CITOLOGIE MEDICINA DENTARA
-
Author
diaconu-angela -
Category
Documents
-
view
114 -
download
2
Embed Size (px)
description
Transcript of CITOLOGIE MEDICINA DENTARA
-
CITOLOGIE Lucrarea prac)c 2 Preparatul microscopic permanent
Exclusiv pentru uz didac2c
-
Cerine necesare pentru o examinare precis: - Celulele i celelalte elemente prezente n esut s e pstrate n condiii ct mai apropiate de condiiile lor naturale (FIXARE)
- Preparatul s e transparent, subire, plat - Diferitele componente s e colorate diferit (COLORARE)
Preg/rea preparatului pentru microscopie op/c
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
Posibiliti de preparare - seciuni - in toto (structuri/organisme mici, suficient de subiri pt. a fi ntinse pe o lam) - zdrobire (pt. studiul coninutului celulei) - frotiuri (celule suspendate n fluid) - culturi celulare
Preg/rea preparatului pentru microscopie op/c
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
Preparatul microscopic permanent
Modalitatea de examinare a unor celule, fragmente de esut sau organ, crora li s-au suprimat procesele vitale prin fixare
Permite examinarea la microscopul optic a principalelor caracteristici ale celulelor i a modului lor de organizare
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
Preparatul microscopic permanent Un preparat microscopic este alctuit din:
1. obiect de examinat (subire i transparent)
2. mediu de montare (transparent)
3. suport de montare (lam i lamel)
hGp://www.agtcbioproducts.com/images/slide.jpg
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
Preparatul microscopic permanent
Scopul realizrii de a conserva - structurile celulare i - raporturile dintre ele pe un timp nelimitat.
Este folosit n: -clinic -laboratorul de anatomie patologic -medicin legal -cercetare -scop didactic
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
Etapele obinerii preparatului microscopic permanent
1. Recoltare 2. Fixare 3. Deshidratare i clarificare 3. Impregnare i includere 4. Secionare 5. Colorare 6. Montare (ntre lam i lamel) 7. Etichetare
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
1. RECOLTAREA
= Operaia prin care fragmentul de esut/organ este prelevat de la om, animal viu sau de la cadavru
RECOLTAREA BIOPSIC Se recolteaz de la om sau animal viu i se practic n scop diagnostic.
Se realizeaz prin : 1. raclare 2. puncie-biopsie 3. aspiraie cu ac fin 4. intervenie chirurgical
1. dimensiunea pieselor s nu depeasc 5 mm
2. instrumentele bine ascuite
pentru a evita zdrenuirea i pierderea paralelismului dintre planuri
3. adecvat n funcie de tipul
organului; se vor evita modificrile de volum, form i relief
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
RECOLTAREA NECROPSIC
recoltarea de la cadavrele umane se practic n laboratoarele de anatomie patologic i medicin legal cu scopul de a confrunta datele de anatomie clinic i tanatogenetice dup sacrificarea animalului, n scop de cercetare sau didactic
1. RECOLTAREA
(ct mai aproape de momentul decesului) pentru a evita procesele de autoliz
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
Recoltarea biopsic A. raclare B. puncie biopsie C. aspiraie cu ac fin D. intervenie
chirurgical - biopsie incizional - biopsie excizional
hGp://img.webmd.com/dtmcms/live/webmd/consumer_assets/site_images/ar)cles/health_tools/eczema_overview_slideshow/photolibrary_rm_photo_of_hand_with_eczema.jpg hGp://www.beliefnet.com/healthandhealing/images/si55551723.jpg
hGp://www.glowm.com/resources/glowm/graphics/gures/v1/0270/016f.jpg
A
C
D
B
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
etap critic pentru un bun preparat proces fizic sau chimic prin care:
- sunt oprite rapid procesele vitale (celulare), - pstrndu-se, cu alterri minime:
- volumul, - forma, - relieful i - raporturile moleculare (n structuri/ultrastructuri) i spaiale (ntre structuri/
ultrastructuri)
Prin fixare urmrim: 1.Conservarea esuturilor 2.Prevenirea pierderii de constitueni celulari 3.Creterea diferenierii optice a structurilor celulare 4.Mrirea consistenei esuturilor n scopul de a facilita
