram Negativi

HabitatHabitat..

C. hominisC. hominis se găseşte în se găseşte în cantitate relativ crescută la cantitate relativ crescută la nivelul naso- şi orofaringelui şi, nivelul naso- şi orofaringelui şi, inconstant, pe mucoasa nasală.inconstant, pe mucoasa nasală.

Page 36: Curs Cocobacili Gram Negativi

Infecţii determinateInfecţii determinate..

După intervenţii stomatologice sau în După intervenţii stomatologice sau în sfera ORL, ssfera ORL, suunt posibile bacteriemii, nt posibile bacteriemii, urmate de meningite sau endocardite în urmate de meningite sau endocardite în cazul pacienţilor cu proteze valvulare.cazul pacienţilor cu proteze valvulare.

Page 37: Curs Cocobacili Gram Negativi

Sensibilitate la antibioticeSensibilitate la antibiotice..

C. hominisC. hominis este sensibil la aminopeni este sensibil la aminopeni--ciline, tetracicline, cefalosporine, ciline, tetracicline, cefalosporine, aminoglicozide, dar aminoglicozide, dar

este rezistent la vancomicină şi este rezistent la vancomicină şi eritromicină.eritromicină.

Page 38: Curs Cocobacili Gram Negativi

EikenellaEikenella

Genul, afiliat în prezent familiei Genul, afiliat în prezent familiei NeisseriaceaeNeisseriaceae, are o singură specie, are o singură specie - - E. E. corrodenscorrodens, omogenă fenotipic şi genotipic., omogenă fenotipic şi genotipic.

Caractere generaleCaractere generale. Specia cuprinde bacili . Specia cuprinde bacili gram-negativi, imobili, pretenţioşi nutritiv; gram-negativi, imobili, pretenţioşi nutritiv;

ssuunt aerobi în prezenţa factorului X, dar nt aerobi în prezenţa factorului X, dar necesită incubare anaerobă atunci cnecesită incubare anaerobă atunci câând nd ssuunt cultivaţi pe medii fără heminănt cultivaţi pe medii fără hemină. .

Uzual formează colonii deprimate, care erodează agarul. Uzual formează colonii deprimate, care erodează agarul. SSuunt oxidază-pozitivi, azaharolitici, reduc nitraţii, nu nt oxidază-pozitivi, azaharolitici, reduc nitraţii, nu

produc catalază şi nici urează.produc catalază şi nici urează.

Page 39: Curs Cocobacili Gram Negativi

HabitatHabitat..

E. corrodensE. corrodens este rezidentă a cavităţii este rezidentă a cavităţii orale şi naso-faringelui la mai mult de orale şi naso-faringelui la mai mult de jumătate din populaţia generală.jumătate din populaţia generală.

Page 40: Curs Cocobacili Gram Negativi

Infecţii determinateInfecţii determinate..

Determină infecţii ale capului şi gDetermină infecţii ale capului şi gââtului, tului, în special osteomielite, după în special osteomielite, după traumatisme sau intervenţii chirurgicale traumatisme sau intervenţii chirurgicale în sfera oro-maxilo-facială. în sfera oro-maxilo-facială.

A fost izolat, ocazional, din parotidite, A fost izolat, ocazional, din parotidite, sinuzite, bacteriemii şi endocardite sinuzite, bacteriemii şi endocardite subacute. subacute.

La consumatorii de droguri şi persoane La consumatorii de droguri şi persoane imunodeprimate determină infecţii imunodeprimate determină infecţii pleuropulmonare cu evoluţie severă.pleuropulmonare cu evoluţie severă.

Page 41: Curs Cocobacili Gram Negativi

Sensibilitate la antibioticeSensibilitate la antibiotice..

Majoritatea tulpinilor de Majoritatea tulpinilor de E. corrodensE. corrodens ssuunt sensibile la ampicilină, nt sensibile la ampicilină, tetraciclină, cefalosporine, tetraciclină, cefalosporine,

dar sdar suunt rezistente la penicilină, nt rezistente la penicilină, vancomicină şi aminoglicozide.vancomicină şi aminoglicozide.

Page 42: Curs Cocobacili Gram Negativi

KingellaKingella

Genul este în prezent inclus în familia Genul este în prezent inclus în familia Neisseriaceae Neisseriaceae şi au fost caracterizate şi au fost caracterizate trei specii: trei specii:

- K. kingaeK. kingae;;- K. denitrificansK. denitrificans;;- K. oralisK. oralis..

Page 43: Curs Cocobacili Gram Negativi

Habitat şi infecţii determinateHabitat şi infecţii determinate..

Speciile de Speciile de KingellaKingella habitează habitează mucoasa orală şi faringiană.mucoasa orală şi faringiană.

Determină ocazional, la gazda Determină ocazional, la gazda normoreactivă, artrite şi osteomielite normoreactivă, artrite şi osteomielite cu localizări variate. cu localizări variate.

După manevre invazive efectuate în După manevre invazive efectuate în sfera ORL pot ajunge în ssfera ORL pot ajunge în sâânge, fiind nge, fiind implicate în endocardite subacute la implicate în endocardite subacute la pacienţi cu leziuni valvulare pacienţi cu leziuni valvulare preexistente. preexistente.

Page 44: Curs Cocobacili Gram Negativi

Habitat şi infecţii determinateHabitat şi infecţii determinate..

La gazda imunodeprimată, kingelele pot La gazda imunodeprimată, kingelele pot produce pneumonii şi abcese ale produce pneumonii şi abcese ale organelor parenchimatoase. organelor parenchimatoase.

Semnificativ, aceste afecţiuni sSemnificativ, aceste afecţiuni suunt nt precedate de procese infecţioase la precedate de procese infecţioase la nivelul oro-faringelui.nivelul oro-faringelui.

Page 45: Curs Cocobacili Gram Negativi

Sensibilitate la antibioticeSensibilitate la antibiotice..

KingellaKingella are un spectru de are un spectru de sensibilitate destul de larg, ce sensibilitate destul de larg, ce cuprinde aminopenicilinele, cuprinde aminopenicilinele, aminoglicozidele, cefalosporinele, aminoglicozidele, cefalosporinele, cotrimoxazolul, fluorochinolonele. cotrimoxazolul, fluorochinolonele.

SSuunt rezistente la eritromicină, nt rezistente la eritromicină, lincomicină, clindamicinălincomicină, clindamicină

Page 46: Curs Cocobacili Gram Negativi

Diagnosticul de laborator al infecţiilor Diagnosticul de laborator al infecţiilor determinate de bacteriile HACEKdeterminate de bacteriile HACEK..

Prelevatele în care este suspicionată Prelevatele în care este suspicionată prezenţa acestor microorganisme prezenţa acestor microorganisme ssuunt însămînţate pe geloză-chocolat, nt însămînţate pe geloză-chocolat, cu incubare prelungită pînă la 5 zile, cu incubare prelungită pînă la 5 zile, în atmosferă cu 10% COîn atmosferă cu 10% CO22. .

IIn infecţiile bacteriemice, izolarea n infecţiile bacteriemice, izolarea acestor bacterii din sacestor bacterii din sâânge necesită nge necesită utilizarea unor medii speciale şi utilizarea unor medii speciale şi incubare 7-10 zile în condiţii optime. incubare 7-10 zile în condiţii optime.

Page 47: Curs Cocobacili Gram Negativi

Diagnosticul de laborator al infecţiilor Diagnosticul de laborator al infecţiilor determinate de bacteriile HACEKdeterminate de bacteriile HACEK..

Identificarea izolatelor se bazează Identificarea izolatelor se bazează pe studiul caracterelor biochimice şi, pe studiul caracterelor biochimice şi, eventual, utilizarea factorilor de eventual, utilizarea factorilor de creştere X şi/sau V. creştere X şi/sau V.

Testarea sensibilităţii la antibiotice Testarea sensibilităţii la antibiotice poate pune probleme din cauza poate pune probleme din cauza dificultăţilor de cultivare a acestor dificultăţilor de cultivare a acestor microorganisme. microorganisme.

Din această cauză, antibiograma Din această cauză, antibiograma difuzimetrică nu este recomandată, difuzimetrică nu este recomandată, fiind preferată metoda diluţiilor fiind preferată metoda diluţiilor ((în bulion în bulion Mueller-Hinton suplimentat cu 5% sMueller-Hinton suplimentat cu 5% sâânge lacat de calnge lacat de cal))..

Page 48: Curs Cocobacili Gram Negativi

Tratamenul infecţiilor produse Tratamenul infecţiilor produse de bacteriile din grupul HACEKde bacteriile din grupul HACEK

CConstă în administrarea unei onstă în administrarea unei aminopeniciline, eventual asociată aminopeniciline, eventual asociată cu un inhibitor de beta-lactamază.cu un inhibitor de beta-lactamază.

Adăugarea aminoglicozidelor este Adăugarea aminoglicozidelor este recomandată crecomandată câând snd suunt implicaţi nt implicaţi hemofilii, kingelele sau hemofilii, kingelele sau C. hominisC. hominis..

Ca alternativă, pot fi utilizate Ca alternativă, pot fi utilizate cefalosporinele de a cefalosporinele de a 22 sau a sau a 3-a3-a generaţie. generaţie.

La pacienţii cu sensibilizare de tip La pacienţii cu sensibilizare de tip imediat la peniciline, pot fi utilizate imediat la peniciline, pot fi utilizate azitromicina sau tetraciclinele.azitromicina sau tetraciclinele.

Page 49: Curs Cocobacili Gram Negativi

Pentru Pentru prevenirea infecţiilor cu prevenirea infecţiilor cu bacterii din grupul HACEKbacterii din grupul HACEK se se recomandărecomandă::

efectuarea manevrelor invazive pe efectuarea manevrelor invazive pe focar septic oral sau oro-faringian focar septic oral sau oro-faringian sub protecţie de antibiotice sub protecţie de antibiotice

aplicarea corectă a chimioprofilaxiei aplicarea corectă a chimioprofilaxiei în cazul pacienţilor cu valvulopatii în cazul pacienţilor cu valvulopatii supuşi unor astfel de intervenţii.supuşi unor astfel de intervenţii.

Page 50: Curs Cocobacili Gram Negativi

Genul Genul BordetellaBordetella

Page 51: Curs Cocobacili Gram Negativi

Caractere generaleCaractere generalecocobacili mici gram-negativi;cocobacili mici gram-negativi;

imobili sau mobili prin flageli cu dispoziţie imobili sau mobili prin flageli cu dispoziţie peritriche;peritriche;

strict aerobi;strict aerobi;

B.B. pertussispertussis, patogenă numai pentru om, , patogenă numai pentru om, agentul etiologic al agentul etiologic al tusei convulsivetusei convulsive, este cea , este cea mai fastidioasă;mai fastidioasă;

alte specii: alte specii: B.B. parapertussisparapertussis (prezentă numai la (prezentă numai la om, determină forme clinice mai uşoare de tuse om, determină forme clinice mai uşoare de tuse

convulsivă)convulsivă), , B.bronchisepticaB.bronchiseptica, , B.holmesiiB.holmesii, , B.B. hinzii hinzii (specii prezente la animale, rar la om, (specii prezente la animale, rar la om, capabile să determine infecţii oportuniste respiratocapabile să determine infecţii oportuniste respirato--

rii sau sistemice)rii sau sistemice)..

Page 52: Curs Cocobacili Gram Negativi

Bordetella pertussisBordetella pertussisCaractere morfo-tinctoriale şi de Caractere morfo-tinctoriale şi de

mobilitatemobilitate• cocobacili gram-negativi izolaţi, in diplo cocobacili gram-negativi izolaţi, in diplo

sau in scurte lanţuri, uneori pleomorfi;sau in scurte lanţuri, uneori pleomorfi;

• imobili.imobili.

Caractere de cultivare şi biochimiceCaractere de cultivare şi biochimice• cultivă lent (3-6 zile) pe medii speciale;cultivă lent (3-6 zile) pe medii speciale;

• dezvoltă colonii foarte mici, S, hemolitice dezvoltă colonii foarte mici, S, hemolitice pe medii cu sânge;pe medii cu sânge;

• teste biochimice o diferenţiază de celelalte teste biochimice o diferenţiază de celelalte specii.specii.