trecerea lor prin celelalte etape i mai ales pentru secionare
2. FIXAREA
hGp://www.leicabiosystems.com/typo3temp/pics/Sci_Lab_Histo_Lead0004_d0f91f3944.jpg
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
Serie de soluii alcoolice de concentraii crescnde (pn la 100%) pentru ndeprtarea apei i nlocuirea ei cu alcool
ndeprtarea alcoolului cu ajutorul unor ageni n care i alcoolul i parana sunt miscibli (ex: toluen)
3. DESHIDRATAREA i CLARIFICAREA Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
McGraw-Hill Companies / Junqueira Histology
-
- etapa care asigur condiii op)me pentru secionarea pieselor
Cea mai folosit mas de incluziune: parana
4. INCLUDEREA
hGp://www.leicabiosystems.com/typo3temp/pics/Embedding_028_sized_31fe12192c.jpg hGp://www.leicabiosystems.com/typo3temp/pics/Sci_Lab_Histo_Lead0008_03_a9cda89157.jpg
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
cu microtomul ( vor rezulta seciuni cu o grosime de aprox. 5m) 5. SECIONAREA
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
McGraw-Hill Companies / Junqueira Histology
-
- etapa prin care se urmrete creterea contrastului dintre elementele celulare/)sulare, prin capacitatea substraturilor morfologice (care conin proteine, acizi nucleici sau alte macromolecule) de a lega diferit coloranii
Prin metode compa)bile cu metoda de xare Pot metode universale (HE) sau specice esutului studiat
(Nissl)
6. COLORAREA Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
- permite conservarea specimenelor pentru ct mai mult )mp
ntre lam i lamel, n diferite medii de montare, iniial fluide
Protejarea seciunilor fragile de eventualele deteriorri Conservarea coloraiei i asigurarea unui mediu optic
omogen i transparent necesar examinrii microscopice
7. MONTAREA Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
8. ETICHETAREA
Pe fiecare lam se noteaz:
tipul celular/tisular sursa de recoltare fixatorul metoda de colorare data realizrii preparatului
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
-
PAUZ
-
COLORANTUL HISTOLOGIC Substan colorat, de obicei de natur organic, ce
poate intra n celul atandu-se la nivelul componentelor celulare i permind astfel diferenierea lor optic.
Nu toate substanele colorate sunt colorani! Coloranii prezint, d.p.d.v. chimic: - Grupri cromofore (purttoare de culoare) - Grupri auxocrome (cu capacitatea de a colora)
- Ionizate (principale) formeaz leg. electrochimice cu substratul - Neionizate (secundare) formeaz leg. de hidrogen cu substratul
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
Clasicare: - dup provenien: naturali (vegetali/animali) sau sinte)ci - dup caracterul chimic: - acizi: gr.auxocr. sarcin - se ataeaz pe substrat (+)
- bazici: gr.auxocr. sarcin + se ataeaz pe substrat (-) - neutri (amestecuri de col. acizi i bazici)
-
METODE DE COLORARE Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
Criterii de clasificare: 1. Momentul colorrii 2. Nr. de colorani utilizai 3. Mecanismul colorrii 4. Metoda de obinere a
coloraiei optime 5. Raportul dintre
rezultatul colorrii i culoarea colorantului
(vitale / permanente)
(simple / combinate)
(directe / indirecte cu intermediar)
(progresive / regresive cu decolorant)
(ortocromatic / metacromatic)
-
METACROMAZIA Capacitatea unui substrat de a se colora ntr-o alt culoare dect cea a
colorantului. PRINCIPIU: - existena unor grupri funcionale aflate la o distan foarte mic una de
alta. - colorantul se dispune ordonat i foarte aproape molecul de molecul
permind reaezri ale electronilor la alte nivele energetice i absorbia de alte lungimi de und din spectrul vizibil
Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
Mastocite Ob. 100x cu imersie Col.: Albastru de toluidin -- granulaii rou - violet
-
COLORAII UZUALE Exclusiv pentru uz didac2c
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti
Hematoxilin-eozin (HE) Giemsa Mallory Coloraii tricrome: Masson, Azan, Van Gieson Impregnarea argen)c Metode speciale (Cajal /Da Fano, Hematoxilin feric Regaud) Sudan (III, IV, B, BB)
1. Compoziie 2. Rezultate (text + imagini + surs) 3. Par/culariti