Page 53: Curs Cocobacili Gram Negativi

Rezistenţa în mediul externRezistenţa în mediul extern

• fragilă în mediul extern;fragilă în mediul extern;

• efectul toxic al unor compuşi prezenţi în efectul toxic al unor compuşi prezenţi în produsele biologice sau medii de cultură produsele biologice sau medii de cultură necesită neutralizarea prin amidon sau necesită neutralizarea prin amidon sau cărbune activ.cărbune activ.

Page 54: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 55: Curs Cocobacili Gram Negativi

Factori de patogenitateFactori de patogenitate• fimbriifimbrii şi şi proteine din membrana externăproteine din membrana externă

(pertactin) au rol în adezivitate;(pertactin) au rol în adezivitate;

• hemaglutinina filamentoasăhemaglutinina filamentoasă perfectează perfectează aderenţa la celulele epiteliului ciliat aderenţa la celulele epiteliului ciliat respirator;respirator;

• toxina pertussis toxina pertussis (tip A-B) pe lângă rol în (tip A-B) pe lângă rol în adezivitate are şi efecte sistemice: adezivitate are şi efecte sistemice: leucocitoză cu limfocitoză (60-80%), leucocitoză cu limfocitoză (60-80%), stimuleează secreţia de insulină, creşte stimuleează secreţia de insulină, creşte sensibilitatea la histamină şi endotoxină, sensibilitatea la histamină şi endotoxină, deprimă răspunsul imun umoral şi celular;deprimă răspunsul imun umoral şi celular;

Page 56: Curs Cocobacili Gram Negativi

• adenilatciclaza calmodulin-dependentă adenilatciclaza calmodulin-dependentă stimulează secreţia de mucus şi inhibă stimulează secreţia de mucus şi inhibă funcţiile celulelor fagocitare;funcţiile celulelor fagocitare;

• citotoxina trahealăcitotoxina traheală cu efecte ciliostatice cu efecte ciliostatice şi cilionecrotice;şi cilionecrotice;

• LPSLPS, diferit de , diferit de EnterobacteriaceaeEnterobacteriaceae, , contribuie la lezarea epiteliului respirator.contribuie la lezarea epiteliului respirator.

Page 57: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 58: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 59: Curs Cocobacili Gram Negativi

Manifestări cliniceManifestări clinice• agentul etiologic al tusei convulsive, agentul etiologic al tusei convulsive,

infecţie specifică omului cu transmitere infecţie specifică omului cu transmitere respiratorie, deosebit de gravă la sugari;respiratorie, deosebit de gravă la sugari;

• evoluează în trei stadii:evoluează în trei stadii:

- cataralcataral, cu tuse şi catar necaracteristice, , cu tuse şi catar necaracteristice, bolnavul fiind deosebit de contagios;bolnavul fiind deosebit de contagios;

- convulsivconvulsiv cu tuse spasmodică însoţită de cu tuse spasmodică însoţită de vărsături, convulsii, hemoragii vărsături, convulsii, hemoragii subconjunctivale;subconjunctivale;

- convalescenţăconvalescenţă, uneori prelungită.peste , uneori prelungită.peste două săptămâni.două săptămâni.

ImunitateImunitate• Ac serici şi IgA secretor;Ac serici şi IgA secretor;

• limfocite T citotoxice.limfocite T citotoxice.

Page 60: Curs Cocobacili Gram Negativi

6060

Diagnostic bacteriologicDiagnostic bacteriologic• cele mai mari şanse de izolare a cele mai mari şanse de izolare a B.B.

pertussispertussis sunt în perioada catarală, din sunt în perioada catarală, din tampon nazo-faringian; tampon nazo-faringian;

• diagnostic rapid prin coloraţie IF;diagnostic rapid prin coloraţie IF;

• însămânţare pe medii speciale;însămânţare pe medii speciale;

• identificare antigenică şi biochimică a identificare antigenică şi biochimică a coloniilor suspecte.coloniilor suspecte.

Tratament etiotropTratament etiotrop• eritromicinaeritromicina este antibioticul de elecţie, este antibioticul de elecţie,

administrată cât mai precoce.administrată cât mai precoce.

Page 61: Curs Cocobacili Gram Negativi

Profilaxie specificăProfilaxie specifică• suspensie bacteriană inactivată (trivaccin suspensie bacteriană inactivată (trivaccin

diftero-tetano-pertussis);diftero-tetano-pertussis);

• vaccin acelular cu componente purificate: vaccin acelular cu componente purificate: anatoxina pertussis, hemaglutinina anatoxina pertussis, hemaglutinina filamentoasă, pertactin (trivaccin sau filamentoasă, pertactin (trivaccin sau tetravaccin cu asocierea în plus a Ag tetravaccin cu asocierea în plus a Ag capsular Hib).capsular Hib).

Page 62: Curs Cocobacili Gram Negativi

LegionellaLegionella

sunt mici bacili care uneori iau forme sunt mici bacili care uneori iau forme filamentoase si posedă un perete de filamentoase si posedă un perete de tip gram-negativ dar care este bogat tip gram-negativ dar care este bogat în acizi graşi, motiv pentru care se în acizi graşi, motiv pentru care se colorează dificil în coloraţia Gram colorează dificil în coloraţia Gram (fixează prost coloranţii de anilină) şi (fixează prost coloranţii de anilină) şi de aceea necesită coloraţii speciale.de aceea necesită coloraţii speciale.

Page 63: Curs Cocobacili Gram Negativi

Nesporulaţi, de regulă mobili Nesporulaţi, de regulă mobili printr-unul sau mai mulţi flageli printr-unul sau mai mulţi flageli subpolari. subpolari.

Sunt aerobi şi cultivă pe medii Sunt aerobi şi cultivă pe medii suplimentate cu L-cisteină şi suplimentate cu L-cisteină şi săruri de fier. săruri de fier.

Catalazo-pozitiv şi oxidazo-negativi sau Catalazo-pozitiv şi oxidazo-negativi sau slab pozitiv. slab pozitiv.

Inactivi asupra cabohidraţilor şi nu reduc Inactivi asupra cabohidraţilor şi nu reduc nitraţii.nitraţii.

Page 64: Curs Cocobacili Gram Negativi

Taxonomie:Taxonomie:

Familia Familia Legionellaceae,Legionellaceae, cu un cu un singur gen singur gen LegionellaLegionella, cuprinde , cuprinde 39 de specii şi 60 subgrupe. 39 de specii şi 60 subgrupe.

L pneumophilaL pneumophila are trei are trei subspecii: subspecii:

- pneumophilapneumophila, , - pascullei, pascullei, - fraseerifraseeri. .

Page 65: Curs Cocobacili Gram Negativi

Habitat şi relaţii ecologice:Habitat şi relaţii ecologice:

larg răspândit în natură fiind legat mai ales sursele larg răspândit în natură fiind legat mai ales sursele naturale sau artificiale de apă unde stabilesc relaţii naturale sau artificiale de apă unde stabilesc relaţii complexe cu microbiocenozele acestor biotopuri:complexe cu microbiocenozele acestor biotopuri:

- cianobacteriile, flavobacteriile cianobacteriile, flavobacteriile şişi alegele verzi le alegele verzi le furnizează nutrienţii;furnizează nutrienţii;

- protozoarele (amoebe şi ciliate) le ingeră şi la protozoarele (amoebe şi ciliate) le ingeră şi la temperaturi de 35-40temperaturi de 35-40C devin gazde de amplificare C devin gazde de amplificare chiar in medii sărace nutritiv ;chiar in medii sărace nutritiv ;

- iin plus, protozoarele, prin formele lor chistice, n plus, protozoarele, prin formele lor chistice, menţin legionelele viabile şi virulente mai mult timp, menţin legionelele viabile şi virulente mai mult timp, în aerosoli.în aerosoli.

Prin capacitatea lor de a produce mari cantităţi de Prin capacitatea lor de a produce mari cantităţi de glicocalixglicocalix, , legionelele pot legionelele pot adera pe obiecte de cauciuc adera pe obiecte de cauciuc (tuburi, conducte) (tuburi, conducte) şi chiar pe silicoane. şi chiar pe silicoane.

Unele Unele suprafeţele metalice suprafeţele metalice sunt mai puţin prielnice pentru sunt mai puţin prielnice pentru persistenţa şi adeziunea lor (ex. oţel inoxidabil şi cupru), altele, persistenţa şi adeziunea lor (ex. oţel inoxidabil şi cupru), altele, fierul, zincul, aluminiul, le favorizează creşterea. fierul, zincul, aluminiul, le favorizează creşterea.

Persistă şi supravieţuiesc în AD un anPersistă şi supravieţuiesc în AD un an!!

Page 66: Curs Cocobacili Gram Negativi

Se transmit prin aerosoli iar Se transmit prin aerosoli iar instalaţiile de aer condiţionat instalaţiile de aer condiţionat sau nebulizatoarele sunt sau nebulizatoarele sunt mijloace de vehiculare ale mijloace de vehiculare ale legionelelor ca şi picăturile de legionelelor ca şi picăturile de ploaie.ploaie.

Page 67: Curs Cocobacili Gram Negativi

Legionella pneumophilaLegionella pneumophila, este un , este un microorganism microorganism facultativ facultativ intracelularintracelular care determină în care determină în principal fie principal fie boala veteranilor boala veteranilor (febră (febră cu pneumonie) fie cu pneumonie) fie febra de Pontiac febra de Pontiac (febră fără pneumonie); (febră fără pneumonie);

a fost descoperită în 1976 când a a fost descoperită în 1976 când a determinat o izbucnire gravă care a determinat o izbucnire gravă care a afectat veteranii din Legiunea afectat veteranii din Legiunea Americană întruniţi într-un hotel la Americană întruniţi într-un hotel la reuniunea lor aniversară. reuniunea lor aniversară.

Page 68: Curs Cocobacili Gram Negativi

Diagnostic:Diagnostic:

izolare pe izolare pe medii specialemedii speciale care conţin care conţin cărbune activat (previne oxidarea principalei cărbune activat (previne oxidarea principalei surse de nutrienţi, extractul de levură), surse de nutrienţi, extractul de levură), extract de levură şi factori stimulatori ai extract de levură şi factori stimulatori ai creşterii. creşterii.

Mediile difaziceMediile difazice sunt utile pentru izolarea în sunt utile pentru izolarea în hemoculturi iar pentru probele contaminate hemoculturi iar pentru probele contaminate de apă (de mediu) sau de la pacienţi, se de apă (de mediu) sau de la pacienţi, se practică încpractică încăălzirea la baia de apă la 50 şi lzirea la baia de apă la 50 şi respectiv 60respectiv 60C sau tratarea cu acizi. C sau tratarea cu acizi.

Ca antibiotic pentrCa antibiotic pentruu a conferi selectivitate a conferi selectivitate mediului, se preferă vancomicina (sau mediului, se preferă vancomicina (sau cefalosporinele, deşi unele cefalosporine cefalosporinele, deşi unele cefalosporine inhibă şi legionelele).inhibă şi legionelele).

Page 69: Curs Cocobacili Gram Negativi

Caractere de cultură:Caractere de cultură:

bacterii strict aerobe, cresc la pH 6.9, în bacterii strict aerobe, cresc la pH 6.9, în atmosferă redusă de COatmosferă redusă de CO2 2 (2.2 – 5% , (2.2 – 5% , borcan cu lumânare) (concentraţiile înalte borcan cu lumânare) (concentraţiile înalte le inhibă).le inhibă).

După 48 de ore de incubare la 35-37 După 48 de ore de incubare la 35-37 C C apar iniţial colonii mici (se observă numai la apar iniţial colonii mici (se observă numai la stereomicroscop) iar după 3-5 zile coloniile stereomicroscop) iar după 3-5 zile coloniile devin vizibile cu ochiul liber (aprox. 1 mm), devin vizibile cu ochiul liber (aprox. 1 mm), ajungând după încă o săptămână la 3-4 ajungând după încă o săptămână la 3-4 mm. mm.

Coloniile sunt: rotunde, convexe, Coloniile sunt: rotunde, convexe, strălucitoare, gris-verzui, cu aspect de strălucitoare, gris-verzui, cu aspect de “sticlă tăiată” datorită opalescenţei pătate, “sticlă tăiată” datorită opalescenţei pătate, reticulate a coloniilor. reticulate a coloniilor.

Page 70: Curs Cocobacili Gram Negativi

Caractere microscopice:Caractere microscopice:

bacili gram-negativi pleomorfi, 0.3-bacili gram-negativi pleomorfi, 0.3-0.9 /1.5 / 5 0.9 /1.5 / 5 m, slab colom, slab coloraţi, având raţi, având capetele ascuţite. capetele ascuţite.

In culturi vechi devin filamentoase In culturi vechi devin filamentoase (având chiar 50 (având chiar 50 m lungime) m lungime)

Prin impregnaţie argentică (Dieterle) Prin impregnaţie argentică (Dieterle) se colorează în se colorează în brunbrun, , roşuroşu în în coloraţia Gimenez sau coloraţia Gimenez sau albastrualbastru în în coloraţia Giemsa. coloraţia Giemsa.

Page 71: Curs Cocobacili Gram Negativi

Impregnaţie argenticăImpregnaţie argentică

Page 72: Curs Cocobacili Gram Negativi

Teste de indentificare: Teste de indentificare:

preliminarepreliminare: coloraţia IF directă în produse : coloraţia IF directă în produse patologice respiratorii, reprezintă un patologice respiratorii, reprezintă un diagnostic prezumptiv rapid. diagnostic prezumptiv rapid.

Se izolează tulpina în cultură pură după Se izolează tulpina în cultură pură după care se fac testele biochimcare se fac testele biochimiice specifice ce specifice urmate de reacţiurmate de reacţiiile de identificare le de identificare antigenică mai ales pentru serogrupele mai antigenică mai ales pentru serogrupele mai frecvent izolate (1 şi 6 de frecvent izolate (1 şi 6 de L pneumophila L pneumophila sau sau L micdadeiL micdadei). ).

teste definitiveteste definitive: identificarea acizilor graşi : identificarea acizilor graşi sau teste de biologie moleculară;sau teste de biologie moleculară;

identificarea grupelor sau subgrupleor identificarea grupelor sau subgrupleor antigenice, ca markeri epidemiologici prin antigenice, ca markeri epidemiologici prin reacţii cu Ac monoclonali. reacţii cu Ac monoclonali.

Page 73: Curs Cocobacili Gram Negativi

Diagnosticul serologic :Diagnosticul serologic :

posibil prin diferite tehnici, posibil prin diferite tehnici, (microaglutinare, ELISA, CIE) (microaglutinare, ELISA, CIE) deşi este doar un diagnostic deşi este doar un diagnostic retrospectiv şi există numeroase retrospectiv şi există numeroase reacţii încrucreacţii încruciişate între diferitele şate între diferitele specii de specii de LegionellaLegionella. .

Page 74: Curs Cocobacili Gram Negativi

Sensibilitatea la antibioticeSensibilitatea la antibiotice

de elecţie de elecţie eritromicinaeritromicina. . Sensibilitatea stabilită Sensibilitatea stabilită inin vitrovitro nu se nu se

suprapune cu cea suprapune cu cea in vivoin vivo. . Această neconcordanţă ar putea fi Această neconcordanţă ar putea fi

explicată prin faptul că explicată prin faptul că LegionellaLegionella este o bacterie cu localizare este o bacterie cu localizare intraceluară (în plus la testarea intraceluară (în plus la testarea in in vitrovitro, antibioticele sunt legate de , antibioticele sunt legate de către cărbunele prezent în mediu).către cărbunele prezent în mediu).

Alte antibiotice utile; rifampin, Alte antibiotice utile; rifampin, cotrimoxazol, quinolone, macrolide cotrimoxazol, quinolone, macrolide noi (claritromicin, azitromicin). noi (claritromicin, azitromicin).

Page 75: Curs Cocobacili Gram Negativi

Alte specii implicate în declanşarea bolii: Alte specii implicate în declanşarea bolii: L. L. micdadei, L. feeleeiimicdadei, L. feeleeii şi şi L. anisiaL. anisia. .

Dintre acestea mai importante sunt doar Dintre acestea mai importante sunt doar două: două: L pneumophilaL pneumophila prin serogrupul 1 prin serogrupul 1 (determină 50% dintre infecţii), serogrupul (determină 50% dintre infecţii), serogrupul 6 (10%) şi 6 (10%) şi L micdadeiL micdadei (5%). (5%).

Alte boli determinate de legionele: mai rar, Alte boli determinate de legionele: mai rar, pericardite, abcese la nivelul puncţiilor pericardite, abcese la nivelul puncţiilor pentru hemodializă, peritonite, infecţii ale pentru hemodializă, peritonite, infecţii ale plăgilorplăgilor..

După vindecarea clinică pot persista ca După vindecarea clinică pot persista ca infecţii latente. infecţii latente.

Page 76: Curs Cocobacili Gram Negativi

BrucellaBrucella

cocobacili gram negativ fin, cocobacili gram negativ fin, imobili, nesporulaţi, care cultivă imobili, nesporulaţi, care cultivă dificil pe medii special îmbogăţite.dificil pe medii special îmbogăţite.

Page 77: Curs Cocobacili Gram Negativi

Bruceloza este o Bruceloza este o zooantroponoză zooantroponoză determinată de 4 specii care prezintă determinată de 4 specii care prezintă 17 biotipuri; 17 biotipuri;

genul cuprinde 7 specii dar 4 sunt genul cuprinde 7 specii dar 4 sunt patogene pentru om şi animale: patogene pentru om şi animale:

- B. abortus, B. abortus, - B melitensis, B melitensis, - B suiusB suius - B caniB caniss. . Potenţial de armă biologicăPotenţial de armă biologică!!!!!!!!!!

Page 78: Curs Cocobacili Gram Negativi

Factori de patogenitate:Factori de patogenitate:

cele trei specii conţin în comun, dar în cantităţi cele trei specii conţin în comun, dar în cantităţi variabile două complexe antigenice A şi M. variabile două complexe antigenice A şi M.

Sunt bacterii Sunt bacterii facultativ intracelufacultativ intracelulalarere, sensibilizante , sensibilizante pentru organismul infectat. pentru organismul infectat.

B melitensisB melitensis deţine cel mai înalt potenţial de deţine cel mai înalt potenţial de patogenitate şpatogenitate şi i de infecţiozitate pentru om; ex 3 de infecţiozitate pentru om; ex 3 subtipuri, descrise la subtipuri, descrise la caprinecaprine şi ovine şi ovine

B abortusB abortus: 9 subtipuri, surse: : 9 subtipuri, surse: bovine,bovine, bizon, cămila, bizon, cămila, iaciac

B. suisB. suis, 3 subtipuri, (1-3) la , 3 subtipuri, (1-3) la porci porci sălbatici şi sălbatici şi domestici, domestici, iepuri, reniiepuri, reni..

Ro: Ro: B abortus B abortus şişi B suis B suis, izolate de la om şi animale., izolate de la om şi animale.

Page 79: Curs Cocobacili Gram Negativi

Boala descrisă prima dată în 1861 în timpul Boala descrisă prima dată în 1861 în timpul războiulurăzboiuluii din Crimeea. din Crimeea.

Bruce Bruce izolează bacteria din splina deceda-izolează bacteria din splina deceda-ţilor cu bruceloză, de unde şi denumirea ţilor cu bruceloză, de unde şi denumirea genului (1871).genului (1871).

Incubaţie: 5 – 60 de zile (uneori luni Incubaţie: 5 – 60 de zile (uneori luni de zile) de zile)

Frecvent asimpFrecvent asimptotomatică.matică. Forme acute, subacute, cronice sau Forme acute, subacute, cronice sau

latente. latente. DDiaiaggnosticulnosticul clinic clinic - - obligator obligator

confirmat microbiologic.confirmat microbiologic.

Page 80: Curs Cocobacili Gram Negativi

DDiaiaggnosticnostic direct direct

Produse patologice: sânge, în Produse patologice: sânge, în stadiul septicemic, în stadiul stadiul septicemic, în stadiul subacut sau cronic: măduvă subacut sau cronic: măduvă osoasă sau probe biopsice (ggl osoasă sau probe biopsice (ggl limfatici), puroi, exsudat articular, limfatici), puroi, exsudat articular, LCR.LCR.

Ex. bacterioscopic, chiar şi prin IF Ex. bacterioscopic, chiar şi prin IF esteeste,, de regulă de regulă,, negativ negativ..

Page 81: Curs Cocobacili Gram Negativi

Izolarea brucelelor este posibilă în stadiul Izolarea brucelelor este posibilă în stadiul acut şi subacut sau în cursul recurenţelor acut şi subacut sau în cursul recurenţelor din timpul bolii cronice. din timpul bolii cronice.

Medii îmbMedii îmboogăţite, incubare în atms cu 5-găţite, incubare în atms cu 5-10% CO10% CO22. .

Culturile în bulion se urmăresc 6 luni, cu Culturile în bulion se urmăresc 6 luni, cu repicări medii solide. repicări medii solide.

HemocultuHemoculturiri pe mediu difazic. pe mediu difazic. PProrobele contaminate se însămânţează pe bele contaminate se însămânţează pe

medii selective prin antibiotice medii selective prin antibiotice (pol(poliimixină B, mixină B, bacitracină, cicloheximidă).bacitracină, cicloheximidă).

Identificarea: prin teste biochimice şi rIdentificarea: prin teste biochimice şi r.. de de aglutinare cu seruri specificeaglutinare cu seruri specifice

Page 82: Curs Cocobacili Gram Negativi

Colonii S, translucideColonii S, translucide

Page 83: Curs Cocobacili Gram Negativi

ExExamenamen serologic serologic IIndicat în toate stadiile: acut, subacut sau cronic.ndicat în toate stadiile: acut, subacut sau cronic.

Ac IgM apar precoce, în stadiul acut. Ac IgM apar precoce, în stadiul acut. IgGIgG,, in stadiul subacut sau cron in stadiul subacut sau cronic ic şi în cursul şi în cursul

acutizării facutizării formelorormelor cronice. cronice. In infIn infectiaectia latentă IgM persistă la titruri mici. latentă IgM persistă la titruri mici.

R de aglutinare (R. Wright) utilă in stadiul acut şi în R de aglutinare (R. Wright) utilă in stadiul acut şi în puseele de acutizare.puseele de acutizare.

Titruri semnificative: 160 (sau 100). Titruri semnificative: 160 (sau 100). Titrul creşte la 4-6 săpt de la debut, maxim la 2-3 Titrul creşte la 4-6 săpt de la debut, maxim la 2-3

luni, scade treptat şi rămâne la titruri joase timp de luni, scade treptat şi rămâne la titruri joase timp de 1-5 ani, în infecţiile cronice cu abcese de organ. 1-5 ani, în infecţiile cronice cu abcese de organ.

R pozitivă după infecţii acute, după vaccinare dar şi R pozitivă după infecţii acute, după vaccinare dar şi după alte vaccinări – r fals pozitivă (ex vaccinarea după alte vaccinări – r fals pozitivă (ex vaccinarea antiholerică). antiholerică).

Page 84: Curs Cocobacili Gram Negativi

In stadiul subacut, cronic sau latent In stadiul subacut, cronic sau latent reacţia este dubioasă sau negativă reacţia este dubioasă sau negativă din cauza unor Ac blocanţi din cauza unor Ac blocanţi (determină fenomenul de prozonă, (determină fenomenul de prozonă, sau chiar inhibarea reacţiei)sau chiar inhibarea reacţiei)

TTestulestul Coombs permite evidenţierea Coombs permite evidenţierea lor lor (Ag brucelic este spălat, pentru îndepărtarea Ig (Ag brucelic este spălat, pentru îndepărtarea Ig fixate nespecific). fixate nespecific).

La Ag brucelic se adaugă ser antiglobulinic uman. La Ag brucelic se adaugă ser antiglobulinic uman. Aglutinarea indică prezenţa Ac blocanţi. Aglutinarea indică prezenţa Ac blocanţi.

Page 85: Curs Cocobacili Gram Negativi

T de blocare: in tuburile negative în R Wright se T de blocare: in tuburile negative în R Wright se adaugă câte o picătură de ser anti-adaugă câte o picătură de ser anti-BrucellaBrucella. .

Absenţa aglutinării indică prezenţa Ac blocanţi.Absenţa aglutinării indică prezenţa Ac blocanţi.

IDR la brucelină poate depista reacţia de IDR la brucelină poate depista reacţia de hipersensibilizare de tip IV. hipersensibilizare de tip IV.

Se pozitivează la o lună de la debutul Se pozitivează la o lună de la debutul infecţiei şi persistă până la vindecarea infecţiei şi persistă până la vindecarea bacteriologică. bacteriologică.

R fals pozitive – 10% din cazurile acute se R fals pozitive – 10% din cazurile acute se corelează slab cu serodiagncorelează slab cu serodiagnososticul. ticul.

Variantă pentVariantă pentruru idr: testul de inhibare a idr: testul de inhibare a migrării leucocitelor.migrării leucocitelor.

Page 86: Curs Cocobacili Gram Negativi

Tratament:Tratament:

in toate formele (acută, cronică, sau in toate formele (acută, cronică, sau subacută) – antibiotice, de regulăsubacută) – antibiotice, de regulă, in , in asocierasociere;e;

tetra tetra + strepto (se va inlocui cu genta);+ strepto (se va inlocui cu genta); doxi + cotrimoxazol saudoxi + cotrimoxazol sau tetra+ strepto + cotrimoxazol.tetra+ strepto + cotrimoxazol. DurataDurata:: cel puţin 6 săpt cel puţin 6 săpt.. RecRecăăderile sunt posibile în 5% derile sunt posibile în 5% din cazuri, din cazuri,

dar nu prin rezistenţa la antibdar nu prin rezistenţa la antibiotice,iotice, ci ci datorită parazitismului intracelular şi datorită parazitismului intracelular şi datorită caracterului granulomatos al datorită caracterului granulomatos al leziunilor.leziunilor.

Page 87: Curs Cocobacili Gram Negativi

EpidEpidemiologieemiologie::

sursa de infecţie: animale bolnave sau purtătoare, sursa de infecţie: animale bolnave sau purtătoare, rar omul bolnav.rar omul bolnav.

Căi de transmitere: 2/3Căi de transmitere: 2/3 prin contactul tegumentelor prin contactul tegumentelor lezate cu produse animale contaminate. Este lezate cu produse animale contaminate. Este frecvent semnalată la lucrătorii din industria cărnii şi frecvent semnalată la lucrătorii din industria cărnii şi la medici veterinari. la medici veterinari.

Consum de carne, rar , consum de carne Consum de carne, rar , consum de carne “în “în sânge”. Bacteriile mor prin prelucrare termică sânge”. Bacteriile mor prin prelucrare termică suficientă şi, în plus, sunt reduse cantitativ în ţesutul suficientă şi, în plus, sunt reduse cantitativ în ţesutul muscular.muscular.

Cel mai frecvent: transmCel mai frecvent: transmitereaiterea prin lapte nepasteuri prin lapte nepasteuri--zat.zat.

TransTransmitereamiterea prin aerosoli contaminaţi la personalul prin aerosoli contaminaţi la personalul din abatoare. din abatoare.

Rar interuman: transfuzii, transplant de măduvă, Rar interuman: transfuzii, transplant de măduvă, lapte matern, pe cale sexuală (bacterii evidenţiate lapte matern, pe cale sexuală (bacterii evidenţiate îînn spermatozoizii umani). spermatozoizii umani).

Page 88: Curs Cocobacili Gram Negativi

Profilaxie: educaţie sanitară (lapte fiert!!!)Profilaxie: educaţie sanitară (lapte fiert!!!) In abatoare: manipularea cărnii cu atenţie.In abatoare: manipularea cărnii cu atenţie. Vaccinarea bovideelor cu vaccin viu Vaccinarea bovideelor cu vaccin viu

atenuat de atenuat de B. abortusB. abortus (tulpina 19) dar şi a (tulpina 19) dar şi a caprinelor şi ovinelor faţă de caprinelor şi ovinelor faţă de B. melitensisB. melitensis (tulpina Rev 1) şi (tulpina Rev 1) şi B suius. B suius. , tulpina 2., tulpina 2.

La om nu se indică întotdeauna La om nu se indică întotdeauna vaccinarea. vaccinarea.

Se pot testa serologic şi biologic (idr. Se pot testa serologic şi biologic (idr. Burnett) cei cu risc crescut: la cei Burnett) cei cu risc crescut: la cei seronegativi se adm vaccin viu atenuat seronegativi se adm vaccin viu atenuat (tulpina 19 BA de (tulpina 19 BA de B abortusB abortus sau tulpina sau tulpina 104M). 104M).

Page 89: Curs Cocobacili Gram Negativi

Francisella tularensisFrancisella tularensis

minidefinitieminidefinitie habitat/transmiterehabitat/transmitere boli determinateboli determinate diagnostic diagnostic tratamenttratament

Page 90: Curs Cocobacili Gram Negativi

MinidefinitieMinidefinitie ccocobacil pleomorf, gram negativocobacil pleomorf, gram negativ;;

sstrict aerob, fara pili, poseda o trict aerob, fara pili, poseda o capsula fina, de natura lipidicacapsula fina, de natura lipidica;;

pprerezzenta acienta acizzilor grasi ilor grasi faciliteaza faciliteaza diagnosticarea genului diagnosticarea genului FrancisellaFrancisella..

Page 91: Curs Cocobacili Gram Negativi

Frotiu – secFrotiu – secţţiune ficatiune ficat ( (ccocobacil ocobacil pleomorf, gram negativ)pleomorf, gram negativ)

Page 92: Curs Cocobacili Gram Negativi

Habitat / transmitereHabitat / transmitere LargLargăă r răăspspâândire in naturndire in naturăă::

izolatizolatăă de la mamifere, p de la mamifere, păăssăări, ri, artropode, artropode, din din apapăă, noroi, fecalele , noroi, fecalele animalelor.animalelor.

Omul se contamineaza prin:Omul se contamineaza prin: manipularea animalelor manipularea animalelor bolnavebolnave (e.g. iepuri) (e.g. iepuri) şşi a cadavrelor;i a cadavrelor; ingestia de apă sau alimente contaminateingestia de apă sau alimente contaminate ; ; contact direct cu solul sau apa contaminatecontact direct cu solul sau apa contaminate aerogen (aerosoli contaminaţi)aerogen (aerosoli contaminaţi) ; ; profesional sunt expusi: vprofesional sunt expusi: vâânnăătorii, mtorii, măăcelariicelarii, ,

personalul de laborator (anamneza: 5-6 zile)personalul de laborator (anamneza: 5-6 zile);; este posibila transmiterea prin ceste posibila transmiterea prin căăpupuşşe;e; F. tularensisF. tularensis = poten = potenţţialialăă arm armăă biologic biologică!!!!!ă!!!!! (mare (mare

infecinfecţţiozitate).iozitate).

Page 93: Curs Cocobacili Gram Negativi

Patogenitate naturalPatogenitate naturalăă si si patogeniepatogenie

incubaincubaţţia 4-6 zile; ia 4-6 zile; doza infectantdoza infectantă:ă: 1010--50 UFC;50 UFC; forme clinice ale tularemiei:forme clinice ale tularemiei:

cutanatacutanata: forma ulcero-ganglionar: forma ulcero-ganglionarăă (70-80%)(70-80%)– – bubon tularemicbubon tularemic;; uneori există numai determinism uneori există numai determinism limfatic fără ulceraţie;limfatic fără ulceraţie;

conjuctivaconjuctiva: forma oculo-ganglionar: forma oculo-ganglionară (1%)ă (1%);; infecinfecţţia respiratorie / digestivaia respiratorie / digestiva - formele: - formele:

orofaringianorofaringianăă;; intestinalintestinalăă;; pneumonicpneumonicăă;; ttifoidicifoidică (10-15ă (10-15%%; transmitere intestinală sau ; transmitere intestinală sau

necunoscută; se poate însoţi denecunoscută; se poate însoţi de pneumonie)pneumonie)..http://www.microbesadapt.com/research/francisella/http://www.microbesadapt.com/research/francisella/

Page 94: Curs Cocobacili Gram Negativi
Page 95: Curs Cocobacili Gram Negativi

Diagnosticul de laboratorDiagnosticul de laboratorDiagnostic directDiagnostic direct 1. Produse patologice:1. Produse patologice:

raclat raclat din din ulcere cutanateulcere cutanate aspirat ganglionaraspirat ganglionar lichid de lichid de spalaturspalaturăă gastrica gastrica sputsputăă ssâângenge

Microscopie directa – Microscopie directa – imunofluorescenimunofluorescenţţaa (IF) pentru (IF) pentru identificarea rapidă a Agidentificarea rapidă a Ag

PCRPCR IzolareIzolare

medii de culturamedii de cultura îmbogăţite îmbogăţite – – sensisensibibilitate scazutlitate scazută ă (incubaţie 5-7 zile)(incubaţie 5-7 zile);;

inoculare la cobai/ inoculare la cobai/ şşoareceoarece

Diagnostic indirectDiagnostic indirect Reactii de aglutinare Reactii de aglutinare lala tub tub HemaglutinareHemaglutinare ELISAELISA

aglutininele anti aglutininele anti F. tula- F. tula- rensisrensis apar dupa a apar dupa a 7-a zi 7-a zi de boalde boală;ă;

titrul semnificativ-titrul semnificativ- 8080 (diferă (diferă de la autor la autor).de la autor la autor).

IntradermoreacIntradermoreacţţia la tularinia la tularinăă se pozitiveazse pozitiveazăă dupa a 5-a zi dupa a 5-a zi de boala – sensibilitate de de boala – sensibilitate de tip tip îîntntâârziat.rziat.

Page 96: Curs Cocobacili Gram Negativi

Izolare Izolare versusversus IF IF

Page 97: Curs Cocobacili Gram Negativi

Elemente de terapie etiotropaElemente de terapie etiotropa antibiotic activ: streptomicina;antibiotic activ: streptomicina;

alternative: tetraciclina, cloramfenicolul, alternative: tetraciclina, cloramfenicolul, gentamicina, tobramicina;gentamicina, tobramicina;

Antibiogramă: E - testAntibiogramă: E - test

dupa abcedarea bubonului este indicatdupa abcedarea bubonului este indicatăă intervenintervenţţia chirurgicalia chirurgicalăă a leziunii. a leziunii.

Page 98: Curs Cocobacili Gram Negativi

PrevenţiePrevenţie Există un vaccin viu atenuatExistă un vaccin viu atenuat Nu este de rutină administrat şi nici Nu este de rutină administrat şi nici

după un contact infectant nu este logic după un contact infectant nu este logic sa fie administrat (5 zile incubaţia, sa fie administrat (5 zile incubaţia, respectiv 14 zile seroconversia).respectiv 14 zile seroconversia).

Pentru riscuri epidemiologice evidente Pentru riscuri epidemiologice evidente ((eg. eg. personal laborator).personal laborator).

Chimioprofilaxie post-expunere: Chimioprofilaxie post-expunere: doxiciclină sau ciprofloxacină (14 zile)doxiciclină sau ciprofloxacină (14 zile)..

Page 99: Curs Cocobacili Gram Negativi

In loc de concluzieIn loc de concluzie::

““Even people who don't die are Even people who don't die are chronically sick for weeks or chronically sick for weeks or months. This is a disease that months. This is a disease that makes you really illmakes you really ill.”.”

Professor Richard Titball, Professor Richard Titball,

Defence Science & Technology LaboratoryDefence Science & Technology Laboratory